Microinyección de embriones vivos de Drosophila: entrega temprana de reactivos al embrión en desarrollo

- Recolectar embriones vivos de Drosophila y eliminar sus coriones no transparentes. Luego, sobre un cubreobjetos de vidrio, aplique una línea de pegamento de heptano, que es cinta adhesiva disuelta en heptano líquido. Para poder manipular los embriones ahora descorionados, alinee cuidadosamente las muestras en una fila con el adhesivo.

Transfiera el cubreobjetos a una cámara de deshidratación para desecar parcialmente los embriones. Esto evitará la fuga citoplasmática durante o después de las inyecciones. A continuación, retire el cubreobjetos y cubra los embriones con aceite de halocarbono para evitar una mayor deshidratación y permitir que el oxígeno se difunda en los embriones.

Para realizar la microinyección, utilice un sistema de microinyección en un microscopio compatible. Al mirar a través de las piezas oculares, identifique tanto los embriones como la aguja precargada con la solución inyectable. Abra la aguja y asegúrese de que produzca gotas líquidas consistentes y del tamaño adecuado. A continuación, introduzca la aguja en el interior del embrión e inyecte el volumen adecuado. Saque la aguja y proceda a la siguiente, repitiendo la inyección para los embriones restantes.