Valor predictivo de la proteína de unión a la heparina para la disfunción orgánica y la gravedad de la enfermedad en la sepsis pediátrica: un estudio retrospectivo

Resumen

Este artículo describe un flujo de trabajo para el análisis retrospectivo de datos clínicos destinado a evaluar mediciones seriadas de la proteína de unión a heparina y su asociación con disfunción orgánica, gravedad de la enfermedad y resultados a corto plazo en niños con sepsis ingresados en una unidad de cuidados intensivos pediátricos.

Resumen

La estratificación temprana del riesgo en la sepsis pediátrica sigue siendo difícil porque los marcadores inflamatorios convencionales no reflejan completamente la lesión endotelial ni la disfunción microcirculatoria. Este estudio observacional retrospectivo de un solo centro evaluó si la proteína de unión a heparina proporciona información pronóstica sobre la disfunción orgánica y la gravedad de la enfermedad en niños con sepsis ingresados en la unidad de cuidados intensivos pediátricos. Se incluyó un total de 150 niños con sepsis ingresados en el Hospital Popular de la Región Autónoma Zhuang de Guangxi, China. Se midieron la proteína de unión a heparina y los marcadores inflamatorios habituales dentro de las 24 horas posteriores al ingreso y nuevamente aproximadamente 48 horas después. Se calcularon los cambios absolutos y relativos a corto plazo en la proteína de unión a heparina. Los resultados incluyeron la progresión temprana de la disfunción orgánica definida por la evaluación secuencial de fallo orgánico pediátrico, alta gravedad de la enfermedad, necesidad de soporte orgánico y mortalidad por todas las causas a los 28 días. El desempeño pronóstico se evaluó mediante análisis de la curva ROC, regresión logística multivariable, regresión de Cox, evaluación de calibración y métricas de reclasificación. Niveles más altos de proteína de unión a heparina en la línea basal y trayectorias tempranas desfavorables se asociaron con mayor disfunción orgánica, mayor gravedad de la enfermedad y uso más frecuente de ventilación mecánica, terapia vasoactiva y terapia de reemplazo renal. La proteína de unión a heparina mostró un desempeño discriminativo superior en comparación con los biomarcadores inflamatorios convencionales y se mantuvo independientemente asociada con resultados adversos tras el ajuste por puntuaciones de disfunción orgánica e índices de laboratorio habituales. La inclusión de métricas de la proteína de unión a heparina en modelos que contenían puntuaciones clínicas y biomarcadores estándar mejoró la discriminación y la reclasificación del riesgo. Estos hallazgos sugieren que la evaluación temprana y seriada de la proteína de unión a heparina podría proporcionar información pronóstica útil y complementar los marcos actuales de evaluación del riesgo en la sepsis pediátrica en la unidad de cuidados intensivos pediátricos.

Introducción

La sepsis es una respuesta alterada del huésped desencadenada por una infección que provoca una disfunción orgánica potencialmente mortal y sigue siendo una causa importante de mortalidad y discapacidad en las unidades de cuidados intensivos pediátricos¹. Evidencia epidemiológica y clínica reciente indica que la sepsis pediátrica continúa representando una carga global considerable, con niños ingresados en la unidad de cuidados intensivos pediátricos (UCIP) que enfrentan altos riesgos de inestabilidad circulatoria, insuficiencia respiratoria y disfunción múltiple de órganos². El manejo actual enfatiza el reconocimiento temprano y la intervención oportuna, incluyendo terapia antimicrobiana, reanimación con fluidos, soporte vasoactivo, soporte respiratorio y terapia de reemplazo orgánico cuando esté clínicamente indicado. En la práctica rutinaria de la UCIP, la intensidad del tratamiento y la asignación de recursos generalmente se guían por marcos dinámicos de evaluación basados en puntuaciones de disfunción orgánica y gravedad de la enfermedad. Aunque estos enfoques han mejorado la estandarización de la atención de la sepsis, la identificación temprana de niños con alto riesgo durante el curso inicial en la UCIP sigue siendo difícil en esta población clínicamente heterogénea³.

Las manifestaciones tempranas de la sepsis pediátrica en la UCI pediátrica suelen ser inespecíficas⁴. La estratificación del riesgo se complica aún más por diferencias fisiológicas relacionadas con la edad, comorbilidades, foco de infección, estado inmunitario y exposición previa al tratamiento. Los marcadores inflamatorios tradicionales, como la proteína C reactiva (CRP), la procalcitonina (PCT) y el recuento de glóbulos blancos (WBC), reflejan la activación inflamatoria sistémica, pero no capturan completamente los procesos biológicos que contribuyen directamente a la disfunción orgánica. En particular, no reflejan específicamente la lesión endotelial, la alteración de la perfusión microcirculatoria ni la fuga capilar, que son centrales en la progresión de la insuficiencia orgánica relacionada con la sepsis⁵. Los sistemas de puntuación de gravedad proporcionan una imagen clínica más amplia, pero generalmente requieren múltiples variables y mediciones repetidas. Como resultado, el cálculo de la puntuación puede retrasarse respecto a la ventana inicial de toma de decisiones, en la que los médicos deben identificar a los niños con mayor probabilidad de desarrollar disfunción orgánica progresiva. Esto genera la necesidad de biomarcadores que sean tanto biológicamente relevantes como operativamente factibles para la evaluación temprana del riesgo en la UCI pediátrica⁶.

La proteína de unión a heparina (HBP), liberada predominantemente por neutrófilos activados, promueve la permeabilidad endotelial y la fuga capilar, y se ha asociado con hipotensión, perfusión tisular alterada y disfunción orgánica en infecciones graves y sepsis⁷. En comparación con biomarcadores inflamatorios convencionales, la HBP podría reflejar de manera más directa la alteración del eje endotelio-microcirculación antes de que aparezcan cambios notorios en los puntajes clínicos compuestos. Por el contrario, la albúmina se ve afectada por la fuga capilar, el consumo inflamatorio, la permeabilidad vascular y la pérdida proteica relacionada con enfermedades críticas. Por lo tanto, la relación entre HBP y albúmina podría proporcionar una señal compuesta que vincule la activación endotelial impulsada por neutrófilos con la pérdida de reservas proteicas circulantes. Esta justificación fisiopatológica respaldó la evaluación exploratoria de la relación HBP-albúmina como un índice relacionado con la gravedad en el presente estudio.

Estudios previos en pacientes con infección grave o sepsis han reportado asociaciones entre los niveles de HBP y la gravedad de la enfermedad, las necesidades de soporte orgánico y los resultados adversos. Algunas evidencias también sugieren que la dinámica a corto plazo de HBP podría mejorar la reclasificación del riesgo más allá de las mediciones en un solo momento⁸. Sin embargo, la evidencia en poblaciones pediátricas basadas en UCI pediátricas (PICU) sigue siendo limitada. Los estudios existentes varían en las ventanas de muestreo, las definiciones de los puntos finales y las estrategias de umbral, y aún no está claro cuáles son los enfoques prácticos para integrar mediciones seriadas de HBP en la evaluación del riesgo de sepsis pediátrica. Además, no se ha abordado adecuadamente si la heterogeneidad clínica relacionada con la edad modifica el valor pronóstico de HBP.

Por lo tanto, este estudio evaluó el valor predictivo de los niveles tempranos de HBP y de la dinámica a corto plazo de HBP en niños con sepsis tratados en la UCI pediátrica, mediante una cohorte retrospectiva basada en datos del mundo real. Comparamos HBP con biomarcadores inflamatorios comúnmente utilizados, evaluamos su asociación con la disfunción orgánica definida por la evaluación pediátrica de insuficiencia orgánica secuencial (pSOFA) y analizamos su valor pronóstico adicional al incorporarlo a indicadores clínicos y de laboratorio de rutina. También se consideraron hallazgos estratificados por edad y medidas de gravedad relacionadas con el soporte orgánico para abordar la heterogeneidad clínicamente relevante. Al presentar un flujo de trabajo de análisis de datos clínicos retrospectivos alineado con los mecanismos de lesión endotelial y disfunción orgánica, este estudio tuvo como objetivo determinar si la evaluación temprana y seriada de HBP puede complementar los marcos existentes de evaluación de riesgo para la sepsis pediátrica en la UCI pediátrica.

Protocolo

Este estudio fue aprobado por el comité de ética institucional del Hospital Popular de la Región Autónoma Zhuang de Guangxi (número de aprobación IRB: KY-ZC-2023-035). Se dispensó el requisito de consentimiento informado porque este análisis retrospectivo utilizó datos clínicos desidentificados recopilados durante la atención rutinaria.

Diseño del estudio y entorno
Este fue un estudio observacional retrospectivo de cohorte unicéntrico realizado en la Unidad de Cuidados Intensivos Pediátricos (UCIP) del Hospital Popular de la Región Autónoma Zhuang de Guangxi. Se revisaron todos los ingresos consecutivos a la UCIP entre el 1 de enero de 2022 y el 31 de diciembre de 2025. Los datos clínicos y de laboratorio se extrajeron del sistema de historias clínicas electrónicas, del sistema de información de laboratorio (LIS) y del sistema de información de cuidados críticos.

El momento de ingreso en la UCI pediátrica se definió como el tiempo cero para todas las ventanas de exposición, biomarcadores, soporte orgánico y resultados. Antes de la extracción de datos, se especificaron previamente y se implementaron los criterios de elegibilidad, las ventanas temporales de muestreo de biomarcadores, las definiciones de los puntos finales, las métricas de gravedad y el plan de análisis estadístico, utilizando un protocolo fijo de extracción (especificación de extracción LIS versión 1.0; diccionario clínico de datos versión 1.0). Tras la extracción, todos los registros fueron desidentificados. Dos investigadores verificaron de forma independiente las marcas de tiempo y la coherencia con las fuentes para los valores de biomarcadores, las variables relacionadas con la evaluación pediátrica secuencial de fallo orgánico (pSOFA), los registros de terapia vasoactiva y los eventos de soporte orgánico. Las discrepancias se resolvieron mediante revisión conjunta de los registros originales. La conformación de la cohorte siguió pasos previamente especificados, incluyendo cribado, confirmación de elegibilidad, confirmación de la ventana de biomarcadores y revisión de la completitud de los puntos finales. El flujo final de la cohorte se muestra en Figura 1.

Participantes y criterios de elegibilidad
Eran elegibles los niños de 1 mes a 14 años admitidos en la UCI pediátrica con sepsis. Los casos candidatos se identificaron a partir de los registros de ingreso a la UCI pediátrica y de diagnósticos relacionados con sepsis, y luego se confirmaron mediante revisión manual de historias clínicas. La sepsis se definió como infección sospechada o confirmada con disfunción orgánica documentada durante la atención en la UCI pediátrica y respaldada por una evaluación basada en pSOFA.

Para garantizar una exposición comparable a biomarcadores tempranos, se requirió que los pacientes incluidos tuvieran medidos tanto la proteína con afinidad por heparina (HBP) como la proteína C reactiva (PCR) dentro de las 24 horas posteriores al ingreso en la UCI pediátrica (UCIP) y que contaran con datos suficientes para el cálculo de la puntuación pSOFA. Los criterios de inclusión fueron edad entre 1 mes y 14 años, ingreso en UCIP con sepsis, disponibilidad de HBP y PCR entre 0 y 24 horas, y datos completos para la evaluación del resultado principal, incluyendo la puntuación basal de pSOFA, la evaluación de pSOFA a las 72 horas y el seguimiento de supervivencia. Los criterios de exclusión fueron la ausencia de HBP o PCR basal, estancia en UCIP < 24 h, muerte o alta dentro de las primeras 24 h del ingreso, y falta de consentimiento informado. <24 h, falta de variables clave necesarias para la adjudicación del desenlace, o inmunosupresión grave que probablemente altere sustancialmente los perfiles de biomarcadores inflamatorios. Se consideró inmunosupresión grave la presencia de una neoplasia hematológica activa, administración de quimioterapia o tratamiento inmunosupresor relacionado con trasplante, terapia prolongada con corticosteroides sistémicos a dosis inmunosupresoras, inmunodeficiencia primaria, u otro tratamiento inmunosupresor intensivo documentado antes o durante la admisión en la UCI pediátrica. En caso de múltiples admisiones en la UCI pediátrica, solo se incluyó la primera admisión elegible.

Definiciones de resultados y métricas de gravedad
El punto final primario fue la progresión temprana de disfunción orgánica dentro de las 72 h posteriores al ingreso en la UCI pediátrica, definida como un aumento de 2 o más puntos en el pSOFA desde el valor basal hasta el pSOFA más alto registrado durante las primeras 72 h (ΔpSOFA ≥ 2). El pSOFA basal fue la primera puntuación de pSOFA registrada entre 0 y 24 h tras el ingreso en la UCI pediátrica; si había múltiples valores disponibles, se utilizó la puntuación más cercana al momento del ingreso. El valor de pSOFA a las 72 h se definió como el pSOFA máximo registrado entre las 0 y 72 h.

Se definió a priori una alta gravedad de la enfermedad como un pSOFA máximo a las 72 h ≥ 8, y este umbral se aplicó de forma uniforme en los análisis categóricos. Este umbral se especificó previamente basándose en la práctica de estratificación de gravedad de la unidad y en su interpretabilidad clínica para la identificación temprana de sepsis pediátrica de alto riesgo. El pSOFA también se analizó como una medida continua de la carga de disfunción orgánica.

Los resultados secundarios fueron shock séptico, ventilación mecánica invasiva, uso de fármacos vasoactivos, terapia de reemplazo renal continuo (CRRT), mortalidad en la UCI pediátrica y mortalidad por todas las causas a los 28 días. Se definió shock séptico como una falla circulatoria persistente que requiere soporte vasoactivo tras la reanimación con líquidos, con hipoperfusión tisular documentada, incluyendo niveles elevados de lactato y/o hallazgos anormales de perfusión periférica. Los resultados relacionados con el soporte orgánico se codificaron como variables binarias dentro de ventanas tempranas preespecificadas. Para obtener una medida más detallada del soporte hemodinámico, también se extrajo o calculó la puntuación vasoactiva-inotrópica (VIS) en pacientes que recibieron terapia vasoactiva durante las primeras 24 h tras el ingreso a la UCI pediátrica. La VIS se utilizó como una variable cuantitativa de intensidad del soporte orgánico en los análisis de correlación y asociación con la gravedad, mientras que el uso binario de la terapia vasoactiva se mantuvo como un resultado clínicamente interpretable de necesidad de tratamiento.

Medición de biomarcadores y recopilación de datos
La HBP y la PCR se midieron en el laboratorio central utilizando flujos de trabajo inmunoenzimáticos automatizados y estandarizados, de acuerdo con procedimientos rutinarios de control de calidad clínica. Las pruebas de biomarcadores se realizaron con muestras de sangre venosa recogidas como parte de la atención rutinaria en la UCI pediátrica y procesadas según el flujo de trabajo preanalítico estándar del laboratorio. Los resultados de HBP se informaron en ng/mL y los de PCR en mg/L. La HBP se midió mediante un ensayo inmunoturbidimétrico potenciado con partículas en una plataforma automatizada completa de química clínica/inmunoensayo. La PCR se midió utilizando un ensayo inmunoturbidimétrico de alta sensibilidad. El flujo de trabajo analítico y los procedimientos internos de control de calidad siguieron un protocolo de laboratorio con control de versiones (SOP de laboratorio versión 2022.1) y no cambiaron en su lógica analítica fundamental durante el período del estudio.

Los registros de laboratorio se exportaron desde el LIS mediante una consulta bloqueada y un flujo de trabajo de mapeo de campos (especificación de extracción del LIS versión 1.0), que incluyó tanto la hora de extracción sanguínea como la hora del informe. La HBP y la PCR basales se definieron como los primeros valores informados dentro de las 0–24 h posteriores al ingreso a la UCI pediátrica. La HBP y la PCR del día 2 se definieron como las mediciones más cercanas a las 48 h dentro de una ventana fija de 36–60 h. Esta ventana del día 2 se utilizó de forma consistente en todos los análisis dinámicos.

El cambio absoluto en HBP se calculó como el HBP del día 2 menos el HBP basal. El cambio relativo en HBP (%) se calculó como [(HBP del día 2 − HBP basal) / HBP basal] × 100. Si el HBP basal estaba por debajo del límite de cuantificación del ensayo o se registraba como cero tras la conversión del sistema, no se calculó el cambio relativo en HBP; estos pacientes se mantuvieron en los análisis que utilizaban el HBP basal y el cambio absoluto en HBP, pero se excluyeron de los análisis de cambio porcentual. La relación HBP/albumina se calculó dividiendo el HBP por la albúmina sérica medida dentro del intervalo de tiempo correspondiente y se evaluó como un índice compuesto exploratorio que refleja la activación endotelial y la pérdida de proteínas relacionada con la fuga capilar.

Además de HBP y PCR, se extrajeron marcadores inflamatorios, relacionados con la perfusión y de función orgánica, disponibles de forma rutinaria, para comparación y modelos multivariables. Estos incluyeron recuento de glóbulos blancos, procalcitonina, lactato, albúmina, creatinina, recuento de plaquetas, variables de coagulación y variables de función hepática cuando estaban disponibles. Los valores de interleucina-6 (IL-6) e interleucina-8 (IL-8) se extrajeron del sistema de información de laboratorio (LIS) cuando se habían medido como parte de la evaluación clínica rutinaria dentro de las mismas ventanas tempranas de evaluación. No se requirieron IL-6 ni IL-8 para la inclusión en la cohorte y solo se utilizaron en los análisis donde estuvieron disponibles. Esta regla se aplicó para evitar excluir a pacientes que de otro modo serían elegibles únicamente porque la prueba de citocinas no se realizaba de forma rutinaria en todos los casos.

Se extrajeron del registro médico electrónico y del sistema de información de cuidados críticos, mediante el uso del diccionario clínico de datos predefinido (versión 1.0), datos demográficos, comorbilidades, fuente de infección, hallazgos microbiológicos cuando estuvieron disponibles, signos vitales al ingreso en la UCI pediátrica, tratamiento antimicrobiano temprano, medidas de resucitación e intervenciones de soporte orgánico. Las variables de soporte orgánico incluyeron ventilación mecánica invasiva, terapia vasoactiva, terapia de reemplazo renal continuo (CRRT), volumen de bolo de fluidos y el índice de soporte vasoactivo (VIS) durante las primeras 24 horas cuando fue aplicable. Las variables necesarias para el pSOFA se recopilaron dentro de ventanas preespecificadas. Si un componente del pSOFA generado automáticamente era inconsistente con los valores originales, dos investigadores revisaron la historia clínica y recalculaban la puntuación utilizando las reglas de puntuación preestablecidas. El control de calidad de los datos incluyó validación de marcas de tiempo, detección de duplicados, verificación de rangos y distribuciones, confirmación de la fuente de valores extremos y registro de auditoría de correcciones manuales.

Para preservar la reproducibilidad y evitar al mismo tiempo formulaciones innecesarias específicas de una marca en el texto principal del protocolo, la documentación del ensayo se registró según la clase del método, el tipo de plataforma, el entorno de software, las reglas del rango de cuantificación, el uso de calibradores y controles, y los procedimientos internos de control de calidad. Se proporciona información detallada sobre reactivos, calibradores, controles y software en la Tabla de Materiales. El control interno de calidad se realizó diariamente, y solo se incluyeron las series de trabajo del laboratorio que cumplían con los criterios de aceptación del coeficiente de variación del laboratorio. Los valores por debajo del límite inferior de cuantificación se establecieron en el límite inferior reportable. Los valores por encima del rango reportable superior se establecieron en el límite superior reportable, a menos que estuviera disponible un resultado repetido validado de la misma muestra. Las unidades del laboratorio se verificaron para garantizar su consistencia antes del análisis; no se realizó ninguna conversión de unidades a menos que se confirmara una discrepancia en la unidad del LIS frente al informe original.

Datos faltantes y reglas de manejo de datos
Las reglas de manejo de datos se especificaron previamente. Se excluyeron de los análisis del punto final primario los pacientes con datos faltantes de HBP basal, PCR basal, variables pSOFA basales o variables pSOFA a las 72 h. Se mantuvieron en los análisis de biomarcadores basales y en los resúmenes generales de resultados clínicos a los pacientes con HBP del día 2 faltante, pero se excluyeron de los análisis que requerían índices dinámicos de HBP. Se mantuvieron en todos los análisis primarios a los pacientes sin mediciones de IL-6 o IL-8, y solo se excluyeron de las comparaciones de modelos que incluían citocinas.

Se utilizó un análisis de casos completos para cada modelo multivariable, y se informó el tamaño muestral específico del análisis. No se utilizó imputación múltiple en los análisis principales porque el estudio se centró en las trayectorias temporales de los biomarcadores observados y la disfunción orgánica. Se consideró el riesgo de sesgo de selección provocado por la exclusión de pacientes sin HBP basal, PCR basal o datos completos del punto final pSOFA al interpretar los hallazgos.

No se excluyeron valores de laboratorio extremos únicamente por motivos estadísticos. Los valores atípicos se verificaron frente a los registros originales y se mantuvieron si se confirmaron como valores reales. Únicamente se corrigieron errores evidentes de documentación o de entrada de unidades, y todas las correcciones se registraron en el historial de auditoría con identificadores trazables.

Análisis estadístico
Todos los análisis siguieron un plan de análisis estadístico preespecificado (versión 1.0 de la especificación de análisis). Las variables continuas se evaluaron mediante inspección visual de histogramas y la prueba de Shapiro-Wilk. Las variables con distribución normal se resumieron como media ± desviación estándar y se compararon utilizando pruebas t para muestras independientes. Las variables con distribución no normal se resumieron como mediana (rango intercuartílico) y se compararon utilizando la prueba de Mann-Whitney U. Las variables categóricas se resumieron como frecuencias (porcentajes) y se compararon mediante la prueba de chi-cuadrado o la prueba exacta de Fisher.

Para los análisis descriptivos, los pacientes se estratificaron por cuartiles de HBP basal y por separado según la presencia o ausencia de progresión temprana de disfunción orgánica (ΔpSOFA ≥ 2). Los cuartiles basales de HBP se utilizaron para describir patrones de dosis-respuesta a lo largo de la distribución observada del biomarcador sin asumir un punto de corte clínico universal, ya que los umbrales pediátricos validados de HBP para la gravedad de la sepsis aún son inciertos y pueden variar según la plataforma del ensayo, la distribución por edad y la ventana de muestreo. La edad se analizó como una covariable continua en los modelos principales. Para abordar la heterogeneidad clínica relacionada con la edad, también se realizaron análisis prespecificados de subgrupos utilizando estratos de edad de <1 año y ≥1 año, con comprobaciones exploratorias adicionales por categorías de edad cuando el tamaño de la muestra lo permitió.

Se evaluaron las asociaciones entre las métricas de PTH, incluyendo PTH basal, PTH del día 2, cambio absoluto de PTH, cambio relativo de PTH y relación PTH-albumina, y los indicadores de gravedad clínica mediante coeficientes de correlación de rangos de Spearman. Las variables que reflejan soporte orgánico temprano, incluyendo ventilación mecánica invasiva, terapia vasoactiva, TCRRT, volumen de bolo de fluidos, días de ventilador, duración de la estancia en la UCI pediátrica y el índice VIS, se consideraron como correlatos de gravedad clínica y manejo en los análisis descriptivos y de asociación.

Se evaluó el rendimiento discriminativo para la progresión temprana de disfunción orgánica y la gravedad elevada de la enfermedad mediante curvas de característica operativa del receptor (ROC). Se calcularon el área bajo la curva ROC (AUC) e intervalos de confianza del 95 % para HBP, PCR, procalcitonina, lactato, albúmina, pSOFA, la relación HBP-albúmina y modelos combinados. Las AUC se compararon utilizando la prueba de DeLong. Los valores óptimos de corte se identificaron mediante el índice de Youden, y se informaron sensibilidad, especificidad, valor predictivo positivo, valor predictivo negativo y razones de verosimilitud.

Se utilizó una regresión logística multivariable para estimar las asociaciones independientes entre las métricas de HBP y los resultados binarios de gravedad, incluyendo la progresión temprana de disfunción orgánica y la alta severidad de la enfermedad. Las covariables se seleccionaron a priori según su relevancia clínica y disponibilidad de datos, e incluyeron edad, categoría de fuente de infección, pSOFA basal, lactato, albúmina, procalcitonina, PCR, shock séptico al ingreso y, cuando correspondía, variables de soporte orgánico temprano. Los modelos de predicción principales para los resultados de gravedad temprana se limitaron a las variables disponibles dentro de la ventana preestablecida de evaluación temprana, con el fin de reducir la superposición temporal con la evolución del resultado. El valor pronóstico incremental se evaluó mediante la adición secuencial de variables de HBP al modelo clínico basal. Para la mortalidad por todas las causas a los 28 días, se utilizó una regresión de riesgos proporcionales de Cox, y se verificó el supuesto de riesgos proporcionales mediante los residuos de Schoenfeld. Antes del ajuste del modelo, se evaluó la colinealidad entre los predictores candidatos, y se limitó el número de covariables incluidas en cada modelo para mantener una relación adecuada de eventos por variable.

La mejora del modelo tras la adición de HBP se evaluó utilizando métricas de discriminación, calibración y reclasificación. La calibración se evaluó mediante gráficos de calibración, intercepto y pendiente de calibración y la puntuación de Brier, con la prueba de Hosmer-Lemeshow informada como verificación complementaria de calibración. La reclasificación se cuantificó mediante la mejora continua neta de reclasificación y la mejora integrada de discriminación. Los análisis de sensibilidad preespecificados incluyeron reducir la ventana de muestreo del día 2 de 36–60 h a 42–54 h, repetir los análisis con una definición más estricta de progresión de disfunción orgánica (ΔpSOFA ≥ 3), excluir valores extremos de biomarcadores clínicamente atípicos tras la verificación de la fuente y repetir los modelos principales tras excluir a los pacientes sin mediciones dinámicas completas de HBP. Los análisis de sensibilidad se informaron en la sección de Resultados o en tablas complementarias, según correspondiera.

Los análisis estadísticos se realizaron en R versión 4.3.2 utilizando un entorno de análisis bloqueado (versión del entorno de análisis v1.0). Los paquetes principales fueron pROC versión 1.18.5 para los análisis ROC, survival versión 3.5-7 para los modelos de tiempo hasta el evento y rms versión 6.8-0 para los análisis de calibración. La mejora continua neta de la reclasificación y la mejora integrada de la discriminación se calcularon utilizando rutinas validadas implementadas en el conjunto prescrito de guiones de análisis (conjunto de paquetes de guiones v1.0). Todas las pruebas fueron bilaterales y se consideró estadísticamente significativo un valor de p < 0,05.

Resultados

Características basales según estratos de HBP y estado de progresión temprana de disfunción orgánica
Un total de 150 niños con sepsis se incluyeron en la cohorte final para el análisis. Cuando los pacientes se estratificaron según cuartiles basales de proteína de unión a heparina (HBP), la HBP basal aumentó de 21,1 ng/mL (rango intercuartílico [RIC], 15,9–26,2) en Q1 a 262,8 ng/mL (RIC, 201,6–308,7) en Q4 (p < 0,001; Tabla 1). La edad, el sexo, el peso corporal y las comorbilidade...

Discusión

Este estudio de cohorte retrospectivo realizado en una unidad de cuidados intensivos pediátricos (UCIP) encontró que la proteína de unión a heparina (HBP) se asoció estrechamente con la carga de disfunción orgánica y la gravedad de la enfermedad en la sepsis pediátrica, y proporcionó información pronóstica adicional más allá de los marcadores inflamatorios convencionales⁹. Niveles basales más elevados de HBP y aumentos mayores a corto plazo se asociaron con puntuaciones más altas en la evaluación ...

Materiales

Lista de materiales utilizados en este artículo

Nombre	Empresa	Número de catálogo	Comentarios
Conjunto de secuencias de análisis	Investigadores del estudio	Conjunto de scripts versión 1.0	Conjunto de scripts de R con control de versiones utilizado para la limpieza de datos, estadísticas descriptivas, análisis ROC, regresión logística, regresión de Cox, análisis de calibración, análisis de reclasificación, análisis por subgrupos y generación de figuras/tablas.
Analizador automatizado de química clínica/inmunoensayo	Plataforma del laboratorio central del hospital	Sistema institucional, no catalogado comercialmente	Plataforma clínica de química/inyunoensayo completamente automatizada utilizada en el laboratorio central del hospital para pruebas rutinarias de biomarcadores. La plataforma exacta fue mantenida bajo el laboratorio’procedimiento operativo estándar
Paquete base stats de R	Fundación R para la Computación Estadística	Incluido en R 4.3.2	Utilizado para estadísticas descriptivas estándar, pruebas de Shapiro-Wilk, pruebas t, pruebas de chi-cuadrado, prueba de Fisher’pruebas exactas y pruebas no paramétricas cuando sea aplicable.
Diccionario de datos clínicos	Investigadores del estudio	Diccionario de datos clínicos versión 1.0	Diccionario de datos desarrollado por el investigador que define variables demográficas, fuente de infección, comorbilidades, intervenciones, variables de soporte orgánico, componentes del pSOFA y campos de resultados.
serie de analizadores inmunoensayos cobas e	Roche Diagnostics	Dependiente de la plataforma; ningún número de catálogo de reactivo único	Familia de analizadores compatible con los ensayos Roche Elecsys, incluida la IL-6. Utilizado cuando se solicitaba la prueba de citocinas como parte de la atención de rutina.
Sistema de información de cuidados críticos	Unidad de Cuidados Intensivos Pediátricos, Personal’s Hospital de la Región Autónoma Zhuang de Guangxi	Sistema institucional, no catalogado comercialmente	Sistema de origen para el tiempo de ingreso a la unidad de cuidados intensivos pediátricos, registros de soporte orgánico, ventilación mecánica, terapia vasoactiva, volumen de bolo de fluidos, terapia de reemplazo renal continuo y variables relacionadas con la evaluación pediátrica secuencial de insuficiencia orgánica.
Conjunto de datos de análisis desidentificado	Investigadores del estudio	Conjunto de datos institucional, no catalogado comercialmente	Conjunto de datos retrospectivo desidentificado que contiene ingresos pediátricos por sepsis elegibles, mediciones de biomarcadores, registros de soporte orgánico, variables de pSOFA y datos de resultados a los 28 días. El acceso está sujeto a la aprobación ética institucional y de gobernanza de datos.
Diluyente MultiAssay	Roche Diagnostics	7299010190	Diluyente de muestra indicado para los flujos de trabajo del ensayo Roche Elecsys IL-6.
Sistema de historial médico electrónico	Personas’s Hospital de la Región Autónoma Zhuang de Guangxi	Sistema institucional, no catalogado comercialmente	Sistema fuente de datos demográficos, registros de diagnóstico, notas clínicas, comorbilidades, información sobre tratamientos, signos vitales, eventos de soporte orgánico y seguimiento de resultados.
Secuencias de comandos para gráficos y generación de tablas	Investigadores del estudio	Incluido en el conjunto del paquete de guiones, versión 1.0	Utilizado para generar figuras para publicaciones, tablas analíticas, curvas de característica operativa del receptor, gráficos de AUC dependientes del tiempo y representaciones de subgrupos a partir del conjunto de datos de análisis bloqueado.
Kit ELISA de Interleucina-8 Humana	Thermo Fisher Scientific / Invitrogen	BMS204-3	Kit de ensayo inmunoenzimático para la detección cuantitativa de interleucina-8 humana. Incluido como fuente del ensayo de interleucina-8 cuando la prueba de interleucina-8 estaba disponible en el sistema de información de laboratorio.
Kit ELISA de Interleucina-8 Humana, formato de diez placas	Thermo Fisher Scientific / Invitrogen	BMS204-3TEN	Formato de diez placas del kit ELISA de interleucina-8 humana. Enumerado como un formato de ensayo disponible para la medición de interleucina-8.
Sistema de información de laboratorio	Personas’s Hospital de la Región Autónoma Zhuang de Guangxi	Sistema institucional, no catalogado comercialmente	Sistema de origen para HBP, PCR, procalcitonina, lactato, albúmina, hemograma completo, variables de coagulación, variables de función hepática y renal, interleucina-6 e interleucina-8 cuando estén disponibles.
Especificación de extracción del sistema de información de laboratorio	Investigadores del estudio	Especificación de extracción LIS versión 1.0	Especificación de extracción desarrollada por el investigador que define variables del biomarcador, momento de extracción de sangre, momento de informe, ventanas de muestreo, verificaciones de unidades y asignación de campos desde el sistema de información de laboratorio.
Procedimiento operativo estándar de laboratorio	Personas’s Hospital de la Región Autónoma Zhuang de Guangxi, laboratorio central	SOP de laboratorio versión 2022.1	Protocolo interno con control de versiones para el procesamiento rutinario de biomarcadores, operación de ensayos, reglas de rango informable, control interno de calidad y liberación de resultados.
PreciControl Multimarcador	Roche Diagnostics	5341787190	Material de control de calidad listado para los flujos de trabajo del ensayo Roche Elecsys IL-6.
paquete pROC para R	CRAN / autores de paquetes de R	Versión 1.18.5	Paquete de R utilizado para el análisis de curvas ROC, estimación del área bajo la curva, intervalos de confianza y pruebas de DeLong.
software estadístico R	Fundación R para la Computación Estadística	Versión 4.3.2	Entorno de computación estadística utilizado para todos los análisis.
paquete rms de R	CRAN / autores de paquetes R	Versión 6.8-0	Paquete R utilizado para modelado de regresión, gráficos de calibración, intercepto y pendiente de calibración, y evaluación del desempeño del modelo.
Plan de análisis estadístico	Investigadores del estudio	Versión 1.0 de la especificación de análisis	Plan estadístico prespecificado que define la codificación de los puntos finales, análisis descriptivos, análisis de características operativas del receptor, modelos de regresión, métricas de reclasificación y análisis de sensibilidad.
paquete survival de R	CRAN / autores de paquetes R	Versión 3.5-7	Paquete R utilizado para la regresión de riesgos proporcionales de Cox y la verificación de modelos relacionados con la supervivencia.