0 visualizaciones • 3:10 min. • April 30th, 2023
- Comience con huevos peletizados que se aislaron mediante el blanqueo de gusanos adultos grávidos. Asegúrese de que cada paso de este procedimiento se lleve a cabo de manera estéril para evitar la contaminación de las células cultivadas. Suspenda el pellet en una solución de quitinasa, una enzima que descompone la quitina, un polisacárido grande que es un componente estructural de la cáscara del huevo.
Después de un período de digestión adecuado, centrifugue suavemente los huevos y reemplace el sobrenadante con medio de cultivo celular para detener la digestión. Luego, pasa los embriones a través de una aguja de calibre 18 para separar mecánicamente las células individuales. A continuación, filtre la solución para eliminar los restos de la cáscara del huevo o los grupos de células no separadas. Coloque las células en una placa de cultivo en un cubreobjetos de vidrio recubierto con aglutinina de maní, una lectina que ayuda a las células a adherirse al cubreobjetos al unir los carbohidratos de la superficie celular.
En el protocolo de ejemplo, prepararemos células embrionarias para la diferenciación morfológica y el análisis in vitro.
- Mientras trabaja bajo una campana de flujo lam
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