Conteo de Unidades Formadoras de Colonias (UFC): Cuantificación de Bacterias a partir de Cuerpos de Moscas

- Primero, recoja las moscas en la etapa deseada de desarrollo y colóquelas en un tubo estéril. Para contar solo la microbiota interna, esteriliza el exterior de las moscas sumergiéndolas en etanol al 70%. Para medir tanto la microbiota interna como la externa, omita este paso de esterilización. A continuación, triture las moscas en un pequeño volumen de medio de crecimiento bacteriano utilizando perlas de cerámica y un homogeneizador de tejidos, o manualmente con un mortero. Se debe tener cuidado de no introducir bacterias de fuentes externas, para evitar contaminar las muestras.

Ahora debería tener una mezcla homogénea que contenga bacterias que pueda cultivar. Aumente el volumen del homogeneizado utilizando medio bacteriano líquido. Realice diluciones en serie del homogeneizado y coloque un volumen constante de estas diluciones en el medio de crecimiento sólido adecuado para sus bacterias. A medida que las bacterias crecen, se forman colonias en el plato. Encuentre la dilución que tiene un rango de 10 a 100 colonias para determinar las Unidades Formadoras de Colonias, o UFC, de la muestra.

En el protocolo de ejemplo, inocularemos moscas estériles con un cultivo gnotobiótico o ba