Este estudio se realizó conforme a los estándares éticos del Comité de Ética Médica del Sexto Hospital Shijiazhuang y fue aprobado por el comité bajo el identificador de aprobación nº 2022111709. Se obtuvo el consentimiento informado por escrito de todos los participantes antes de la inscripción. Una visión general esquemática del diseño del estudio y del flujo de trabajo experimental se presenta en la Figura 1.

Figura 1. Esquema del flujo de trabajo del diseño del estudio y hallazgos clave. La figura resume el flujo de trabajo general del estudio que investiga la asociación entre el polimorfismo MIR30C rs928508 y los resultados de analgesia epidural en mujeres primíparas. El flujo de trabajo incluye el reclutamiento de participantes, genotipado MIR30C rs928508, estratificación basada en genotipos, administración de analgesia epidural estandarizada, evaluación de resultados y análisis estadístico. Los resultados evaluados incluyeron puntuaciones de dolor de la Escala Visual Analógica (VAS), duración de la fase de parto, resultados neonatales y reacciones adversas relacionadas con la analgesia. El esquema también destaca los hallazgos principales, incluyendo puntuaciones más altas de dolor, parto prolongado en primera fase y una mayor incidencia de dolor en el sitio de la punción entre portadoras del genotipo GG. VAS, Escala Analógica Visual; SNP, polimorfismo de nucleótido único. Por favor, haz clic aquí para ver una versión ampliada de esta figura.
Datos clínicos
En el Sexto Hospital de Shijiazhuang, las mujeres nulíparas que dieron a luz entre enero de 2022 y enero de 2025 fueron inscritas consecutivamente como sujetos de estudio a través del sistema de historial médico electrónico del hospital, con un total de 202 casos incluidos. Durante las visitas prenatales entre las semanas 28 y 36 de gestación, se introdujeron mujeres nulíparas elegibles en el estudio y se proporcionó un consentimiento previo previo por escrito. Las pacientes finalmente incluidas en el análisis fueron aquellas que partieron entre las semanas 37 y 41 de gestación, tuvieron un embarazo único y presentaron presentación cefálica.
Los criterios de inclusión fueron los siguientes: 1) mujeres sanas y primíparas de entre 20 y 35 años; 2) etnia han china; 3) embarazo único en presentación cefálica con edad gestacional entre 37 y 41 semanas; y 4) parto vaginal espontáneo o asistido planificado con indicaciones para analgesia epidural. Las indicaciones para la analgesia epidural fueron: (a) solicitud materna con consentimiento informado firmado; (b) parto activo (dilatación cervical ≥2 cm con contracciones uterinas regulares); y (c) evaluación obstétrica que confirma la idoneidad para el parto vaginal.
Los criterios de exclusión incluían: 1) comorbilidades embarazosas como hipertensión gestacional, diabetes mellitus o enfermedades cardiovasculares graves; 2) embarazo múltiple; 3) conversión a cesárea tras iniciar la analgesia del parto; 4) anomalías estructurales de la columna vertebral; y 5) contraindicaciones a la analgesia del parto. Las contraindicaciones a la analgesia de parto incluían: (a) rechazo materno o incapacidad para cooperar; (b) aumento de la presión intracraneal, deformidad espinal o infección local en el lugar de la punción; (c) trastornos de la coagulación (recuento de plaquetas de <70 × 109/L o anomalías conocidas del factor de coagulación); (d) hipovolemia o shock no corregido; (e) alergia a anestésicos locales u opioides; y (f) emergencias obstétricas (por ejemplo, malestar fetal que requiere cesárea inmediata, prolapso del cordón umbilical o placenta previa con sangrado activo).
El poder estadístico post hoc se calculó como 0,91, lo que indica que el tamaño de la muestra era suficiente para detectar diferencias en las frecuencias de genotipo y alelo entre la población estudiada y la población de referencia.
Analgesia y anestesia
Antes de la anestesia epidural, todas las mujeres primíparas se sometieron a un seguimiento continuo de los signos vitales. La depresión respiratoria se definió como una frecuencia respiratoria <10 respiraciones/min o saturación de oxígeno (SpO₂) <90%, hipotensión como presión arterial sistólica <90 mmHg o una disminución del >20% respecto al estado inicial, y retención urinaria como la incapacidad de orinar espontáneamente en las 6 horas posparto que requiere cateterización. La dilatación cervical se evaluó mediante un examen vaginal digital realizado por el obstetra asistente o una matrona certificada de guardia. Todos los examinadores recibieron formación estandarizada en evaluación de dilatación cervical utilizando un simulador de examen cervical, con evaluaciones regulares de control de calidad para garantizar la consistencia entre evaluadores. Los exámenes cervicales se realizaban rutinariamente cada 2 horas durante el parto activo o con mayor frecuencia cuando se sospechaban anomalías en la progresión del parto. La analgesia epidural se inició cuando la dilatación cervical documentada llegó a ≥2 cm, según lo registrado por el profesional obstétrico adjunto.
Se siguió un protocolo estandarizado de analgesia epidural. Con el partiente colocado en la posición de decúbito lateral izquierdo, el espacio epidural se accedía a través del espacio intervertebral L3–L4 mediante la técnica de pérdida de resistencia a la solución salina. Se adelantó un catéter epidural 3–4 cm en el espacio epidural. Antes de administrar cualquier medicamento, se realizó una aspiración suave a través del catéter. La ausencia de líquido cefalorraquídeo o sangre confirmó la correcta colocación del catéter y excluyó posicionamiento intratecal o intravascular. A continuación, se administró una dosis de prueba de 5 mL de cloruro de lidocaína al 1% por vía epidural.
A esto le siguió un periodo de observación de 10 minutos, durante el cual el parturio fue monitorizado de cerca según criterios de seguridad predefinidos. Estos criterios incluían la ausencia de signos de toxicidad sistémica local por anestesia (por ejemplo, entumecimiento perioral, gusto metalicado, tinnitus o agitación), ausencia de signos de bloqueo espinal alto o total (por ejemplo, progresión rápida del bloqueo motor, dispnea, disfonía o alteración del estado mental), y el mantenimiento de la estabilidad hemodinámica, definida como la frecuencia cardíaca y la presión arterial manteniéndose dentro del 20% de los valores iniciales. Tras confirmar que se habían cumplido todos los criterios de seguridad, se administró una dosis de carga de 10 mL que contenía 0,1% de cloruro de ropivacaína y 0,4 μg/mL de citrato de sufentanilo.
Medidas de Resultados
Se registraron características demográficas y obstétricas básicas de las mujeres primíparas, incluyendo la edad, el índice de masa corporal (IMC), la edad gestacional, la temperatura corporal en el momento de la suspensión de la analgesia, la duración de la primera, segunda y tercera etapa del parto, y la duración total del parto. La temperatura corporal se midió utilizando un termómetro axilar digital estandarizado colocado en la axila derecha durante 5 minutos por personal de enfermería cualificado en el momento de la suspensión de la analgesia. Las duraciones de la fase de parto fueron registradas prospectivamente por la matrona o el obstetra adjunto según criterios obstétricos estandarizados predefinidos. La primera etapa del parto se definió como el intervalo desde las contracciones uterinas regulares con dilatación cervical ≥4 cm hasta la dilatación cervical completa (10 cm); la segunda etapa se extendió desde la dilatación cervical completa hasta el parto fetal; y la tercera etapa se extendió desde el parto fetal hasta el parto placentario completo. La duración total del trabajo se calculó como la suma de las tres etapas. Todas las mediciones se registraron en tiempo real en el partograma y en la historia clínica electrónica. Todo el personal clínico implicado en la gestión laboral recibió formación uniforme sobre estas definiciones antes de iniciar el estudio.
La intensidad del dolor se evaluó utilizando una Escala Analógica Visual (VAS). Cada parturiente se autoinformaba de su nivel de dolor marcando una línea de 10 cm, tras lo cual personal de investigación entrenado medía y registraba la puntuación. Los evaluadores quedaron cegados ante la información del genotipo porque se realizó la genotipificación tras la recogida de todos los datos clínicos de resultados, incluidas las puntuaciones de la VAS. Las puntuaciones de dolor se registraron en cuatro momentos: antes del inicio de la analgesia (cuando la dilatación cervical alcanzó los 2 cm), 30 minutos después del inicio de la analgesia, 1 hora después del inicio de la analgesia y 30 minutos después del parto (correspondiente al momento de la suspensión de la analgesia). Para tener en cuenta las correlaciones dentro del sujeto derivadas de mediciones repetidas de EAV, se realizó un análisis de varianza de medidas repetidas bidireccionales (ANOVA) a lo largo de los cuatro puntos temporales de la evaluación. Las puntuaciones de la VAS oscilaron entre 0 y 10, con puntuaciones de 0 a 3 indicando dolor leve, 4 a 6 dolor moderado y 7–10 indicando dolorintenso 23.
El resultado principal de la analgesia se evaluó 30 minutos después del inicio de la analgesia. La intensidad del dolor se midió usando el VAS, donde 0 indicó ausencia de dolor y 10 indicó el peor dolor imaginable. Según una definición a priori, una puntuación VAS >3 se clasificó como un efecto analgésico pobre (variable dependiente binaria codificada como 1), mientras que una puntuación VAS ≤3 se clasificó como un efecto analgésico adecuado (codificada como 0). Esta definición se aplicó de forma consistente durante todo el análisis, y el modelo principal de regresión logística utilizó este resultado binario como variable dependiente.
Los resultados neonatales se evaluaron utilizando las puntuaciones de Apgar a 1 min y 5 min después del nacimiento. Las puntuaciones de 8–10 se consideraron normales, las puntuaciones de 5–7 indicaron asfixia leve y las puntuaciones de 0–4 indicaron asfixia grave24. Las evaluaciones Apgar se realizaron de acuerdo con el Programa de Reanimación Neonatal (7ª Edición) publicado conjuntamente por la Academia Americana de Pediatría y el Colegio Americano de Obstetras y Ginecólogos, así como con las directrices estandarizadas de evaluación establecidas por el Departamento de Neonatología del hospital. Todas las evaluaciones fueron realizadas por enfermeras neonatales o médicos residentes capacitados que no tenían ninguna consideración ante la asignación por grupo de estudio.
Se registró la incidencia de efectos adversos tras el inicio de la analgesia. Las reacciones adversas incluyeron depresión respiratoria, hipotensión, retención urinaria, dolor en el punto de punción, mareos, náuseas o vómitos y prurito. La depresión respiratoria se definió como una tasa respiratoria de <10 respiraciones/min o SpO₂ de <90%; hipotensión como presión arterial sistólica <90 mmHg o una disminución del >20% respecto a la línea inicial; retención urinaria como falta de micción espontánea dentro de las 6 horas posparto que requiere cateterismo; dolor en el lugar de la punción como dolor reportado por el paciente en el lugar de la punción con una puntuación de la Escala Numérica de Valoración (NRS) ≥4; náuseas y vómitos como presencia de náuseas o al menos un episodio de vómitos; y prurito como el que el paciente reportó picor cutáneo sin otra causa identificable. Los eventos adversos fueron monitorizados desde el inicio de la administración de analgesia epidural hasta el alta hospitalaria y fueron registrados prospectivamente por el equipo clínico responsable.
Recogida de muestras de sangre y genotipado
Durante los exámenes prenatales, se recogió sangre venosa periférica (2 mL) de cada mujer primíparas reclutada en ayunas (periodo mínimo de ayuno de 8 horas) y en un horario estandarizado de recogida entre las 08:00 y las 10:00 para obtener tubos anticoagulantes de ácido etilendediaminestraacético (EDTA) para la posterior extracción de ácido nucleico. Todas las muestras se almacenaron inmediatamente a −80°C hasta el análisis. El periodo de almacenamiento antes de la extracción de ADN oscilaba entre 1 y 6 meses. Para minimizar la degradación del ADN, se alicotaron muestras antes del almacenamiento y se minimizaron los ciclos de congelación-deshielo a lo largo del estudio. Las muestras congeladas se descongelaban lentamente sobre hielo antes de su procesamiento.
Se extrajo ADN de la sangre total utilizando un kit de purificación genómica de ADN. Antes de la genotipado, la concentración y pureza del ADN se evaluaron mediante espectrofotometría ultravioleta utilizando la relación A260/A280, y la integridad del ADN se evaluó mediante electroforesis en gel de agarosa. Solo se incluyeron muestras que cumplían criterios predefinidos de control de calidad en los análisis posteriores.
La genotipificación del polimorfismo rs928508 se realizó utilizando ensayos de genotipado de polimorfismo de nucleótido único (SNP) TaqMan (Cat. No. 4351379). Se usaron sondas marcadas con VIC para la detección del alelo A (5′-CAGGCCTGAGAGGCATGTGTGG-3′), y sondas marcadas con FAM para la detección del alelo G (5′-TAGCATCTTCCCAACACTTGCAATT-3′). El volumen total de reacción en cadena de la polimerasa (PCR) fue de 10 μL y consistió en 5,0 μL de 2× mezcla maestra de genotipado TaqMan, 0,25 μL de ensayo preformulado de genotipado TaqMan SNP (mezcla cebador-sonda), 10–20 ng de plantilla genómica de ADN y agua sin nucleasas hasta el volumen final de reacción.
La amplificación se realizó utilizando un instrumento de PCR cuantitativa según los procedimientos estándar de ensayo TaqMan. Las condiciones de ciclo térmico consistieron en un paso inicial de activación enzimática a 95°C durante 10 minutos, seguido de 40 ciclos de desnaturalización a 95°C durante 15 s y recocido/extensión a 60°C durante 60 s. Tras la amplificación, la adquisición de señales de fluorescencia y el análisis de discriminación alélica se realizaron automáticamente utilizando el software del instrumento para determinar los genotipos de muestras.
Todas las muestras se analizaron en duplicado. Para resultados discordantes, se realizó un tercer análisis independiente y se adoptó el resultado concordante. La tasa de llamadas SNP fue del ≥95%, y el 10% de las muestras seleccionadas al azar demostraron una concordancia del 100% en pruebas repetidas. Se incluyeron controles positivos, controles negativos y controles sin plantilla en cada placa de ensayo. La asignación de genotipos se realizó de forma ciega, y todo el personal de laboratorio implicado en la genotipificación permaneció ciego ante los datos de resultados clínicos durante todo el estudio.
Análisis estadístico
El equilibrio de Hardy–Weinberg (HWE) del alelo rs928508 fue evaluado en la población estudiada. La normalidad de las variables continuas se evaluó mediante la prueba de Shapiro–Wilk. Los datos normalmente distribuidos se presentaron como media ± desviación estándar (DS), mientras que los datos no normalmente distribuidos se reportaron como el rango mediano e intercuartílico (IQR).
Para comparaciones entre tres grupos, se aplicó el análisis unidireccional de la varianza (ANOVA) o ANOVA de medidas repetidas bidireccionales cuando se cumplieron las suposiciones de normalidad, seguido por la prueba de diferencias honestamente significativas (HSD) de Tukey para comparaciones múltiples post hoc. Cuando no se cumplían las suposiciones de normalidad, se utilizaba la prueba H de Kruskal–Wallis, seguida por la prueba post hoc de Dunn con corrección de Bonferroni. Las variables categóricas se resumieron como frecuencias y porcentajes y se analizaron mediante la prueba del chi cuadrado (χ2). Se evaluaron los recuentos celulares esperados antes del análisis y se utilizó la prueba exacta de Fisher cuando cualquier frecuencia celular esperada era <5.
Las mediciones repetidas de EVA recogidas en varios momentos se analizaron utilizando ANOVA de medidas repetidas bidireccionales para tener en cuenta las correlaciones dentro del sujeto. Se realizaron comparaciones post hoc utilizando pruebas ajustadas con Bonferroni para controlar las comparaciones múltiples.
Se realizó un análisis de regresión logística binaria para identificar factores asociados con malos resultados de analgesia del parto. La variable principal de resultado se definió como eficacia analgésica a los 30 minutos tras el inicio de la analgesia epidural. Las puntuaciones de VAS se dicotomizaron usando un umbral predefinido de 3, donde el VAS >3 se clasificó como un efecto analgésico pobre y el VAS de ≤3 como un efecto analgésico adecuado. Las variables se introdujeron en el modelo multivariable según la relevancia clínica. Se evaluó la multicolinealidad utilizando el factor de inflación de la varianza (VIF), y se examinaron las posibles interacciones entre variables. Los valores VIF para todas las variables incluidas en el modelo multivariable se proporcionan en la Tabla Suplementaria 1. La calibración del modelo se evaluó utilizando la prueba de ajuste de Hosmer–Lemeshow.
Se consideró estadísticamente significativo un valor P bilateral <0,05. Los análisis estadísticos se realizaron utilizando el software SPSS (Versión 23.0).