Name: El estudio de la agresión en Drosophila (mosca de la fruta) (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2007-02-25T00:00:00.000+00:00
Duration: 11 min 6 s
Description: Aprende a estudiar la agresión en Drosophila mediante peleas controladas en cámaras específicas. Este método permite observar comportamientos agresivos y analizar los mecanismos neuronales subyacentes en neurobiología.

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1. Montaje de la paredes de la cámara <ol><li> Tome dos láminas de vidrio plano, marca la mitad en los dos extremos y con una regla recta filo como una guía, la puntuación de la copa con el cortador de diamantes. </li><li> Deslice el cortador de diamantes de ida y vuelta varias veces hasta que escuche un chirrido. </li><li> Lavar el vaso, y sujetándolo con dos toallas de papel en un recipiente de vidrio roto, se aplican cerca de una leve presión sobre la línea marcada con el lado marcado de espaldas a usted a romper la diapositiva en dos mitades. </li><li> Generosamente aplicar el adhesivo de vidrio a lo largo de un borde de un pedazo de vidrio y empujar una segunda pieza de vidrio contra el adhesivo en ángulo recto a la primera pieza. Coloque sobre una superficie plana (papel de aluminio, papel encerado o de papel normal) y permita que se asiente durante por lo menos una hora. </li><li> Después de una hora, repetir la aplicación de la etapa de adhesivo para formar una cámara cuadrada y deje que endurezca durante la noche. <img src="/files/ftp_upload/old/155_2008_9_3_3/155_figure-01.png" alt="Figura 1" width="358" height="266" /> </li></ol> 2. La colocación de las paredes de una placa de Petri <ol><li> Tome la parte superior de una placa de Petri y relleno a una profundidad de al menos 5 mm con una solución caliente de agarosa al 2% (de microondas de la agarosa en agua destilada hasta que se disuelva completamente). </li><li> Espere unos minutos, pero al mismo tiempo disuelto, el lugar de las paredes de la cámara en el centro del plato. Tome la parte inferior de la placa de Petri, lugar que parte de abajo hacia arriba. Usando una aguja calentada al fuego directo de disección, hacer una serie de pequeños agujeros (&gt; 1 mm) en el centro del plato para la ventilación. Hacer un agujero más grande (~ 4 mm de diámetro) ligeramente hacia un lado para la introducción de moscas de la cámara. Coloque un pedazo de cinta de etiquetas removibles sobre el agujero más grande. <img src="/files/ftp_upload/old/155_2008_9_3_4/155_figure-02.png" alt="Figura 2" width="447" height="207" /> <img src="/files/ftp_upload/old/155_2008_9_3_5/155_figure-03.png" alt="Figura 3" width="328" height="211" /> </li></ol> 3. Hacer la copa de alimentos <ol><li> Calentar un frasco de comida volar hasta el punto donde se funde la comida. Use una pipeta Pasteur para la transferencia de alimentos a un cierre vial de centelleo de relleno para formar una superficie plana en la parte superior. Tenga cuidado para evitar burbujas de aire y deje que se enfríe. </li><li> Preparar la pasta de levadura fresca de molienda de una pequeña cantidad de levadura seca y unas gotas de agua en un mortero. Agregar más levadura o el agua hasta que la consistencia es lo suficientemente gruesa como para permitir una caída visible pequeños para ser recogido por un palillo de dientes y se aplica al centro de la superficie del alimento. </li><li> Coloque el vial de alimentos en el centro de la cámara y coloque la parte inferior de la placa de Petri, en posición invertida para que los lados son y no entorpecer la visión, en la parte superior de la cámara. Introducir dos 3-5 moscas de un día por la aspiración a la cámara a través del agujero más grande en la parte superior. Cubrir el agujero con cinta adhesiva y coloque un trozo de papel de filtro negro con un corte de 2 cm agujero en el plato superior. </li><li> Coloque una lámpara de escritorio encima de la cámara, lo suficientemente lejos para que no se calienta en la cámara, y de modo que se ilumina la superficie del alimento. Todo el conjunto ideal debe ser colocado en un ambiente con alta humedad y una temperatura de 22-25 º C. <img src="/files/ftp_upload/old/155_2008_9_3_6/155_figure-04.png" alt="Figura 4" width="284" height="212" /> </li></ol> 4. Comience grabando a través de la pared frontal de la cámara cuando los dos moscas en el foodsurface.

el estudio de la agresión en drosophila (mosca de la fruta)

Studying Aggression in Drosophila (fruit flies)

La agresión es una conducta innata que se desarrolló en el marco de la defensa o la obtención de recursos. Este comportamiento social complejo está influenciada por factores genéticos, hormonales y ambientales. En muchos organismos, la agresión es fundamental para la supervivencia, pero la agresión el control y represión en diferentes contextos también se ha convertido cada vez más importante. En los últimos años, los invertebrados se han convertido en cada vez más útiles como sistemas modelo para investigar la base biológica genética y los sistemas de comportamiento social complejo. Esto se debe en parte al repertorio diverso de comportamientos exhibidos por estos organismos. En el video que lo acompaña, se describe un método para el análisis de la agresión en Drosophila, cuyo diseño incluye importantes eco-etológicas limitaciones. Los detalles incluyen medidas para: hacer una cámara de combate, aislamiento y pintura de las moscas, las moscas de la adición a la cámara de lucha y combate la filmación en vídeo. Este enfoque está siendo utilizado para identificar genes candidatos importantes en la agresión y en la elaboración de los circuitos neuronales que subyace a la salida de la agresión y otras conductas sociales.

El estudio de la agresión en Drosophila (mosca de la fruta)

La agresión es un comportamiento innato que evolucionó en el marco de la defensa u obtención de recursos. Este complejo comportamiento social está influenciado por...

Me llamo Sarah Ertel y soy investigadora posdoctoral en el laboratorio de Ed Kravitz en el Departamento de Neurobiología de la Escuela de Medicina de Harvard. Me llamo Sibu. Soy estudiante de medicina de Alemania y estoy realizando una rotación de investigación aquí en el Laboratorio Kravitz.Y queremos mostrarles cómo organizamos peleas y estudiamos la agresión en moscas de la fruta. Lo primero que hacemos es preparar viales de aislamiento, lo cual consiste en calentar en el microondas alimento para moscas y agregar 1,5 mililitros a un tubo de cultivo cuando el alimento se ha solidificado. Luego lo tapamos con algodón.El primer paso consiste en obtener moscas socialmente ingenuas, moscas que no han visto ninguna otra mosca. Para ello, tomamos pupas de estadio tardío de los tipos de moscas que nos interesan, y extraemos cuidadosamente las pupas del vial con pinzas.Tome el vial de aislamiento preparado, retire el algodón y coloque suavemente la pupa dentro, tápelo nuevamente y etiquete el vial. Estas pupas se devuelven al incubador controlado por clima con ciclo día-noche. Al día siguiente, verificamos si han encerrado y anotamos la fecha en que las moscas han cerrado.Luego los envejecemos durante tres a cinco días, y durante ese tiempo aplicamos pintura en la parte posterior del abdomen de las moscas para poder identificarlas. Ahora estamos fabricando cámaras para las peleas reales. Para hacerlo, utilizamos dos portaobjetos comunes, medimos el centro y hacemos marcas con una punta cortadora de diamante, rayando la superficie, y luego buscamos un borde para que el portaobjetos se rompa fácilmente por la mitad. Bien.Luego pegamos los bordes de las laminillas con pegamento adhesivo. Después, unimos las dos mitades para formar una caja. Podemos limpiarla con etanol al 70% y luego con un poco de agua para eliminar los residuos de nuestros dedos.Llene la parte inferior de la cámara con agar al 1% y coloque la cámara dentro. Eso proporciona humedad para las moscas. Luego, queremos darle a las moscas algo sobre lo que luchar.Y así, aunque el tamaño real de la cámara pueda considerarse un territorio, les proporcionamos alimento. Y colocamos ese alimento en un vial de centelleo. Esto proporciona un nivel adicional de territorialidad posible que una mosca podría querer defender.Ahora tomaré la comida recién calentada en el microondas y la colocaré en los vasos de comida, que en realidad son tapas de centelleo, y que servirán como la arena de combate en la que las moscas lucharán más adelante. Es importante que quede ligeramente convexa para poder ver toda la superficie. También se debe evitar la formación de burbujas de aire, ya que constituirían un obstáculo para las moscas cuando caminen sobre el vaso de comida, con el fin de atraer a las moscas hacia el vaso de comida.También agregaremos una gota de pasta de levadura en el centro del vaso de alimento. Y primero debemos preparar la pasta de levadura. Así que tomamos simplemente pasta de levadura viva, la colocamos en un vaso de alimento, luego añadimos una gota de agua y mezclamos hasta obtener una pasta.Una vez que los vasos de alimento se hayan enfriado, coloque la pasta de levadura o solo una pequeña gota de ella en el centro del vaso de alimento. Así que ahora estamos en la sala de comportamiento, una de nuestras dos salas de comportamiento. Y esta sala está completamente oscura si encendemos todas las luces, y tiene control de humedad y temperatura.Así mantenemos la temperatura a 25 grados y tratamos de mantener la humedad por encima del 40 % para controlar las moscas en tantas condiciones como nos sea posible. Y ahora voy a preparar las peleas. Trajimos aquí los vasos de alimento que preparamos anteriormente, y voy a insertarlos en esas cámaras.Trate de colocarlos en el centro de la cámara. Vuelva a colocar la tapa. Muy bien. Y voy a usar este aspirador para aspirar las moscas, exactamente un par de moscas.Así que voy a tomar dos moscas, aspirarlas aquí y luego introducirlas en la cámara. Eso es lo que voy a hacer. Ahora, sostendré el vial así porque se sabe que las moscas van contra la gravedad y hacia la luz, por lo que tienden a moverse hacia arriba.Por lo tanto, es más fácil para mí atraparlas cuando retiro el algodón. Como puede ver, ahora tengo ambas moscas en el frasco. También debo asegurarme de que, dado que estas son moscas pintadas, tome una que esté pintada y otra que no lo esté.O si usamos dos colores, uno que se pinta de un color y otro del otro color, pero que tienen el mismo genotipo. Ahora los inserto en la cámara para ello. Retiro la bola de cera.Hay un pequeño orificio por el cual introduciré las moscas, y trato de colocar la tapa de manera que las moscas no puedan escapar cuando golpeo. Caerán un poco y luego solo soplo suavemente, de forma que no tenga que soplar con fuerza para meterlas, ya que eso las molestaría. Les toma entre tres y digamos 40 minutos hasta que se tranquilizan y han observado el entorno en la cámara.Luego comenzarán a ocupar el recipiente de alimento y la pelea iniciará. Ahora tomaré toda la cámara y las colocaré frente a la cámara; debo ajustar la altura para filmar el recipiente de alimento con un ligero ángulo, de modo que podamos verlo completamente. Y todo el recipiente de alimento quedará enfocado.Y la habitación en la que se realizan estos ensayos de agresión es importante. Es una habitación aislada, mantenida libre de tráfico y ruido. Se mantiene a 25 grados y tratamos de mantener la humedad entre 45 y 55 % para mantener a las moscas contentas y saludables en esa situación.Además, atenuamos las luces del techo para que la luz en el recipiente de alimento también sea un atractivo para las moscas. Utilizar a DFA como sistema modelo y este tipo de montaje nos permite observar no solo la intensidad de la agresión, sino también los patrones específicos de agresión que observamos. Los comportamientos específicos en los que estamos muy interesados nos ayudan a comprender cómo está conectado el cerebro durante el desarrollo y, luego, cómo se manifiesta esto en un adulto que no ha aprendido estos comportamientos.Así que salen inmediatamente cuando ven que comienzan a interactuar con las otras moscas. Saben cómo embestir, saben cómo ser agresivas. Y por eso queremos saber cómo estos comportamientos están conectados en el sistema nervioso de las moscas y cómo luego son controlados.

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Research

Investigación

JoVE Journal

Biology

Biología

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Drosophila Ensayo de agresión: un método para probar la plasticidad del comportamiento en moscas

En este artículo de vídeo, se describe un ensayo automatizado para medir el efecto del hambre o la saciedad en el comportamiento de búsqueda de comida dependiente olfativo en la mosca adulta fruta Drosophila melanogaster.

Un ensayo de una sola mosca por el comportamiento de forrajeo en Drosophila

Aquí, presentamos un protocolo para cuantificar la evitación de individuos estresados. Este paradigma es potente y fácil de usar y puede utilizarse para evaluar la influencia de los genes y el medio ambiente en un tipo de interacción social en Drosophila melanogaster.

Ensayo sencillo para cuantificación de Prevención Social en Drosophila melanogaster

Durante mosca de la fruta peleas, los patrones de comportamiento observados, lucha dinámica, y el aprendizaje y la memoria asociada están influenciadas por las condiciones experimentales. El protocolo que se presenta aquí describe un procedimiento novedoso que elimina por completo la manipulación de las moscas durante los experimentos. Esto mejora la dinámica de lucha y permite la formación de efectos fuertes "perdedor".

Un nuevo enfoque que elimina el manejo para el estudio de la agresión y el efecto &quot;Loser&quot; en<em&gt; Drosophila melanogaster</em

Se describe un protocolo para inducir gratificante y nonrewarding experiencias en moscas de la fruta (Drosophila melanogaster), utilizando el consumo voluntario de etanol como una medida de los cambios en los estados de recompensa.

Una manera sencilla de medir alteraciones en el comportamiento de búsqueda de recompensa Uso<em&gt; Drosophila melanogaster</em

En este artículo se describe un ensayo de comportamiento que utiliza la unidad de apareamiento masculino en Drosophila melanogaste R a estudiar la motivación. Usando este método, los investigadores pueden utilizar técnicas de neurogenéticas mosca avanzada para descubrir los mecanismos genéticos, moleculares y celulares que subyacen a esta motivación.

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Drosophila condicionamiento del corte como una medida de aprendizaje y memoria

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Aprende a estudiar la agresión en Drosophila mediante peleas controladas en cámaras específicas. Este método permite observar comportamientos agresivos y analizar los mecanismos neuronales subyacentes en neurobiología.

El estudio de la agresión en Drosophila (mosca de la fruta)

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