Preparación de filetes de larvas: un método para visualizar neuronas sensoriales intactas y células epidérmicas asociadas

- Para orientar una larva para la disección del filete, colóquela en un plato recubierto de silicona que contenga solución salina fría e identifique sus lados dorsal y ventral. Los tubos traqueales que recorren su longitud marcan el lado dorsal, mientras que los cinturones dentículos abdominales identifican el lado ventral.

Luego, con el lado ventral hacia arriba, estira suavemente la larva y sujeta cada extremo al fondo del plato. Esta posición mantendrá intactos los grupos dorsales de neuronas multidendríticas sensoriales y las células epidérmicas asociadas a medida que avanza la disección.

Use tijeras de disección para cortar a lo largo de la línea media ventral de la larva. Sujeta la cutícula a la placa para aplanar la preparación y eliminar las estructuras internas para revelar el tejido muscular subyacente. A continuación, extraiga con cuidado el músculo adecuado para exponer la epidermis y acceder a las neuronas previamente oscurecidas conservando su morfología dendrítica.

En el protocolo de ejemplo, veremos una demostración detallada de la preparación del filete larvario y la eliminación de músculo para ver las neuronas sensoriales y las células epidérmicas.

- Para comenzar