Congelación de nematodos: un método para exponer los tejidos interiores de los gusanos para teñirlos

- Transfiera la C. elegans lavada en líquido a un portaobjetos de vidrio previamente recubierto con polilisina, un compuesto que ayudará a que las cutículas de los gusanos se adhieran a la superficie del vidrio. Presione suavemente otra corredera de vidrio hacia abajo con un borde que sobresalga de la corredera inferior. Para inmovilizar a los gusanos sin dañarlos, comprima a los animales evitando cualquier movimiento lateral. Luego, coloque los portaobjetos de vidrio con gusanos intercalados en un bloque de metal dentro de un recipiente de laboratorio aislado lleno de un agente congelante, como nitrógeno líquido o hielo seco.

El metal es un conductor de temperatura eficaz que garantiza que la superficie del bloque esté lo suficientemente fría como para congelar rápidamente las cutículas del gusano en ambas superficies de vidrio. Una vez congelados, separe rápidamente los portaobjetos de vidrio para separar o abrir las cutículas de los gusanos. Proceda con la fijación y tinción del tejido, ya que la interrupción de la cutícula de baja permeabilidad permite que los fijadores químicos y los anticuerpos de tinción accedan a los tejidos del gusano interior. En el siguiente protocolo, v