El agua de mar de muestreo y recolección

Hola, soy Elena Kova del laboratorio de Stephen Hallam en el Departamento de Microbiología e Inmunología de la Universidad de Columbia Británica. Hoy te mostraremos un procedimiento para recolectar agua de mar para análisis físicos, químicos y biológicos. Utilizamos este procedimiento en nuestro laboratorio para estudiar los parámetros oceánicos de las aguas marinas.

Así que comencemos. En primer lugar, se asigna el número de lances y las profundidades de cada lance, luego se determinan las profundidades que se van a muestrear y el volumen total que se va a recoger para el lance actual. Asegúrese de que los dispositivos de muestreo de agua go flow y kin estén en la posición abierta y que todas las válvulas y grifos estén cerrados.

Fije el CTD a la base de la línea y bájelo en el agua para obtener la profundidad más profunda en el perfil. Coloque un dispositivo de muestreo en la línea inmediatamente después del CTD. Asegúrese de que la línea esté correctamente ajustada en el soporte del dispositivo y que los tornillos estén apretados.

Coloque un mensajero ponderado en cada dispositivo, excepto en la profundidad de muestreo más profunda, antes de bajarlo al agua. Baje la línea y la distancia entre la primera profundidad especificada y la siguiente, luego coloque otro dispositivo de muestreo. Tenga en cuenta que para intervalos de profundidad en los que se recogen muestras de agua de gran volumen, se cargan un total de dos botellas de 12 litros consecutivamente a una distancia aproximada de 0,75 metros.

Después de que todos los dispositivos estén en la línea, baje la línea a la profundidad más profunda y deje que pasen dos minutos. Envíe un mensajero hacia abajo, disparando cada dispositivo a la posición cercana. Deje pasar unos minutos antes de recuperar la línea.

Para asegurarse de que todos los dispositivos estén cerrados, enrolle la línea y descargue cada dispositivo en la cubierta a medida que emerge del agua. Para profundidades que requieren grandes volúmenes de muestra para la purificación de proteínas de ADN o ARN, emplee dos dispositivos de muestreo en tándem. Recoja el ARN inmediatamente de una botella y fíltrelo en el barco.

Después de tomar muestras de productos químicos y nutrientes en la otra botella, drene el agua restante en el automóvil para obtener un volumen final de 20 litros. Para muestras de bajo volumen, reserve un litro de agua para la filtración en frascos estériles de Nalgene. Por lo general, las muestras de bajo volumen de 16 intervalos de profundidad se recolectan como muestras de 16 x un litro y seis muestras de x 20 litros se recolectan como muestras de alto volumen.

Al recolectar muestras de gas, siempre tome muestras de oxígeno y gases traza. Primero, conecte un trozo delgado de tubo al grifo del dispositivo de muestreo de agua. Coloque el otro extremo del tubo en los frascos de suero de glas.

Enjuague el frasco de suero tres veces, pero tome muestras de agua y llénelo hasta rebosar de modo que no queden burbujas de aire. Agregue 50 microlitros de cloruro de mercurio a la botella de suero. Tenga cuidado de no introducir burbujas de aire en la muestra.

Selle el frasco de suero con un tapón de goma, engarce C con una tapa de aluminio y luego guárdelo en hielo para recolectar muestras para mediciones de nutrientes, incluidos nitrato, fosfato y silicato. Primero enjuague una jeringa de 60 cc con agua de muestra. A continuación, coloque un filtro de disco acrobático de 0,2 micrómetros en línea.

Empuje aproximadamente dos ml de agua a través de la jeringa. Para purgar el filtro. Enjuague tres veces una botella de polietileno con aproximadamente 10 ml de agua filtrada.

Agite la botella cuando enjuague, luego agregue agua de muestra filtrada a las botellas aproximadamente tres cuartas partes de su capacidad. Guarde la muestra en hielo. Tubos de recolección vacíos de agua distal para recolectar muestras para mediciones de amoníaco.

Primero enjuague los tubos de recolección, pero tome muestras de agua por completo. Llene un cilindro graduado de 10 ml con un tubo de agua de muestra a cinco ml de agua de muestra fuera del cilindro graduado y vacíe el resto del cilindro. A continuación, vuelva a añadir los cinco ml al cilindro vacío.

Una vez que se han recogido muestras de todas las profundidades a 7,5 ml de reactivo de trabajo de amonio en cada tubo. Para recolectar muestras para recuentos de células, llene un tubo Falcon preetiquetado de 50 ML que contenga 5.4 ml, 37% de altura de formalidad hasta la marca de 50 ml para una concentración final de 4%Tenga cuidado de no desbordar el tubo. Guarde la muestra en hielo para recolectar muestras.

Para mediciones de sulfuro de hidrógeno. Llene un tubo Falcon preetiquetado de 50 ML que contenga tres ml de acetato de zinc al 20% hasta la parte superior. Tenga cuidado de no desbordar el tubo.

Guarde la muestra en hielo para recoger pequeños volúmenes. Para la concentración de biomasa. Llene botellas de Nalgene de un litro hasta el tope para recoger grandes volúmenes de concentración de biomasa.

Llene garrafas de 20 litros hasta la parte superior. El resultado final del muestreo de agua de mar es de aproximadamente 32 a 48. Muestras de gas, 32 muestras de amonio.

16 muestras de sulfuro de hidrógeno. 16 muestras para recuentos de células. Seis de 20 litros, 16 botellas de un litro y cuatro sterex.

Punto dos: dos filtros micrométricos que contienen biomasa microbiana se conservan para más adelante. Aislamiento de ARN. Acabamos de demostrar cómo recolectar diferentes tipos de muestras de agua para análisis bioquímicos.

Esto requiere una gran cantidad de preparación y planificación. Por lo tanto, presupueste dos días antes del viaje para poner las cosas en orden y un día después para la limpieza, no permita que el agua salada entre en contacto con una bomba peralt o en la caja de aluminio zago utilizada para transportar el equipo de campo. Trate el equipo con respeto y servirá bien durante mucho tiempo.

Así que eso es todo. Gracias por mirar y buena suerte con tus experimentos.