Enciclopedia de Experimentos de JoVE
Investigación sobre el cáncer
0 visualizaciones • 3:19 min. • April 30th, 2023
El lentivirus es un retrovirus que contiene material genético de ARN. Este virus proporciona un método eficiente y estable para introducir transgenes en líneas celulares cancerosas. Comience agregando neuraminidasa a un tubo que contiene lentivirus que expresa proteína verde fluorescente, o GFP. Mantenga el tubo a 37 grados centígrados durante una hora para aumentar la eficiencia de unión del virus.
A continuación, centrifuga un tubo que contiene suspensión de células tumorales para formar un pellet. Agregue medios de mamosfera que contengan polibreno para resuspender las células. El policereno es un polímero catiónico que aumenta la eficiencia de la infección lentiviral. Ahora coloque el número óptimo de células tumorales por pocillo en una placa de cultivo de tejidos de seis pocillos. Agregue la cantidad requerida de Lentivirus en cada pocillo de la placa de cultivo.
Agite la placa para mezclar el contenido y manténgala a 37 grados centígrados durante 96 horas con un suministro continuo de dióxido de carbono. El lentivirus entra en la célula y libera ARN. La transcriptasa inversa viral convierte el ARN en ADN bicatenario que se integra en el genoma del huésped. Coloque la placa b
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