Este protocolo compara los láseres de diodo, tulio y erbio para la desinfección intracanal en un modelo de conducto radicular Enterococcus faecalis ex vivo, evaluando la eficacia antibacteriana y la temperatura en la superficie radicular externa, con el fin de identificar parámetros de irradiación seguros y eficaces.
Artículo de investigación
Tulio, Erbio y láseres de diodo para descontaminación intracanal: actividad anti-Enterococcus faecalis y seguridad térmica ex vivo
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11 de septiembre de 2026
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Resumen
Resumen
La irrigación asistida con láser ha surgido como un prometedor complemento para la desinfección del conducto radicular; sin embargo, la evidencia que compara directamente diferentes sistemas láser bajo condiciones experimentales estandarizadas sigue siendo limitada. Este estudio ex vivo comparó la eficacia antibacteriana y la seguridad térmica de un láser de diodo de 808 nm, un láser de tulio de 1940 nm y un láser de erbio de 2940 nm para la descontaminación intracanal frente a Enterococcus faecalis. Se trataron especímenes estandarizados de conductos radiculares humanos infectados utilizando parámetros de irradiación clínicamente relevantes. La eficacia antibacteriana se evaluó mediante el análisis de la reducción de unidades formadoras de colonias (UFC) y de las curvas de crecimiento bacteriano, mientras que la seguridad térmica se evaluó midiendo los cambios de temperatura en la superficie externa de la raíz durante la irradiación láser. Los tres sistemas láser mostraron una mayor actividad antibacteriana que los controles tratados con suero salino. El láser de erbio logró la tasa media de inhibición más alta (99,0 %) a 30 mJ durante 30 s, manteniendo al mismo tiempo el aumento de temperatura en la superficie externa de la raíz por debajo del umbral térmico de seguridad aceptado de 10 °C. El láser de tulio produjo una actividad antibacteriana comparable, pero superó el umbral de seguridad térmica en sus configuraciones más altas de irradiación. El láser de diodo mostró una eficacia antibacteriana menor y mayores aumentos de temperatura que los láseres de tulio y erbio bajo las condiciones evaluadas. Dentro de las limitaciones de este modelo ex vivo, el láser de erbio de 2940 nm demostró el equilibrio más favorable entre eficacia antibacteriana y seguridad térmica, representando un enfoque prometedor como tratamiento complementario para la desinfección intracanal.
Introducción
La causa principal de la pulpitis y la periodontitis apical es la infección bacteriana del sistema de conductos radiculares1. Según un estudio, Enterococcus faecalis ha sido identificado como el aislado bacteriano predominante en pacientes con infección crónica o recurrente tras el tratamiento endodóntico2,3. Esta bacteria posee numerosos factores de virulencia, incluida la formación de biopelículas; puede penetrar en los túbulos dentinarios hasta profundidades de hasta 800 µm y sobrevivir en condiciones con limitación de nutrientes2,3. Estas propiedades contribuyen a su resistencia frente a los desinfectantes intracanales estándar utilizados durante la terapia de conducto, así como frente a los mecanismos de defensa naturales del organismo. Por lo tanto, la incapacidad para eliminar completamente todo el E. faecalis remanente del sistema de conductos radiculares es una causa importante del fracaso del tratamiento endodóntico4.
El tratamiento actual del conducto radicular combina la desbridación mecánica mediante instrumentación con irrigación química para ayudar a eliminar microorganismos del sistema del conducto radicular5. Aunque la instrumentación mecánica es muy eficaz para reducir las poblaciones bacterianas, muchas áreas dentro de la anatomía compleja del conducto radicular permanecen inaccesibles solo con la instrumentación5. Por lo tanto, los irrigantes químicos desempeñan un papel importante en la desinfección del sistema del conducto radicular. Sin embargo, los estudios han demostrado que incluso los agentes químicos más potentes no logran eliminar por completo los biofilms bacterianos6. Además, algunos agentes químicos utilizados durante el tratamiento endodóntico pueden comprometer la integridad estructural de la dentina6,7. Para mejorar la eficacia de la desinfección y lograr una eliminación más completa de los biofilms bacterianos del sistema del conducto radicular, se han explorado varios métodos para activar los irrigantes químicos. Entre ellos, la irrigación activada por láser ha surgido como una de las alternativas más prometedoras8. También se han evaluado láseres de diodo, de tulio y de erbio por su potencial para producir efectos fototérmicos y fotomecánicos capaces de alterar las paredes celulares bacterianas y los biofilms9.
La interacción entre cada uno de estos tipos de láser y los tejidos con los que interactúan varía significativamente según la longitud de onda. Los láseres de diodo, que típicamente emiten luz en longitudes de onda comprendidas entre 808 y 980 nm, son absorbidos por cromóforos en los tejidos biológicos, lo que provoca una reacción fototérmica en la cual las proteínas se desnaturalizan y las bacterias se eliminan10. Los láseres de tulio operan a 1940 nm y presentan una alta absorción por el agua. Por lo tanto, se ha demostrado que los láseres de tulio son especialmente adecuados para entornos húmedos, incluidos los conductos radiculares llenos de solución irrigante11. Debido a su alta absorción del agua, los láseres de tulio pueden calentar y vaporizar rápidamente el líquido cuando se utilizan en conductos radiculares irrigados. La vaporización genera ondas de choque que podrían ayudar a interrumpir los biofilms bacterianos. Los láseres de erbio, particularmente aquellos que operan a 2940 nm, presentan el coeficiente de absorción más alto para el agua entre los láseres dentales12. En conductos irrigados, esta propiedad puede generar una vaporización explosiva y ondas de choque que desprenden mecánicamente y matan a las bacterias, mientras que potencialmente limitan la transferencia de calor al dentino circundante13.
Aunque el interés en la tecnología láser para la práctica endodóntica continúa aumentando, aún se desconoce mucho sobre los parámetros clínicos óptimos para diferentes sistemas láser. Los métodos actuales para uso clínico generalmente se basan en la experiencia empírica o en las pautas recomendadas por el fabricante, con un respaldo limitado por evidencia científica14. Además, la mayoría de los estudios realizados hasta la fecha han evaluado los efectos antimicrobianos de los láseres; sin embargo, un aspecto importante de la terapia láser ha recibido relativamente menos atención: el riesgo de lesión térmica en los tejidos periodontales. Se acepta generalmente que un aumento de más de 10 °C en la temperatura de la superficie externa de la raíz puede provocar daño permanente en el ligamento periodontal y en el hueso circundante15. Al parecer, no existe ninguna comparación directa publicada entre diferentes sistemas láser que evalúe sistemáticamente tanto su eficacia antimicrobiana como su seguridad térmica bajo condiciones experimentales controladas.
El objetivo principal de este estudio ex vivo fue investigar y comparar la eficacia antimicrobiana y la seguridad térmica de tres sistemas láser: un láser de diodo de 808 nm, un láser de tulio de 1940 nm y un láser de erbio de 2940 nm, para eliminar el biofilm de E. faecalis de las paredes del conducto radicular. Para identificar combinaciones de parámetros que logren una eliminación bacteriana efectiva manteniendo la seguridad térmica, este estudio evaluó parámetros de irradiación clínicamente relevantes. Se espera que estos hallazgos ayuden a los clínicos a seleccionar enfoques seguros y eficaces con asistencia láser para la desinfección endodóntica.
Protocolo
Este estudio se realizó de acuerdo con las normas éticas del Hospital Popular N.º 4 de Shanghái, Escuela de Medicina de la Universidad Tongji, y fue aprobado por el Comité de Revisión Institucional (Número de aprobación: 2026013-001). Los dientes humanos extraídos utilizados en este estudio se recolectaron de pacientes que se sometieron a extracciones dentales por razones ortodóncicas o periodontales. Se obtuvo el consentimiento informado por escrito de todos los participantes antes de la recolección de las muestras. No se realizó ninguna intervención clínica adicional con fines de este estudio. El estudio se llevó a cabo de acuerdo con los requisitos institucionales para el uso de dientes humanos extraídos.
Preparación y criterios de selección de las muestras
Se recibió un total de 141 dientes permanentes unirradiculares (incisivos mandibulares y premolares) recientemente extraídos del Departamento de Estomatología, afiliado al Hospital Cuarto del Pueblo de Shanghái de la Universidad Tongji. Todos los dientes fueron extraídos por razones ortodóncicas o periodontales. Se obtuvo el consentimiento informado de cada paciente. Se incluyeron en este estudio dientes con raíces de al menos diez milímetros, determinado mediante una sonda periodontal, dientes íntegros sin lesiones cariosas ni fisuras, formación radicular completa y curvatura radicular inferior a diez grados según el método de Schneider. Se excluyeron dientes con conductos múltiples, calcificación del conducto, reabsorción interna o tratamiento endodóntico previo. Tras la extracción, se eliminó todo el cálculo visible y los restos de tejido blando utilizando un instrumento de curetaje periodontal. Posteriormente, los dientes se almacenaron en solución salina al 0,9% a 4°C hasta su uso, para prevenir la deshidratación, y todos los experimentos se realizaron dentro de los tres meses siguientes a la extracción. Las muestras se asignaron a los grupos experimentales mediante una secuencia predefinida de asignación alternada. Concretamente, las muestras se asignaron secuencialmente a cada grupo de forma alternativa hasta alcanzar el tamaño muestral requerido para cada grupo. No se realizó ningún cálculo formal de potencia a priori. El tamaño muestral se seleccionó en función de estudios ex vivo comparables previos, el número de combinaciones de parámetros de irradiación evaluados y la disponibilidad de dientes extraídos elegibles.
Preparación y esterilización del conducto radicular
Se eliminó la corona de cada diente en la unión cemento-esmalte utilizando una sierra de diamante de baja velocidad con enfriamiento continuo por agua, para obtener un segmento radicular estandarizado de 10 mm. La longitud de trabajo se determinó a 1 mm del foramen apical utilizando una lima K tamaño 10. Los conductos radiculares se prepararon con el sistema rotatorio de níquel-titanio ProTaper Universal siguiendo las instrucciones del fabricante, en el orden S1, S2, F1, F2 y F3, hasta alcanzar un tamaño apical de preparación F3. Durante la instrumentación, los conductos se irrigaron con aproximadamente 2 mL de hipoclorito de sodio al 5,25% tras el uso de cada lima rotatoria, lo que resultó en un volumen total de irrigación de aproximadamente 10 mL por conducto. Se realizó una irrigación final con 5 mL de EDTA al 17% durante 1 minuto, seguido de 5 mL de solución salina estéril. El foramen apical se selló con un composite fluido para crear un sistema de conducto cerrado. Las raíces preparadas se esterilizaron mediante autoclave a 121°C durante 20 minutos, se almacenaron en solución salina tamponada con fosfato estéril (PBS) a 4°C y se inocularon con bacterias dentro de las 24 horas posteriores a la esterilización.
Cepa bacteriana y condiciones de cultivo
E. faecalis ATCC 29212 se utilizó para establecer el modelo de conducto radicular infectado. La cepa se cultivó en agar infusión cerebro corazón (BHI) a 37 °C durante 24 h en condiciones aeróbicas. Una colonia aislada se transfirió al caldo BHI e incubó a 37 °C durante 18–24 h. La suspensión bacteriana se ajustó a aproximadamente 1,5 × 108 UFC/mL, equivalente a un estándar de McFarland 0,5, utilizando un valor de densidad óptica a 600 nm (OD600) de 0,08–0,10.
Establecimiento de E. faecalis Modelo de conducto radicular infectado
Para establecer un modelo de biofilm en conducto radicular infectado, la superficie externa de cada raíz esterilizada se recubrió con dos capas de esmalte transparente para uñas con el fin de prevenir la penetración bacteriana a través del cemento. La región apical se recubrió después de haber sellado el foramen apical con un composite resinoso fluido, mientras que el orificio del conducto se dejó sin recubrir para permitir la inoculación bacteriana. Mediante una micropipeta estéril, 10 µL del E. faecalis la suspensión se transfirió a cada conducto radicular individual para llenar toda la longitud del conducto sin derramar. Las muestras inoculadas se colocaron individualmente en placas de cultivo estériles de 24 pocillos, agregando 1,5 mL de caldo BHI a cada pocillo. Las muestras se cultivaron a 37°C en condiciones aeróbicas durante 21 días. El medio de cultivo fue eliminado y reemplazado cada 2 días con caldo BHI estéril fresco para proporcionar nutrientes para el crecimiento bacteriano continuo y para eliminar los restos celulares acumulados. No se realizó ninguna inoculación adicional con E. faecalis durante el reemplazo del medio. Tras completar el período de incubación, todas las muestras viables fueron lavadas una vez con PBS para eliminar las bacterias planctónicas débilmente adheridas antes de las pruebas experimentales. Dos muestras seleccionadas al azar se utilizaron para visualizar la formación de biofilm maduro y la penetración bacteriana en los túbulos dentinarios mediante microscopía electrónica de barrido (SEM). Los especímenes fueron fijados en glutaraldehído al 2,5 % en 4°C durante 24 h, enjuagado tres veces con PBS, deshidratado mediante una serie gradual de etanol (30 %, 50 %, 70 %, 80 %, 90 % y 100 %), con cada paso de 10 min, luego dividido longitudinalmente, secado al aire, montado sobre platillos de aluminio, recubierto con oro por pulverización catódica y examinado mediante MEB.
Grupos experimentales y protocolos de irradiación con láser
Las 135 muestras de raíces infectadas se dividieron en tres grupos experimentales principales según el sistema de láser utilizado: el grupo del láser de diodo de 808 nm, el grupo del láser de tulio de 1940 nm y el grupo del láser de erbio de 2940 nm. Había 45 muestras en cada grupo de láser, que se subdividieron aún más según los parámetros de irradiación. El láser de diodo se operó con potencias medias de 1,0, 1,5 o 2,0 W, y cada ajuste de potencia se aplicó durante 10, 20 o 30 s, lo que dio lugar a nueve subgrupos con tres muestras por subgrupo. El láser de tulio se operó con potencias medias de 1,5, 2,5 o 3,5 W, y cada ajuste de potencia se aplicó durante 10, 20 o 30 s, resultando también en nueve subgrupos con tres muestras por subgrupo. El láser de erbio funcionó en modo de pulso supercorto con una frecuencia fija de 15 Hz. Se aplicaron energías de pulso de 10, 20 o 30 mJ durante 10, 20 o 30 s, generando nueve subgrupos con tres muestras por subgrupo. Tanto el láser de diodo de 808 nm como el láser de tulio de 1940 nm se operaron en modo de onda continua.
En total, se incluyeron seis muestras adicionales, asignándose tres muestras a cada grupo de control negativo y positivo. Al grupo de control negativo se le aplicó solución salina estéril, mientras que al grupo de control positivo se le aplicó hipoclorito de sodio al 5,25% (NaOCl) durante 30 s.
Para los grupos con láser, se siguió un protocolo de irradiación estandarizado. La fibra óptica se introdujo en el conducto radicular hasta la longitud de trabajo y se movió en un movimiento espiral lento y continuo desde la dirección apical hasta la coronal durante todo el período de irradiación. Se utilizaron fibras o puntas de entrega específicas para cada láser, en lugar de una única fibra intercambiable. El láser de diodo de 808 nm se aplicó mediante una fibra terminal de 200 µm, el láser de tulio de 1940 nm mediante una fibra terminal de 200 µm, y el láser de erbio de 2940 nm mediante una punta radial de 400 µm. La fibra o punta de entrega se retiró a una velocidad aproximada de 1 mm/s. Tras alcanzar el orificio del conducto, se volvió a la longitud de trabajo y se repitió el movimiento espiral de apical a coronal hasta completar la duración asignada de irradiación.
Para los láseres de tulio y erbio, los conductos se mantuvieron llenos de solución salina estéril durante la irradiación para simular la activación láser asistida por agua. Aproximadamente 10 µL de solución salina estéril se introdujeron en cada conducto para llenarlo hasta el nivel del orificio del conducto antes de la irradiación. La solución salina se repuso antes de cada ciclo de irradiación, cuando fue necesario, para mantener el conducto lleno de líquido durante todo el tratamiento. Para el grupo con láser de diodo, los conductos se secaron con puntas de papel estériles antes de la irradiación, ya que el láser de diodo a 808 nm tiene una absorción relativamente baja en el agua y se utilizó para producir un efecto antibacteriano fototérmico directo dentro del conducto. En contraste, los láseres de tulio a 1940 nm y de erbio a 2940 nm tienen una absorción en agua considerablemente mayor, por lo que se aplicaron en conductos llenos de solución salina para facilitar efectos fototérmicos y fotomecánicos mediados por el agua. El tratamiento con láser se repitió una vez al día durante tres días consecutivos.
Medición de la Temperatura de la Superficie Radicular Externa
Se midieron los cambios de temperatura en tiempo real sobre la superficie radicular externa durante el primer día de irradiación láser. Cada espécimen radicular se fijó verticalmente en un soporte para matraz en temperatura ambiente (22 °C ± 1 °C). Un termopar tipo K conectado a un termómetro digital se colocó en contacto firme con el tercio medio de la superficie radicular externa, perpendicular al eje longitudinal de la raíz. La sonda del termopar se posicionó mediante una abrazadera ajustable y se aseguró a la superficie radicular con cinta adhesiva resistente al calor para mantener un contacto firme y constante durante toda la medición. La sonda del termopar se calibró antes de cada sesión de medición utilizando agua hirviendo (100 °C) y una mezcla de hielo y agua (0 °C). Las lecturas de temperatura se registraron a intervalos de 50 ms durante todo el período de irradiación (10, 20 o 30 s). Para cada espécimen, se midieron tanto la temperatura basal como la temperatura máxima registrada durante o inmediatamente después de la irradiación láser. El aumento de temperatura desde la temperatura basal hasta la temperatura máxima se calculó como ΔT. Se consideró un ΔT superior a 10 °C como el umbral de posible daño a los tejidos periodontales.
Evaluación microbiológica: recuento de colonias y tasa de inhibición
Para determinar el efecto antibacteriano de los tratamientos con láser, se recolectaron muestras tras cada tratamiento con láser. El conducto se secó con puntas de papel estériles. Se utilizó una lima estéril nueva del tamaño 40 de Hedström para cada espécimen con el fin de obtener virutas de dentina de las paredes del conducto, evitando así la contaminación cruzada entre muestras. Cada viruta de dentina se transfirió a un tubo microcentrífugo separado que contenía 1 mL de PBS estéril. Los tubos se agitaron vigorosamente durante 30 s para liberar las bacterias de las virutas de dentina. Se prepararon diluciones seriadas de 10 veces, desde 10−1 hasta 10−6, transfiriendo 100 µL de la suspensión bacteriana a 900 µL de PBS estéril en cada paso de dilución. Se sembraron alícuotas (30 µL) de cada dilución en placas separadas de agar de infusión cerebral y cardíaca, las cuales se incubaron a 37°C durante 24 h. Se contaron las colonias y se registraron como unidades formadoras de colonias (CFU). Cada dilución se sembró por triplicado, y para el análisis se utilizó el recuento medio de colonias de las tres placas. Las placas se codificaron antes del recuento, y el investigador que realizó el recuento de colonias permaneció ciego respecto a las asignaciones de tratamiento.
Aquí, C es el recuento medio de UFC del grupo control negativo (solución salina) y T es el recuento medio de UFC del grupo experimental.
Análisis de la curva de crecimiento bacteriano
Se investigó el efecto de diversos tratamientos con láser sobre la cinética de crecimiento bacteriano mediante la elaboración de curvas de crecimiento. El día 3 después del tratamiento final con láser, los conductos se lavaron con 5 mL de solución salina estéril. El contenido de los conductos se recolectó utilizando puntas de papel estériles, que luego se transfirieron a un tubo de centrífuga que contenía 5 mL de caldo BHI. El tubo se agitó en vórtex para suspender las bacterias en el caldo. La suspensión bacteriana se ajustó a 1 × 106 UFC/mL. La concentración bacteriana se ajustó según mediciones de OD600 utilizando una curva de calibración previamente establecida para E. faecalis ATCC 29212 y posteriormente se verificó mediante recuento de colonias viables. Se añadió una alícuota de 200 µL de la suspensión a cada pocillo de una microplaca estéril de 96 pocillos. Además, se añadieron 20 µL de aceite mineral estéril a cada pocillo para minimizar la evaporación. La microplaca se colocó en un espectrofotómetro/incubadora mantenido a 37°C, y el valor de OD600 se midió cada hora durante 24 h. Antes de cada medición de OD600, la microplaca se sometió a agitación orbital a aproximadamente 300 rpm durante 10 s para asegurar una suspensión bacteriana homogénea. Cada muestra se analizó en cinco pocillos replicados.
Análisis estadístico
Todos los datos numéricos se presentan como media ± desviación estándar (DE). Los análisis estadísticos se realizaron utilizando SPSS versión 26.0. La distribución de los datos se evaluó mediante la prueba de Shapiro–Wilk. Se utilizó el análisis de varianza (ANOVA) para comparar más de dos grupos, seguido de la prueba de diferencia significativa honrada de Tukey (HSD) para comparaciones por pares. Las comparaciones entre dos grupos se realizaron mediante una prueba t para muestras independientes. La homogeneidad de la varianza se evaluó mediante la prueba de Levene antes de aplicar pruebas paramétricas. Cuando se violó el supuesto de homogeneidad de la varianza, se aplicó la corrección de Welch, según correspondiera. Se consideró estadísticamente significativo un valor de P < 0,05. Los gráficos se generaron utilizando GraphPad Prism versión 9.0.
Resultados
Actividad antibacteriana de diferentes tratamientos con láser contra E. faecalis
La efectividad antibacteriana de los tres sistemas de láser contra E. faecalis se evaluó mediante la determinación de los recuentos de UFC después de tres tratamientos consecutivos. Los resultados se muestran en la Figura 1 y en la Figura adicional 1. El grupo control negativo con solución salina estéril mostró un crecimiento bacteriano considerable, con un valor promedio de intensidad de colonias de 396618.7 ± 67787.5. El grupo control positivo con NaOCl al 5,25 % alcanzó una tasa media de inhibición general del 47,2 % ± 3,0 %, con valores individuales de inhibición del 46,8 %, 43,1 % y 51,7 %.
Figura 1: Eficacia antibacteriana de tratamientos con láser frente a Enterococcus faecalis. Tasas de inhibición bacteriana tras tres días consecutivos de tratamiento con sistemas láser de diodo de 808 nm, tulio de 1940 nm y erbio de 2940 nm, utilizando diferentes parámetros de irradiación. El hipoclorito de sodio (NaOCl) al 5,25 % se utilizó como control positivo, y la solución salina estéril como control negativo con 0 % de inhibición. Los datos se presentan como media ± desviación estándar (DE) a partir de n = 3 muestras independientes por grupo de tratamiento. Las barras de error representan la DE. * indica P < 0,05, ** indica P < 0,01 y *** indica P < 0,001. Haga clic aquí para ver una versión ampliada de esta figura.
Todos los grupos tratados con láser mostraron tasas de inhibición más altas que el grupo control positivo con NaOCl al 5,25 %. Se observó una mayor actividad antibacteriana con el aumento de la potencia del láser o de la energía del pulso y con tiempos de irradiación más largos. Por ejemplo, en el grupo con láser de diodo de 808 nm, la tasa media de inhibición aumentó de 53,1 % ± 6,5 % a 1,0 W durante 10 s a 80,2 % ± 2,6 % a 2,0 W durante 30 s. Se observó una diferencia estadísticamente significativa entre los grupos tratados con 1,0 W durante 30 s y 2,0 W durante 30 s (P < 0,01).
El láser de tulio de 1940 nm demostró una mayor actividad antibacteriana que el láser de diodo en la mayoría de las condiciones evaluadas. A 1,5 W durante 10 s, la tasa media de inhibición fue del 78,8% ± 1,9%. A 2,5 W durante 30 s, la tasa de inhibición aumentó al 91,6% ± 0,4%. La tasa de inhibición más alta dentro del grupo del láser de tulio se observó a 3,5 W durante 30 s, alcanzando el 97,4% ± 0,8%. Este valor fue significativamente mayor que el del grupo control positivo con NaOCl al 5,25% (P < 0,001) y que el del láser de diodo de 808 nm a 2,0 W durante 30 s (P < 0,001).
El láser de erbio de 2940 nm demostró la mayor actividad antibacteriana entre los tres sistemas láser. Con 10 mJ durante 10 s, la tasa media de inhibición alcanzó el 84,3% ± 1,5%. Con 20 mJ durante 30 s, la tasa de inhibición fue del 96,5% ± 2,0%. La tasa de inhibición más alta se observó con 30 mJ durante 30 s, alcanzando el 99,0% ± 0,6%. Este valor fue significativamente mayor que el del grupo control positivo con NaOCl al 5,25% (P < 0,001), el láser de tulio de 1940 nm a 2,5 W durante 30 s (P < 0,01) y todos los grupos tratados con el láser diodo de 808 nm (P < 0,001).
Los resultados demuestran que los tres sistemas láser exhibieron actividad antibacteriana contra E. faecalis, siendo los parámetros de irradiación más altos generalmente asociados con mayores tasas de inhibición. Entre las condiciones evaluadas, el láser de erbio a 2940 nm logró la mayor inhibición antibacteriana, seguido por el láser de tulio a 1940 nm y el láser diodo a 808 nm, lo que respalda la hipótesis del estudio de que la desinfección intracanal asistida con láser puede reducir eficazmente la carga bacteriana bajo las condiciones experimentales evaluadas.
Impacto de los tratamientos con láser en la cinética de crecimiento bacteriano
La reaparición bacteriana después del tratamiento se evaluó midiendo la DO600 durante 24 h. Los resultados se muestran en la Figura 2 y en la Figura suplementaria 2. El grupo control con solución salina estéril presentó un patrón típico de crecimiento bacteriano, compuesto por una fase de latencia de aproximadamente 4 h, seguida de un crecimiento exponencial rápido entre las 4 y las 12 h, y una fase estacionaria con valores máximos de DO600 que oscilaron entre 1,167 y 1,245.
Figura 2: Curvas de crecimiento de Enterococcus faecalis tras el tratamiento con láser. Cinética de crecimiento de Enterococcus faecalis recuperado de conductos radiculares tratados durante 24 h, medida como densidad óptica a 600 nm (OD600). Se muestran curvas de crecimiento representativas para el control de solución salina estéril, el control de hipoclorito de sodio al 5,25% (NaOCl) y los grupos seleccionados de tratamiento con láser diodo de 808 nm, láser de tulio a 1940 nm y láser de erbio a 2940 nm. Los datos se presentan como media ± desviación estándar (DE) de n = 3 muestras independientes, con cinco pocillos replicados técnicamente por muestra. Las barras de error representan la DE. * indica P < 0,05, ** indica P < 0,01 y *** indica P < 0,001. Haga clic aquí para ver una versión ampliada de esta figura.
Los grupos con láser de diodo de 808 nm mostraron supresión dependiente de los parámetros en el crecimiento bacteriano. A 1,0 W durante 10 s, la curva de crecimiento fue similar a la del grupo con NaOCl al 5,25%, con un crecimiento exponencial que comenzó aproximadamente a las 8 h. A 2,0 W durante 30 s, la fase de latencia se extendió hasta aproximadamente 10 h, y el valor de OD600 a las 14 h fue significativamente menor que el del grupo con NaOCl al 5,25% (0,559 ± 0,042 frente a 0,934 ± 0,042, P < 0,001).
Los grupos tratados con el láser de tulio de 1940 nm mostraron una mayor supresión del crecimiento bacteriano que los grupos tratados con el láser de diodo. A 1,5 W durante 10 s, el crecimiento exponencial comenzó aproximadamente a las 10 h. A 2,5 W durante 30 s, la fase de latencia se prolongó hasta aproximadamente 11 h, con valores de DO600 significativamente más bajos que los del control de solución salina estéril y que los del láser de diodo de 808 nm a 2,0 W durante 30 s en el punto temporal correspondiente (P < 0,001 para ambos). A 3,5 W durante 30 s, el crecimiento bacteriano permaneció marcadamente suprimido, con valores de DO600 que se mantuvieron en o por debajo de aproximadamente 0,15 a partir de las 12 h y esencialmente sin cambios a partir de entonces.
Los grupos tratados con el láser de erbio a 2940 nm produjeron la mayor supresión del rebrote bacteriano. Con 10 mJ durante 10 s, no se observó un aumento exponencial del crecimiento bacteriano hasta aproximadamente 10 h después del tratamiento. Aumentar aún más la energía del pulso retrasó el inicio del crecimiento exponencial. Con 30 mJ durante 30 s, el crecimiento exponencial se retrasó hasta aproximadamente 12 h, período durante el cual la DO600 media permaneció por debajo de 0,20. A las 12 h, el valor de DO600 del grupo tratado con el láser de erbio a 2940 nm con 30 mJ durante 30 s fue significativamente menor que el del grupo tratado con el láser diodo a 808 nm con 2,0 W durante 30 s (0,120 ± 0,001 frente a 0,274 ± 0,044, P < 0,001).
En general, los tres sistemas láser retrasaron el crecimiento bacteriano en comparación con los grupos de control, observándose una supresión progresivamente mayor a medida que aumentaron los parámetros de irradiación. Bajo las condiciones ensayadas, el láser de erbio a 2940 nm produjo la mayor inhibición del crecimiento bacteriano, seguido por el láser de tulio a 1940 nm y el láser diodo a 808 nm, lo que respalda la hipótesis del estudio.
Evaluación de la Seguridad Térmica de Diferentes Tratamientos con Láser en la Superficie Radicular Externa
Además de su actividad antibacteriana, se evaluó la seguridad térmica de los tres sistemas de láser midiendo el aumento de la temperatura en la superficie radicular externa (ΔT). Se consideró un incremento de temperatura superior a 10 °C como umbral de posible lesión en el tejido periodontal. Los resultados se muestran en Figura 3.
Figura 3: Cambios de temperatura en la superficie radicular externa durante la irradiación láser. Cambios en la temperatura de la superficie radicular externa (ΔT) tras la irradiación con sistemas láser de diodo de 808 nm, tulio de 1940 nm y erbio de 2940 nm, utilizando diferentes parámetros de irradiación. La línea horizontal punteada indica el umbral de 10 °C comúnmente asociado con posibles lesiones del tejido periodontal. Los datos se presentan como media ± desviación estándar (DE) a partir de n = 3 muestras independientes. Las barras de error representan la DE. * indica P < 0,05, ** indica P < 0,01 y *** indica P < 0,001. Haga clic aquí para ver una versión ampliada de esta figura.
El láser de diodo de 808 nm produjo el mayor aumento en la temperatura de la superficie externa de la raíz. A 1,0 W durante 10 s, el aumento medio de temperatura (ΔT) fue de 6,0 °C ± 0,7 °C. Al aumentar el tiempo de irradiación a 30 s manteniendo la misma potencia, el ΔT medio aumentó a 10,4 °C ± 0,9 °C. A 2,0 W durante 30 s, el ΔT medio aumentó aún más hasta 14,8 °C ± 3,8 °C, superando el umbral de seguridad de 10 °C en todas las muestras.
El láser de tulio de 1940 nm produjo aumentos moderados de temperatura. A 1,5 W durante 10 s, el ΔT medio fue de 2,5°C ± 0,7°C. Al aumentar la potencia a 2,5 W y el tiempo de irradiación a 30 s, el ΔT medio aumentó a 8,8°C ± 0,9°C, con una muestra que alcanzó los 10,2°C. A 3,5 W durante 30 s, el ΔT medio aumentó a 12,7°C ± 1,9°C, y todas las muestras superaron el umbral de seguridad de 10°C. El aumento de temperatura a 3,5 W durante 30 s fue significativamente mayor que a 2,5 W durante 30 s (P < 0,01).
El láser de erbio de 2940 nm produjo el menor aumento de temperatura en la superficie externa de la raíz en todos los parámetros evaluados. Con 10 mJ durante 10 s, el ΔT medio fue de 0,8 °C ± 0,1 °C. En la configuración máxima evaluada de 30 mJ durante 30 s, el ΔT medio fue de 3,6 °C ± 1,0 °C, con temperaturas medidas entre 2,1 °C y 5,0 °C. Todos los aumentos de temperatura registrados permanecieron por debajo del umbral de seguridad de 10 °C. El aumento de temperatura observado con el láser de tulio de 1940 nm a 3,5 W durante 30 s fue significativamente mayor que el observado con el láser de erbio de 2940 nm a 30 mJ durante 30 s (P < 0,01).
En general, el láser de erbio de 2940 nm demostró los aumentos más bajos de temperatura en la superficie radicular externa bajo todas las condiciones evaluadas, mientras que el láser diodo de 808 nm y los ajustes de mayor potencia del láser de tulio de 1940 nm produjeron mayores elevaciones de temperatura, con algunas condiciones que superaron el umbral de seguridad predefinido.
Disponibilidad de datos:
Todos los datos brutos que respaldan los hallazgos de este estudio se proporcionan como archivos complementarios. Las imágenes representativas de unidades formadoras de colonias (UFC) y las curvas completas de crecimiento bacteriano están disponibles en las Figuras Suplementarias 1 y 2, respectivamente. Las mediciones individuales de temperatura en la superficie radicular externa por espécimen se proporcionan en la Tabla Suplementaria 1, y los datos brutos de actividad antibacteriana, incluidos los valores grises del área de las colonias y las tasas de inhibición calculadas para todos los grupos de tratamiento, se proporcionan en la Tabla Suplementaria 2. Estos archivos complementarios contienen los datos primarios que sustentan los resultados presentados en el manuscrito principal.
Archivos suplementarios
Figura suplementaria 1. Placas representativas de unidades formadoras de colonias (UFC) tras el tratamiento con láser de Enterococcus faecalis. Placas de agar de infusión cerebral y corazón (BHI) representativas que muestran las unidades formadoras de colonias (UFC) recuperadas de muestras de conducto radicular después de tres tratamientos consecutivos. Las muestras se diluyeron en serie (10−3) antes de la siembra y se incubaron durante 24 h. Se muestran imágenes representativas para los grupos de control negativo con solución salina estéril, control positivo con hipoclorito de sodio al 5,25 % (NaOCl), láser de diodo de 808 nm (2,0 W, 30 s), láser de tulio de 1940 nm (3,5 W, 30 s) y láser de erbio de 2940 nm (30 mJ, 30 s). Haga clic aquí para descargar este archivo.
Figura suplementaria 2. Curvas completas de crecimiento durante 24 h de Enterococcus faecalis tras el tratamiento con láser. Cinética de crecimiento de Enterococcus faecalis recuperado de conductos radiculares tratados durante 24 h, medida como densidad óptica a 600 nm (OD600). Las suspensiones bacterianas se ajustaron a 1 × 106 unidades formadoras de colonias (UFC)/mL y se incubaron en caldo de infusión cerebral cardíaca (BHI) a 37°C. Se muestran las curvas de crecimiento para el control negativo de solución salina estéril, el control positivo de hipoclorito de sodio al 5,25% (NaOCl), y todos los grupos experimentales de tratamiento con láser: láser diodo de 808 nm (1,0, 1,5 y 2,0 W durante 10, 20 y 30 s), láser de tulio de 1940 nm (1,5, 2,5 y 3,5 W durante 10, 20 y 30 s), y láser de erbio de 2940 nm (10, 20 y 30 mJ a 15 Hz durante 10, 20 y 30 s). Haga clic aquí para descargar este archivo.
Tabla suplementaria 1. Mediciones de la temperatura en la superficie externa de la raíz durante la irradiación láser.
Se informan las temperaturas en la superficie externa de la raíz antes y después de la irradiación para cada espécimen tratado con el láser de diodo de 808 nm, el láser de tulio de 1940 nm o el láser de erbio de 2940 nm, bajo las condiciones indicadas de potencia o energía de pulso y tiempo de irradiación. La diferencia de temperatura se calculó como ΔT = temperatura después de la irradiación − temperatura antes de la irradiación. Se evaluaron tres especímenes independientes para cada combinación de parámetros. Haga clic aquí para descargar este archivo.
Tabla suplementaria 2. Datos brutos del análisis de unidades formadoras de colonias (UFC) para la actividad antibacteriana tras el tratamiento con láser.
Se muestran los valores de escala de grises del área de las colonias y las tasas de inhibición calculadas para cada espécimen tras el tratamiento con el láser de diodo de 808 nm, el de tulio de 1940 nm o el de erbio de 2940 nm, bajo los parámetros de irradiación indicados. La solución salina y el hipoclorito de sodio al 5,25 % (NaOCl) sirvieron como grupos control negativo y positivo, respectivamente. La tasa de inhibición se calculó en relación con el grupo control de solución salina. Se analizaron tres espécimenes independientes para cada condición de tratamiento. Haga clic aquí para descargar este archivo.
Discusión
El presente estudio ex vivo comparó la eficacia antibacteriana y la seguridad térmica de los láseres de diodo de 808 nm, de tulio de 1940 nm y de erbio de 2940 nm para eliminar E. faecalis biofilms de conductos radiculares infectados. Los tres sistemas láser mostraron una mayor inhibición bacteriana que el NaOCl al 5,25 %; sin embargo, su eficacia antibacteriana y sus perfiles térmicos diferían sustancialmente. El láser de erbio a 2940 nm logró el equilibrio general más favorable, combinando la mayor actividad antibacteriana con el menor aumento de la temperatura en la superficie externa de la raíz. El láser de tulio a 1940 nm también demostró una fuerte eficacia antibacteriana, aunque sus parámetros más altos de irradiación superaron el 10°C umbral de seguridad térmica. El láser de diodo de 808 nm mostró una actividad antibacteriana comparativamente menor y una seguridad térmica menos favorable. Estos hallazgos indican que la longitud de onda del láser y los parámetros de irradiación son factores importantes para equilibrar la desinfección intracanal con la seguridad del tejido periodontal16. Sin embargo, las comparaciones directas entre los diferentes sistemas láser deben interpretarse con cautela, ya que cada longitud de onda tiene indicaciones clínicas distintas, sistemas de administración y mecanismos de acción. El presente estudio comparó la eficacia antibacteriana bajo condiciones estandarizadas ex vivo condiciones, pero la aplicación óptima de cada láser puede depender del escenario clínico específico, los objetivos del tratamiento y el instrumental disponible.
Los diferentes resultados entre los tres sistemas láser pueden explicarse en gran medida por sus interacciones dependientes de la longitud de onda con el agua, la dentina y los biofilms bacterianos. El láser de diodo de 808 nm es débilmente absorbido por el agua y actúa principalmente mediante efectos fototérmicos directos. Los láseres de diodo pueden eliminar bacterias mediante la desnaturalización de proteínas inducida por calor y la alteración de las membranas bacterianas17. Sin embargo, su eficacia depende de qué tan estrechamente la fibra láser contacte o se aproxime a las bacterias objetivo, lo cual es difícil en la anatomía compleja del sistema de conductos radiculares. Esto podría explicar por qué el láser de diodo produjo solo un grado moderado de inhibición bacteriana, incluso a 2,0 W durante 30 s. El análisis de la curva de crecimiento mostró que algunas bacterias sobrevivieron tras el tratamiento con láser de diodo y conservaron la capacidad de volver a crecer, lo que sugiere que el biofilm existente no fue completamente erradicado18. El láser de tulio de 1940 nm tiene una mayor absorción por el agua que el láser de diodo y puede producir efectos tanto fototérmicos como fotomecánicos en conductos llenos de líquido19. Esta mayor absorción del agua podría explicar su efecto antibacteriano más fuerte; sin embargo, también provoca aumentos de temperatura más elevados a potencias más altas. Por ejemplo, la irradiación a 3,5 W durante 30 s produjo una actividad antibacteriana notable, pero superó el umbral recomendado de 10 °C para evitar daños en los tejidos periodontales11,20. Por lo tanto, parece existir un equilibrio entre lograr una desinfección suficiente de los conductos radiculares infectados y evitar aumentos excesivos de temperatura que podrían dañar los tejidos circundantes. Estos sistemas láser no deben considerarse directamente intercambiables, ya que sus longitudes de onda tienen cromóforos primarios y mecanismos de transferencia de energía diferentes. El láser de diodo produce principalmente efectos fototérmicos directos, mientras que los láseres de tulio y erbio interactúan más intensamente con el agua intracanal y generan efectos adicionales mediados por fluidos. Por consiguiente, las diferencias observadas podrían reflejar tanto los parámetros de irradiación como los mecanismos de acción distintos de los tres sistemas láser.
El láser de erbio de 2940 nm demostró el perfil general más favorable, principalmente debido a su fuerte absorción por el agua21Cuando se activa en un conducto irrigado, la energía láser es rápidamente absorbida por una capa delgada de agua, produciendo cavitación, ondas de choque y movimiento del fluido capaces de interrumpir mecánicamente los biopelículas, al tiempo que limitan la transferencia de calor hacia la superficie externa de la raíz.21,22. Este mecanismo podría explicar por qué el láser de erbio logró la tasa de inhibición más alta, al tiempo que mantuvo todos los aumentos de temperatura relacionados con la irradiación por debajo del umbral de seguridad predefinido. Por lo tanto, bajo las condiciones experimentales evaluadas en este estudio ex vivo, el láser de erbio demostró el equilibrio más favorable entre eficacia antibacteriana y seguridad térmica entre los sistemas láser evaluados. Sin embargo, estos hallazgos están limitados a los sistemas ex vivo condiciones y no establecen la superioridad clínica del láser de erbio. Más adelante in vivo y se requieren estudios clínicos antes de que estos hallazgos puedan traducirse en recomendaciones de tratamiento clínico. También es notable la menor tasa de inhibición observada con NaOCl al 5,25 %. El NaOCl ha sido utilizado durante mucho tiempo como irrigante estándar para la eliminación bacteriana durante el tratamiento endodóntico; sin embargo, su efecto antibacteriano puede estar limitado en biofilms maduros y en los túbulos dentinarios profundos debido a la penetración restringida, la neutralización química y la naturaleza protectora de la matriz del biofilm.23,24. Estos hallazgos sugieren que los efectos físicos producidos por los láseres, incluyendo la cavitación, las ondas de choque y la corriente acústica, podrían mejorar la eliminación bacteriana más allá del riego con hipoclorito de sodio únicamente8,25Por lo tanto, los hallazgos de este estudio respaldan el uso de la irrigación asistida con láser como un método complementario para la desinfección del conducto radicular, y no como un sustituto de los protocolos convencionales de irrigación. Se incluyeron la solución salina y el NaOCl como controles químicos negativo y convencional, respectivamente, ya que el objetivo principal de este estudio fue comparar los tres sistemas láser en condiciones experimentales estandarizadas. El estudio no fue diseñado para comparar la irradiación láser con protocolos contemporáneos de irrigación activada por sonicación, ultrasonido u otros métodos. En consecuencia, la ausencia de estos grupos comparadores limita la relevancia clínica de los hallazgos y debería abordarse en estudios futuros.
La seguridad térmica sigue siendo una consideración importante para la aplicación clínica. La irradiación con láser de diodo durante 30 s superó o se acercó al umbral de 10 °C bajo varios parámetros de irradiación, lo que sugiere un riesgo potencial de daño en los tejidos periodontales26. Los láseres de tulio demostraron efectos antibacterianos mayores que los láseres de diodo; sin embargo, su margen de seguridad se redujo a potencias más altas, especialmente a 3,5 W durante 30 s. En contraste, el láser de erbio a 2940 nm mantuvo aumentos de temperatura por debajo de 5 °C incluso en su configuración más alta evaluada. Estos hallazgos sugieren que es necesario seleccionar cuidadosamente los parámetros cuando se utilizan láseres de diodo o de tulio, mientras que el láser de erbio mostró un margen de seguridad térmica más amplio bajo las condiciones evaluadas en este estudio.
Este estudio tiene varias limitaciones. En primer lugar, se utilizó un modelo ex vivo, que no puede reproducir completamente el entorno biológico de una infección clínica. En particular, la ausencia de perfusión sanguínea y el enfriamiento fisiológico del tejido pueden afectar la disipación del calor y los cambios de temperatura en la superficie radicular externa. Además, la falta de respuestas inmunitarias del huésped implica que los hallazgos antibacterianos reflejan únicamente los efectos directos de la irradiación láser y no consideran la eliminación bacteriana mediada por el sistema inmunitario. En segundo lugar, solo se examinó una especie bacteriana, E. faecalis, mientras que la mayoría de los conductos radiculares infectados contienen biopelículas polimicrobianas27. Un modelo de una sola especie no puede reproducir las interacciones entre especies, la estructura heterogénea de la biopelícula o la susceptibilidad antimicrobiana variable característica de las infecciones polimicrobianas clínicas. Por lo tanto, la eficacia antibacteriana observada frente a E. faecalis no debe generalizarse a toda la comunidad microbiana presente en los conductos radiculares infectados. En tercer lugar, todos los experimentos se realizaron en condiciones estáticas de laboratorio, mientras que los dientes in vivo están influenciados por los tejidos circundantes y la perfusión sanguínea, lo cual puede afectar la disipación del calor28. Por último, solo se evaluaron ciertas longitudes de onda y combinaciones de parámetros de irradiación. Las longitudes de onda ensayadas se seleccionaron para representar sistemas láser con diferentes características de absorción del agua y mecanismos de acción antibacteriana, mientras que los parámetros de irradiación se eligieron para representar niveles de potencia o energía y duraciones de exposición clínicamente viables. No obstante, el número limitado de combinaciones de parámetros restringe la generalización de los hallazgos, y en estudios futuros deberían evaluarse configuraciones adicionales. Aunque E. faecalis se utiliza frecuentemente como organismo representativo en la investigación endodóntica debido a su persistencia y resistencia a los desafíos antimicrobianos, no debe considerarse el único indicador de infección endodóntica o fracaso del tratamiento. Las infecciones clínicas son típicamente polimicrobianas, y se necesitan estudios futuros que utilicen modelos de biopelículas multiespecíficas para reflejar mejor la complejidad de la microbiota del conducto radicular.
En resumen, cada sistema láser mostró una mayor actividad antibacteriana frente a E. faecalis que el NaOCl al 5,25 % por sí solo. Bajo las condiciones experimentales evaluadas en este estudio ex vivo, el láser de erbio a 2940 nm demostró el equilibrio más favorable entre eficacia antibacteriana y seguridad térmica. El láser de tulio a 1940 nm también mostró una fuerte actividad antibacteriana; sin embargo, ajustes de mayor potencia incrementaron el riesgo de daño térmico en los tejidos. El láser de diodo a 808 nm mostró una eficacia antibacteriana menor y una seguridad térmica menos favorable que los láseres de tulio y erbio. Estos hallazgos respaldan la investigación adicional de la desinfección asistida por láser de erbio a 2940 nm como un enfoque prometedor complementario para el tratamiento endodóntico29.
Divulgaciones
Declaración de intereses en conflicto:
Los autores declaran que no tienen intereses en conflicto relacionados con este estudio. No existen conflictos de intereses financieros ni no financieros, incluyendo empleo, consultorías, propiedad de acciones, honorarios o testimonios expertos remunerados.
Agradecimientos
Este estudio fue respaldado por el Programa de Investigación Médica de la Comisión de Salud del Distrito Hongkou.
Materiales
| Nombre | Empresa | Número de catálogo | Comentarios |
|---|---|---|---|
| Solución salina al 0,9% | Beyotime | ST341-500ml | Almacenamiento, irrigación y control negativo de dientes |
| Tubo microcentrífugo de 1,5 mL | Axygen | MCT-150-C | Recolección de muestras y dilución seriada |
| Placa de cultivo de 24 pocillos | Corning | 3524 | Incubación de biopelícula |
| Microplaca de 96 pocillos | Corning | 3599 | Ensayo de curva de crecimiento bacteriano |
| Autoclave | Tuttnauer | 2540E | Esterilización de raíces preparadas |
| Agar de infusión cerebro corazón (BHI) | BD Biosciences | 211065 | Cultivo bacteriano y enumeración de UFC |
| Caldo de infusión cerebro corazón (BHI) | BD Biosciences | 237500 | Cultivo bacteriano y análisis de curva de crecimiento |
| Esmalte transparente para uñas | Beyotime | C0187 | Hermetización de la superficie externa de la raíz |
| Serra de diamante (baja velocidad) | Buehler | IsoMet Low Speed Saw | Seccionamiento de la corona |
| Termómetro digital (compatible con termopar tipo K) | OMEGA Engineering | HH802U | Medición de la temperatura de la superficie externa de la raíz |
| Enterococcus faecalis ATCC 29212 | American Type Culture Collection (ATCC) | ATCC 29212 | Cepa bacteriana |
| Ácido etilendiaminotetraacético (EDTA), 17% | Sigma-Aldrich | E9884 | Enjuague final del conducto |
| Compuesto resinoso fluido | 3M ESPE | 6031A2 | Hermetización del foramen apical |
| GraphPad Prism | GraphPad Software | Version 9.0 • RRID: SCR_002798 | Generación de gráficos |
| Archivo Hedström, tamaño 40 | Dentsply Maillefer | 80603010042 | Recolección de virutas de dentina |
| Archivo K, tamaño 10 | Dentsply Maillefer | 800-0210 | Determinación de la longitud de trabajo |
| Sistema láser de fibra dopada con tulio a 1940 nm | Menovex Medical Technology (Shenzhen) Co., Ltd. (Arpadent) | TN20 | Irradiación láser |
| Sistema láser Er:YAG a 2940 nm | PointNix Co., Ltd. | Modular-beam | Irradiación láser |
| Sistema láser de diodo a 808 nm | elexxion AG | Claros Nano | Irradiación láser |
| Micropipeta | Eppendorf | 3123000063 | Inoculación de muestras |
| Aceite mineral (estéril) | Sigma-Aldrich | M5904 | Prevención de la evaporación durante el ensayo de curva de crecimiento bacteriano |
| Sistema de archivo rotatorio de níquel-titanio (preparación F3) | Dentsply Sirona | ProTaper Gold | Preparación del conducto radicular |
| Fibra óptica para láser de fibra dopada con tulio a 1940 nm | Menovex Medical Technology (Shenzhen) Co., Ltd. (Arpadent) | 400 µm de diámetro | Irradiación láser |
| Fibra óptica para láser Er:YAG a 2940 nm | PointNix Co., Ltd. | 600 µm de diámetro | Irradiación láser |
| Fibra óptica para láser de diodo a 808 nm | elexxion AG | elexxion longlife 200, 200 µm (Art. No. 10063) | Irradiación láser |
| Explorador periodontal | Hu-Friedy | PCPUNC156 | Medición de la longitud de la raíz |
| Ultrasonido periodontal | Hu-Friedy | SJ34-35 | Eliminación de cálculo y tejido blando |
| Solución salina tamponada con fosfato (PBS) | Gibco / Thermo Fisher Scientific | 10010023 | Lavado y dilución bacteriana |
| Puntas de pipeta (10 µL, 200 µL, 1000 µL) | Axygen | T-300 / T-200-Y / T-1000-B | Manejo de líquidos |
| Soporte universal | Biosharp | BS-IT-01 | Fijación del espécimen de raíz |
| Microscopio electrónico de barrido (SEM) | Hitachi High-Technologies | TM4000Plus | Imagenología de biopelícula |
| Incubadora agitadora | Thermo Fisher Scientific | MaxQ 4000 | Incubación de cultivo en caldo |
| Hipoclorito de sodio (NaOCl), 5,25% | Sigma-Aldrich | 425044 | Irrigación del conducto y control positivo |
| Espetofotómetro/incubadora (lector de microplacas) | BioTek / Agilent Technologies | Epoch 2 | Mediciones de densidad óptica a 600 nm (OD600) |
| SPSS | IBM | Version 26.0 • RRID: SCR_002865 | Análisis estadístico |
| Puntas de papel estériles | Dentsply Maillefer | Absorbent Paper Points, ISO 20, cono 0,02, 28 mm | Secado del conducto y muestreo bacteriano |
| Sonda de termopar (tipo K) | OMEGA Engineering | 88000 | Medición de temperatura |
| Mezclador de vórtice | Scientific Industries | Vortex-Genie 2 | Mezcla de suspensiones bacterianas |
Referencias
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