Montaje de cerebros adultos de Drosophila: un método para preparar portaobjetos para la obtención de imágenes confocales

0 visualizaciones • 2:57 min. • April 30th, 2023

- En un portaobjetos de microscopio cargado positivamente, adhiera dos cubreobjetos con suficiente distancia entre ellos para crear un espacio para que se monten los cerebros de Drosophila. Bajo el microscopio estereoscópico, pipetee los cerebros en medio de montaje en ese espacio. La carga negativa del tejido ayudará a los cerebros a adherirse a la carga positiva en la superficie del portaobjetos.

Retire el exceso de medio de montaje para permitir un posicionamiento preciso de los cerebros en el portaobjetos en un patrón de cuadrícula con los lóbulos de las antenas hacia arriba, luego conecte los dos cubreobjetos adhiriendo un tercer cubreobjetos para cubrir los cerebros.

Para llenar la cavidad, coloque el medio de montaje una gota a la vez en el borde de la cavidad y permita que se extienda por capilaridad para que no moleste el cerebro.

Selle la cavidad con esmalte de uñas y guárdela a menos 20 grados centígrados en la oscuridad para preservar la fluorescencia de los tejidos manchados.

En el protocolo de ejemplo, montaremos cerebros de Drosophila para obtener imágenes confocales de neuronas inmunoteñidas.

- Para montar los cerebros, construye un tobogán de puente. Coloque dos cu

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