Cultivo conjunto de células BC: cultivo de células de cáncer de mama con fragmentos óseos para estudiar la proliferación de células cancerosas

Comience colocando un trozo de cera ósea en dos placas de cultivo celular etiquetadas como prueba y control. Pipetee una cantidad adecuada de bioluminiscencia que expresa células de cáncer de mama en cada centro de la placa e incube las placas durante un período específico para ayudar a la unión celular. Coloque un pequeño explante de hueso sobre la cera ósea en la placa de prueba y asegúrelo aplicando presión.

Vierta lentamente un medio de cultivo celular con suero fetal bovino, un suplemento de crecimiento, a cada lado de la placa para sumergir el explante e incubar a 37 grados centígrados durante un tiempo específico. El tejido óseo de la placa de prueba libera factores solubles, como las citocinas y la quinasa SRC, que atraen a las células de cáncer de mama, lo que provoca su migración. Agregue un sustrato a cada placa y coloque las placas en una cámara de imágenes de bioluminiscencia.

La célula cancerosa que expresa la proteína bioluminiscente oxida el sustrato y emite luz. Cuantifique la proliferación midiendo el total de fotones emitidos por cada célula utilizando el software. Las células cancerosas de la placa de ensayo deben proliferar más rápido que las células de la plac