Disección del intestino medio de una mosca adulta: un método para aislar el tracto digestivo

- Para empezar, retira la cabeza de una mosca adulta anestesiada. Cubra la mosca decapitada con una solución que contenga solución salina tamponada con fosfato, o PBS, y albúmina sérica bovina, o BSA, para evitar la desecación. Sostenga la mosca por el tórax con pinzas y luego tire del abdomen con un segundo par de pinzas para exponer el intestino. Dado que el buche, o la bolsa de almacenamiento de alimentos, estará unida al tórax, separe suavemente el intestino del tórax.

Una vez desprendido, aleja el buche del abdomen para desplegar la tripa. Retira el extremo posterior de la mosca para comenzar a liberar el intestino de la cavidad abdominal. Continúa tirando de la tripa para extraer todo el tejido del abdomen. Una vez liberado, retire el intestino anterior, los túbulos de Malpighi, el intestino posterior y los ovarios para dejar solo el intestino medio disecado, el sitio principal de digestión dentro de la mosca.

En el protocolo de ejemplo, diseccionaremos el intestino medio de moscas adultas jóvenes y viejas para analizarlas más a fondo mediante clasificación celular activada por fluorescencia, o FACS.

- Antes de comenzar la disección, anestesiar un vial de 40 moscas con dióxid