0 visualizaciones • 3:08 min. • April 30th, 2023
- Comience seleccionando una larva de tercer estadio, la más grande de las formas larvarias, del medio de cultivo, y lávela con agua para eliminar cualquier alimento. Dado que los ojos de la larva, u órganos de Bolwig, se encuentran en el frente superior de la larva, coloque la larva en el centro de una placa de agar con la fuente de luz sobre el animal. Apague la luz de la habitación y permita que la larva se aclimate a la oscuridad.
Dado que la larva es apenas detectable en un punto de luz hecho por la luz visible, encienda las luces LED infrarrojas para iluminar al animal para la cámara. Espere hasta que el animal comience a gatear en línea recta para controlar su camino. Y luego gire la placa para que la larva se arrastre directamente hacia el punto de luz. Grabe al animal arrastrándose hacia la luz y luego alejándose del punto de luz. Esta táctica de evitar la luz ayuda a las larvas a evitar a los depredadores al excavar en la comida.
En el siguiente ejemplo, realizaremos el ensayo de punto de luz para probar la capacidad de diferentes cepas genéticas de larvas de Drosophila para escapar de la luz.
- Antes de introducir la larva en la configuración de imágenes, adquiera un breve video de la posición de la luz y asigne al video de fondo de control sin filtrar el nombre "lightarea1". Vuelva a colocar el filtro en la lente de la cámara y encienda una luz lejos del dispositivo experimental a un ajuste lo más bajo posible, permitiendo que las larvas se observen claramente. Use una cuchara para eliminar algunas larvas del medio de cultivo y seleccione suavemente una tercera larva de estadio.
Lave la larva en agua destilada y colóquela en el centro de la placa de agar. Retire suavemente el exceso de agua de la larva y apague la luz de la habitación. Deje que la larva se aclimate durante dos minutos en un ambiente oscuro antes de encender la luz LED infrarroja. El siguiente experimento de comportamiento de evitación de la luz debe llevarse a cabo en la oscuridad. Para mayor comodidad de la demostración, filmamos a la luz brillante.
Cepille suavemente la larva hasta el centro del plato. Cuando la larva comience a arrastrarse en línea recta, gire la placa para que la larva se dirija hacia el punto de luz. Haga clic en Captura, Configuración y Captura de vídeo para seleccionar la ruta de guardado. Y haga clic en Iniciar grabación para grabar. Deja que la lava se arrastre, entre y salga del punto de luz hasta que esté casi fuera del campo de visión y, a continuación, haz clic en Detener grabación.
Aleje el filtro de la cámara y obtenga un video corto de la posición del punto de luz. A continuación, asigne un nombre a la publicación como un vídeo sin filtrar, "lightarea2", y compare este vídeo con el vídeo "lightarea1" para asegurarse de que no se cambia la posición del punto de luz.