Name: Inducción quirúrgica de edema endolinfático por la obliteración del conducto endolinfático (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2010-01-22T16:52:00.000+00:00
Duration: 11 min 49 s
Description: Aprende la técnica quirúrgica para obstruir el conducto endolinfático en cobayas y modelar el hidrops endolinfático. Este método permite estudiar la patología del oído relacionada con la enfermedad de Ménière.

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Este trabajo fue apoyado en parte por una beca de la Sociedad Americana otológico a CAM y por una beca de la Universidad de casos del Centro Médico de los Hospitales de KNA y CAM. Nos gustaría agradecer a Jeff Churney en Focus Medical Group, Inc. (Hinckley, OH) para que nos proporciona una cámara de microscopio. Servicios de producción de video cortesía de Fusión Creativa Marketing, Inc. (Valdosta, GA) Damos las gracias a Jonathan Frankel y Alex Levitt en CWRU por sus comentarios durante la preparación del vídeo.

Parte 1: Anestesia y preparación para la cirugía <ol><li> Un adulto, mujer Duncan-Hartley conejillo de Indias de Charles River Internacional Laboratories, Inc. (Wilmington, MA) es anestesiados con ketamina 60 mg / kg y xilacina 12 mg / kg por vía intramuscular. </li><li> Lubricantes derivados del petróleo se aplica a los ojos para proteger al animal de lesión en la córnea debido a la desecación. </li><li> El animal se afeita desde la parte superior de la cabeza a los hombros y entre las orejas. </li><li> El área afeitada es preparado de una manera aséptica primero con el 7,5% de povidona yodada seguido de 70% de alcohol etílico. </li><li> El animal se coloca sobre una mesa de operaciones con manta térmica y en una plataforma que eleva la cabeza y flexiona el cuello. La cabeza del animal se dirige fuera de su cirujano. Flexión adecuada del cuello se requiere a fin de exponer adecuadamente la cresta occipital. </li><li> El animal se cubre de una manera aséptica. </li></ol> 2 Parte: La incisión y la exposición del occipucio ósea <ol><li> Epinefrina más bupivacaína (bupivacaína) 0,25% se aplica a lo largo del sitio de la incisión posibles (incisión media piel dorsal a lo largo de la protuberancia occipital). Esto provoca vasoconstricción local, lo que limita el sangrado, y proporciona duradera analgesia postoperatoria después de que el animal se despierta. </li><li> Incisión de la línea media dorsal está hecha de piel en el cuero cabelludo a lo largo del occipucio. <img src="/files/ftp_upload/1728/1728fig1.jpg" alt="Figura 1" data-altupdatedat="1787634011000" data-alt="Figura 1"> Figura 1: La piel está formada incisión a lo largo de la línea media dorsal, como se muestra arriba. </li><li> Para obtener una adecuada exposición, la piel se retrae lateralmente mediante la colocación de una pinza hemostática curva pequeñas a cada lado de la incisión. </li><li> Una incisión horizontal a lo largo del músculo del cuello para exponer el occipucio ósea. En esta etapa, el animal puede contracción a pesar de la anestesia adecuada debido a la transección del nervio occipital mayor. Sección transversal de la médula espinal es un peligro con la incisión horizontal en la región suboccipital. Esta complicación se puede evitar asegurándose de que el hueso subyacente siempre se siente debajo de la hoja de bisturí. </li><li> Con la musculatura suboccipital incisión hasta el hueso, una pinza hemostática tercero se utiliza para retraer el borde del músculo superior. Esta pinza de hemostasia se mantiene en su lugar por el ayudante de cirugía. </li><li> Un elevador de periostio Lempert se utiliza para exponer la sutura temporo-occipital. </li></ol> Parte 3: Perforación de la sutura temporo-occipital <ol><li> Tras la exposición de la sutura temporo-occipital (Figura 2), un taladro otológico con 1,5 mm fresa de diamante se utiliza para perforar inferio-lateralmente a la sutura. </li><li> Debajo de la tabla externa del cráneo, la textura esponjosa del diploe (El hueso esponjoso entre las tablas que intervienen en el cráneo) se hará visible. Una vez que el diploe se ha perforado de distancia, la tabla interna del cráneo aparece, junto con un color azul pálido que es el seno sigmoideo. </li><li> Los márgenes del seno sigmoideo se definen sin penetrar en el buque. </li><li> Una vez que el hueso que cubre el seno sigmoideo ha sido lo suficientemente diluida, un aumento mayor y se utiliza una selección directa se utiliza para quitar con cuidado el hueso que cubre el seno sigmoideo. </li></ol><img src="/files/ftp_upload/1728/1728fig2.jpg" alt="Figura 2" data-altupdatedat="1787634011000" data-alt="Figura 2"> Figura 2 El área a ser perforados en parte se superpone a la sutura temporo-occipital. Parte 4: La obstrucción del conducto <ol><li> El seno sigmoideo esqueleto se retrae medialmente para revelar el opérculo. </li><li> Un diamante de 0,5 mm de fresa se utiliza para perforar por dentro de la opérculo y en el saco endolinfático y el conducto. </li><li> El conducto endolinfático es después cubierta con cera de hueso con un pico recto. </li><li> El defecto del cráneo se refuerza entonces con Gelfoam (Pfizer, Nueva York, NY). </li><li> 4-0 Polysorb (United States Surgical, Norwalk, CT) de sutura se utiliza para poner los músculos en conjunto. Hay entonces una transición sin problemas a una técnica de sutura subcutánea para el cierre de la incisión de la piel. Con este cierre no hay necesidad de retirar las suturas después y no hay riesgo de que el animal garra en el lugar y sacar una sutura. </li></ol> Parte 5: cuidado post-operatorio El cuy es colocado en una incubadora para mantener la temperatura corporal y se revisa a intervalos de 30 minutos hasta que despierta y capaz de mantener una posición esternal. El animal es inspeccionado por la respiración y el color de la carrocería. Este centro utiliza la enrofloxacina (0,2 ml a 22,7 mg / ml, vía subcutánea) y la buprenorfina (0,05 ml a 0.3mg/mL, por vía subcutánea) para la profilaxis de la infección post-operatoria y el control del dolor, respectivamente. Analgésico se administra una vez en el día de la cirugía y dos veces en el post-operatorio día uno y dos. Aunque los antibióticos no son necesarios para Su asépticargery, uno de cinco días, dos veces al día un curso de antibióticos profilácticos pueden ser givenonce en el post-operatorio de tres días. Complicaciones y Gestión <ol><li> La depresión respiratoria, el cirujano debe estar siempre al tanto de respiración del animal s. Si la respiración se hace más lento o se detiene, suspender la cirugía y una inspección visual para el movimiento torácico. Si el animal está experimentando dificultad respiratoria o dificultad para respirar, compruebe que la boca y las vías respiratorias no están ocluidas. </li><li> La penetración del seno sigmoideo Gelfoam uso y compresión a lo largo de la punta de succión hasta que el sangrado se detiene. </li><li> Penetración dural cubrir el defecto con Gelfoam. </li><li> Daño vestibular No perforar más de 1 mm lateral al seno sigmoideo. Si lo hace, los riesgos de dañar el conducto semicircular posterior, lo que invalida todos los datos para el conejillo de indias. </li></ol>

<ol><li>Andrews, J. C., Bohmer, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+surgical+approach+to+the+endolymphatic+sac+and+the+cochlear+aqueduct+in+the+guinea+pig%5BTitle%5D)+AND+%22Am+J+Otolaryngol%22%5BJournal%5D)">The surgical approach to the endolymphatic sac and the cochlear aqueduct in the guinea pig.</a> Am J Otolaryngol. 10, 61-66 (1989).</li>
<li>Kimura, R., Schuknecht, H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Membranous+hydrops+in+the+inner+ear+of+the+guinea+pig+after+obliteration+of+the+endolymphatic+sac%5BTitle%5D)+AND+%22Pract+Otolaryngol%22%5BJournal%5D)">Membranous hydrops in the inner ear of the guinea pig after obliteration of the endolymphatic sac.</a> Pract Otolaryngol. , (1965).</li>
</ol>

Los experimentos con animales se realizaron de acuerdo con las directrices y normas establecidas por el Cuidado de Animales institucional y el empleo de la Case Western Reserve University.

En las semanas siguientes a la obstrucción quirúrgica del conducto endolinfático, el tema animal experimenta pérdida de audición neurosensorial fluctuante, medida por la respuesta de tronco cerebral evocados auditivos. Una muestra de la respuesta auditiva del tronco cerebral (ABR) la grabación se muestra en la Figura 3. La oreja izquierda sirve como un control no operado. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/1728/1728fig4.jpg"><img border="0" src="/files/ftp_upload/1728/1728fig3tmb.jpg" alt="FIgure 3" dat...

inducción quirúrgica de edema endolinfático por la obliteración del conducto endolinfático

Surgical Induction of Endolymphatic Hydrops by Obliteration of the Endolymphatic Duct

Inducción quirúrgica del edema endolinfático (ELH) en el conejillo de indias por la obliteración y la obstrucción del conducto endolinfático es un modelo animal ampliamente aceptado de la enfermedad y una importante correlación entre la enfermedad humana de Meniere. En 1965, Robert Kimura y Schuknecht Harold describió por primera vez un enfoque intradural para la obstrucción del conducto endolinfático (Kimura 1965). Aunque eficaz, esta técnica, que requiere la penetración de la cubierta protectora del cerebro, incurrió en un nivel no deseado de la morbilidad y la mortalidad en las materias de origen animal. En consecuencia, Andrews y Bohmer desarrollado un enfoque extradural, que previsiblemente produce menos de las complicaciones asociadas con el sistema nervioso central (SNC) la penetración. (Andrews y Bohmer 1989) El enfoque extradural se describe aquí primero requiere una incisión en la región del occipucio para exponer la capa muscular subyacente. Nosotros operamos sólo en el lado derecho. Después de la retracción adecuada del tejido que recubre, una incisión horizontal en la musculatura del occipital derecho a exponer el derecho temporo-occipital línea de sutura. El hueso inmediatamente inferio-lateral de la línea de sutura (Fig. 1) es perforado con un taladro otológico hasta el seno sigmoideo se hace visible. Retracción medial del seno sigmoideo revela el opérculo del conducto endolinfático, que alberga el saco endolinfático. Perforación por dentro de la opérculo en el área del saco endolinfático revela el conducto endolinfático, que luego se llena con cera de hueso para producir la obstrucción y ELH en última instancia. En las semanas siguientes, el animal demostrará la pérdida progresiva, auditiva fluctuante y evidencia histológica de la ELH.

Este video muestra la forma de obstruir el conducto quirúrgicamente el conejillo de indias de endolinfático para producir edema endolinfático.

Inducción quirúrgica de edema endolinfático por la obliteración del conducto endolinfático

La inducción quirúrgica del hidrops endolinfático (ELH) en el cobayo mediante la obliteración y obstrucción del conducto endolinfático es un modelo animal ampliamente aceptado...

Hola, mi nombre es Chris Edden. Soy investigador en la Universidad Case Western Reserve en el Departamento de Otorrinolaringología y Cirugía de Cabeza y Cuello. Hoy describiré el bloqueo quirúrgico del conducto endolinfático en el conejillo de indias, el cual produce hidropesía endolinfática y se utiliza para modelar muchas alteraciones y patologías otológicas relacionadas con enfermedades.La hídrosis linfática es una hinchazón del compartimento endolinfático del oído interno y es un marcador histológico clave de la enfermedad de Menière. Aquí se observa una imagen en sección transversal de un oído interno normal con dos compartimentos perilinfáticos, la escala vestibular y la escala timpánica, y una escala media no dilatada, que se continúa con el conducto endolinfático, la estructura sobre la que intervenimos. Dentro de las semanas posteriores al procedimiento quirúrgico, la escala media se dilata como se indica aquí, y la membrana de Reissner se distiende. Los animales también presentan una pérdida auditiva fluctuante progresiva en el oído intervenido.Al igual que en muchas enfermedades del oído, la inducción quirúrgica de hidropesía en el hámster de Guinea ha sido el modelo animal estándar para la enfermedad de Ménière humana desde que fuera descrito por primera vez en 1965 por Robert Kor y Harold Schneck. Aunque inicialmente el procedimiento se realizaba mediante un enfoque intradural más invasivo, nuestro centro prefiere un enfoque extradural porque provoca menor morbilidad y mortalidad en el animal. A continuación se describe los materiales, el cuidado del animal y el abordaje quirúrgico necesarios para llevar a cabo de forma exitosa y humanitaria este procedimiento bastante complejo.Primero, describiré los materiales quirúrgicos necesarios. El animal es una cobaya hembra adulta, raza Duncan Hartley, albinos, procedente de Charles River International Laboratories Incorporated. Para la preparación del cuarto y el montaje estéril, necesitará ropa quirúrgica estéril, un microscopio operatorio con funda estéril y luz Mars, un campo quirúrgico pequeño con ventana, una almohadilla térmica intraoperatoria y un aparato de succión.Un aspirador número cinco, aspiración, una solución salina estéril para aspiración número 40, un recipiente de acero inoxidable y un sujetador de cabeza. Para la anestesia, necesitará ketamina 60 miligramos por kilogramo y xilazina 12 miligramos por kilogramo preoperatoriamente. Necesitará un lubricante oftálmico a base de vaselina, una afeitadora eléctrica, Betadine y alcohol etílico al 70 %. Durante la intervención quirúrgica, necesitará 0,6 mililitros de marcación al 0,25 %, un bisturí de seguridad desechable número 11, tres pinzas hemostáticas curvas, un elevador perióstico de Lieber, hisopos quirúrgicos Wexel, un taladro otológico, una fresa diamantada de 1,5 milímetros y una fresa diamantada de 0,5 milímetros.Una cureta ósea recta, una jeringa de 10 cc, cera ósea, espuma gelatinosa, sutura absorbible cuatro-oh con aguja cortante P-13, fórceps adin, portaagujas con mordaza de diamante y tijeras de sutura. Para el cuidado postoperatorio, necesitará una jaula limpia con almohadilla calefactora. Dos décimas de mililitro de enrofloxacino a 22,7 miligramos por mililitro.0,05 mililitros de buprenorfina 0,3 miligramos por mililitro. Primero anestesie la cobaya con ketamina 60 miligramos por kilogramo y xilacina 12 miligramos por kilogramo por vía intramuscular. Este régimen permite de 60 a 90 minutos de anestesia sin depresión respiratoria, lo cual generalmente es tiempo suficiente para realizar este procedimiento.Después de anestesiar al animal, se aplica un lubricante a base de petróleo en los ojos. A continuación, se afeita la parte posterior de la cabeza con una maquinilla eléctrica, desde los segmentos torácicos superiores hasta la parte superior de la cabeza. Luego, se prepara el sitio con Betadine, seguido de alcohol.Ahora el animal está listo para la cirugía. Mi nombre es el Dr. Cliff McGillion. Soy profesor de Otorrinolaringología y Cirugía de Cabeza y Cuello en los Hospitales de la Universidad Case Western Reserve en Cleveland y director de Otología y Neurotología.Lo que quiero comentarles hoy es la técnica quirúrgica para inducir hidropesía endolinfática en el conejillo de indias. Se accede por vía extraoral y se expone el seno sigmoideo, justo anterior y lateral al seno sigmoideo. Se localiza el orificio del sistema endolinfático, se elimina el material del conducto y el material del sáculo, y en realidad se realiza una trepanación del conducto bajo visualización directa.La parte más importante, según creo, del procedimiento es la esqueletización del seno sigmoideo y luego, medial a este, la visualización directa del O del conducto endolinfático. Una vez que se ha preparado el sitio quirúrgico, el animal se traslada al quirófano y se coloca en un soporte para la cabeza. El cuello se flexiona para lograr una exposición adecuada de la cresta occipital y se realiza un campo estéril para garantizar la salud y seguridad del animal.Observe la misma técnica estéril que se requeriría para un paciente humano con el fin de mantener una temperatura corporal adecuada durante el procedimiento; asegúrese de colocar una almohadilla térmica debajo de la superficie operatoria antes de la primera incisión. Se inyecta un marcado alrededor del sitio quirúrgico. El procedimiento quirúrgico comienza realizando una incisión cutánea dorsal en línea media sobre el cuero cabelludo a lo largo del occipucio para lograr una exposición adecuada; retráigase la piel colocando una pinza hemostática en cada lado de la incisión. No será necesario usar electrocauterización, ya que la cobaya posee un mecanismo hemostático robusto.A continuación, se realiza una incisión horizontal a lo largo del músculo del cuello. Para exponer el hueso occipital, una incisión bien colocada puede exponer inmediatamente la línea de la sutura temporoccipital, como se muestra aquí. La sección del nervio occipital mayor, que comúnmente se encuentra debajo del músculo, puede hacer que el animal se estremezca.A pesar de la anestesia adecuada al cortar a través del músculo, es importante sentir el hueso debajo de la hoja. Si no se siente, la incisión podría ser demasiado baja, lo que podría correr el riesgo de una sección de la médula espinal al atravesar el músculo del cuello. Se utiliza un tercer hemostato para sujetar la porción superior de la incisión y lo mantiene en su lugar el ayudante quirúrgico.Se utiliza disección romo para exponer el hueso occipital. Recuerde mantenerse siempre al lado derecho de la cresta occipital externa y que la oreja izquierda sirve como control. En este modelo, se utiliza un elevador perióstico tipo lumper para exponer aún más el cráneo y revelar la cresta occipital externa y la línea de la sutura occipital temporal. El fresado con una fresa diamantada de 1,5 milímetros comienza justo inferior a la línea de la sutura.El objetivo consiste en exponer la fosa posterior y el seno sigmoideo. Toda la perforación debe mantenerse sobre o por debajo de la línea temporo-occipital en todo momento. Mantenga un tubo de succión número cinco para aspirar la sangre.También haga que un asistente mantenga el campo irrigado con solución salina estéril. Debe gotear continuamente desde una jeringa de 10 cc. La perforación provocará algo de sangrado proveniente de la médula, pero la fresa de diamante puede utilizarse para detener los vasos sangrantes a una profundidad de aproximadamente un milímetro.Se hará visible una línea azul tenue. Este es el seno sigmoideo. Quédese aquí mismo.Su posición es lateral al seno sigmoideo. Se puede encontrar la ampolla del conducto endolinfático. Es importante definir los bordes del seno sigmoideo sin penetrarlo.Una vez que el hueso superficial se ha vuelto lo suficientemente delgado, se detiene la perforación y la succión se cambia a un número 40. También se utiliza un mayor aumento. Se emplea un pico recto para retirar suavemente el hueso superficial.El seno sigmoideo se retrae suavemente, descubriendo medialmente el opérculo, que puede no ser visiblemente evidente ya que a menudo estará oscurecido por sangre. Ahora el seno sigmoideo descarnado se retrae suavemente, revelando medialmente el opérculo. La depresión se perfora ahora con una fresa más pequeña de 0,5, destruyendo el saco endolinfático y conduciendo finalmente al conducto endolinfático.El conducto es visible como un óvalo oscuro dentro de la blancura del hueso circundante. Se perfora aproximadamente un milímetro del conducto antes de rellenarlo con cera ósea. La cera ósea se introduce en el conducto utilizando espuma de gel.Esta oclusión del conducto linfático endolinfático inducirá hidrodrops endolinfático. Se utiliza sutura poliglicolida 4.0 absorbible para reunir el músculo. A continuación, se realiza una transición perfecta a una técnica de sutura subcutánea para la incisión en la piel. Con este cierre, no hay necesidad de retirar las suturas posteriormente, y no existe el riesgo de que el animal rasque el sitio o arranque una sutura o grapa.Postoperatoriamente, la cobaya se coloca en una incubadora para mantener la temperatura corporal, con revisiones cada 30 minutos hasta que despierte. Se inspecciona al animal para evaluar la frecuencia respiratoria y el color corporal. Este centro utiliza el antibiótico de amplio espectro inin y buprenorfina para complicaciones relacionadas con el dolor.Como en cualquier cirugía, existen riesgos para el sujeto. Ahora describiré algunas complicaciones intraoperatorias posibles y cómo evitarlas. Depresión respiratoria: el cirujano siempre debe estar atento a la respiración del animal; si la respiración se detiene o se ralentiza.Interrumpa la cirugía e inspeccione visualmente la presencia de movimiento torácico. Si el animal está apnéico, verifique que la boca y la vía aérea no estén obstruidas. Para el sangrado por penetración del seno sigmoideo, utilice espuma de gel y compresión junto con la punta de succión hasta que se detenga la hemorragia.La penetración de la duramadre cubierta con espuma de gel debe realizarse sin perforar más de un milímetro lateral a la seno sigmoideo, ya que de lo contrario se podría lesionar el canal semicircular posterior, lo que invalidaría todos los datos obtenidos para ese conejillo de indias en particular. El bloqueo quirúrgico del conducto endolinfático en el conejillo de indias es una cirugía técnicamente exigente, pero con las herramientas adecuadas, instrucción y conocimiento de la anatomía correspondiente, puede realizarse de manera que sea tanto humanitaria para el animal como útil como modelo de la enfermedad de Ménière humana.

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Investigación

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Biología

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