Drosophila Ensayo de agresión: un método para probar la plasticidad del comportamiento en moscas

- Para evaluar la agresión en moscas, use una cámara de combate cerrada equipada con dos puntos de entrada y un divisor para mantener a los sujetos separados antes del ensayo. Coloca una fuente de alimento en el centro de la cámara para crear conflicto para las moscas. Luego, cargue a los machos previamente aislados y marcados a través de los puntos de entrada a ambos lados de la arena. Retire el divisor y registre los encuentros con las moscas para cuantificar la agresión.

Para establecer el dominio, un macho muestra comportamientos ofensivos estereotipados que aumentan en intensidad, desde acercarse y perseguir al oponente hasta lanzarse, un comportamiento que indica agresión, donde la mosca atacante se eleva sobre sus patas traseras y se abalanza sobre el oponente en un intento de agarrarlo. Por el contrario, el oponente muestra comportamientos defensivos, como huir en retirada del atacante. Así, un perdedor y un ganador emergen de la pelea, y se forma un recuerdo de derrota o victoria en cada oponente.

En el protocolo de ejemplo, veremos cómo se utiliza una configuración que elimina la manipulación de los animales durante el ensayo de agresión para estudiar la formación de la memoria en moscas que han perdido su primera pelea, lo que se denomina efecto "perdedor".

- Comience los experimentos de comportamiento insertando divisores de plástico en cada cámara de combate. Retire el tapón de algodón del tubo de aislamiento y coloque el tubo debajo de un orificio abierto en el costado del aparato. Permitir que la mosca entre en la cámara de combate por geotaxis negativa. Luego, cierre la pared deslizante después de que la mosca haya ingresado a la cámara. Repita el procedimiento para introducir la segunda mosca en la cámara de combate del otro lado del aparato.

A continuación, vuelva a colocar el aparato en la posición de grabación de vídeo iluminada. Comience la grabación de video y retire el divisor de plástico para permitir que las moscas interactúen. Para los experimentos de efecto "perdedor", grabe las primeras peleas durante 20 minutos para garantizar la formación de relaciones de dominancia sólidas. Después de 20 minutos, vuelva a colocar suavemente el divisor de plástico en las cámaras de combate para separar las moscas y detener el video.

- Para inducir una fuerte mentalidad de "perdedor", asegúrese de que las moscas establezcan y mantengan una relación de dominancia durante las primeras peleas, y luego minimice la molestia de los animales al insertar los divisores para separar a las moscas.

- Después de un período de descanso de 10 minutos, comience a grabar y retire suavemente el divisor de plástico. Deja que las moscas interactúen durante 20 minutos más. Detener la grabación después de 20 minutos. Para concluir el experimento, retire las moscas de las cámaras de comportamiento mediante geotaxis negativas invirtiendo el procedimiento descrito anteriormente.