Secado químico: preparación de muestras biológicas para microscopía electrónica de barrido (SEM)

- Para empezar, comience por deshidratar y secar una muestra fija para reducir la distorsión de la muestra causada por la eliminación de gases y agua líquida a la presión de funcionamiento reducida de los microscopios electrónicos de barrido convencionales, SEM.

Para deshidratar la muestra, lávela con concentraciones crecientes de etanol en agua hasta alcanzar el 100% de etanol. A continuación, repita este proceso con un agente secante químico en etanol hasta que la muestra se lave con un agente secante puro. Transfiera la muestra y el agente secante a un plato de evaporación. Cúbralo con un mínimo de agente de secado adicional y déjelo secar en una campana extractora durante la noche.

A continuación, monte la muestra preparada en la parte superior de un trozo de microscopio con cinta adhesiva de carbón. Por último, aplique pintura plateada a los bordes del fragmento, y luego desde el borde del talón a cada una de las muestras, para reducir la acumulación de electrones en exceso, lo que podría dar lugar a artefactos de imagen no deseados.

En este experimento, las moscas de la fruta, Drosophila melanogaster, se preparan para el análisis SEM utilizando el agente secante HMDS.

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