El modelo de encefalopatía isquémica hipóxica de la isquemia perinatal

Resumen

El modelo de rata postnatal para la lesión cerebral hipóxico-isquémica es un modelo bien establecido de los derechos humanos neonatal encefalopatía hipóxica isquémica (EHI). En este artículo se describe el modelo de HIE en crías de ratas post-natal.

Resumen

Encefalopatía hipóxico-isquémica (EHI) es la consecuencia de asfixia sistémica que ocurre desde el nacimiento. Veinticinco por ciento de los recién nacidos con EHI desarrollan secuelas neuropsicológicas graves y permanentes, como retraso mental, parálisis cerebral y epilepsia. Los resultados de HIE son devastadores y permanentes, por lo que es fundamental para identificar y desarrollar estrategias terapéuticas para reducir el daño cerebral en los recién nacidos con EHI. A tal fin, el modelo de rata neonatal para la lesión cerebral hipóxico-isquémica se ha desarrollado el modelo de esta condición humana. El modelo de HIE fue validado por primera vez por Vannucci et al ^1, y desde entonces ha sido ampliamente utilizada para identificar los mecanismos de lesión cerebral como consecuencia de la hipoxia-isquemia perinatal ² y para probar posibles intervenciones terapéuticas ^3,4. El modelo de HIE es un proceso de dos etapas y consiste en la ligadura de la arteria carótida común izquierda seguido por la exposición a un ambiente hipóxico. El flujo sanguíneo cerebral (FSC) en el hemisferio ipsilateral a la arteria carótida liga no disminuye por el flujo sanguíneo colateral a través del polígono de Willis, pero con la tensión de oxígeno baja, la CBF en el hemisferio ipsilateral y disminuye significativamente los resultados en la lesión isquémica unilateral . El uso de 2,3,5-trifenil tetrazolio cloruro (TTC) para teñir e identificar el tejido cerebral isquémico se desarrolló originalmente para los modelos adultos de la isquemia cerebral de roedores ^5, y se utiliza para evaluar el grado de infarctin cerebral a los puntos de tiempo de hasta 72 horas después del evento isquémico ^6. En este video, se demuestra el modelo de lesión hipóxico-isquémica en cerebro de rata postnatal y la evaluación del tamaño del infarto mediante la tinción de TTC.

Protocolo

Este protocolo fue aprobado por el Cuidado de Animales institucional y el empleo en la Universidad de Stanford y se rige por los Institutos Nacionales de Salud directrices para el uso de animales de experimentación.

Rata neonatal modelo HIE

1. Días después del parto (PND) 7 Sprague-Dawley, crías de ratas (Charles River Laboratories, Inc., Wilmington, MA) son completamente anestesiados con isoflurano (Aerrane, Baxter, Deerfield, IL, un 3-4% para la inducción y 2.1% para de mantenimiento).
2. Una pequeña incisión en el cuello (Extra Thin Tijeras Iris # 14088-10, Artes Ciencia Herramientas Inc, Foster City, CA) para exponer la arteria carótida com....

Discusión

El modelo de roedores postnatal HIE es un modelo establecido que la hipoxia cerebral recapitula que ocurren en el periodo perinatal en los recién nacidos. Amplia estudios de caracterización histológica y inmunocitoquímicos han demostrado que los roedores 7 días de edad tiene la madurez cerebral similar a un modelo de ^siete en el tercer trimestre el feto humano. El modelo de HIE roedores ha sido muy informativo para entender los mecanismos de la lesión cerebral de la hipoxia perinatal ^2, donde las intervenciones, como l.......

Materiales

Lista de materiales utilizados en este artículo

Nombre	Empresa	Número de catálogo	Comentarios
Crias de rata Sprague-Dawley	Animal	Charles River Laboratories
Isoflurano	Cirugía	Baxter Internationl Inc.
Gas de 8% oxígeno / 92% nitrógeno	Cirugía	Airgas
Cloruro de 2,3,5-trifenil tetrazolio	Reactivo	Sigma-Aldrich	T8877
Solución salina tamponada con fosfato (PBS) pH 7,4	Reactivo	GIBCO, por Life Technologies
Paraformaldehído	Reactivo	Sigma-Aldrich	P6148