Cultivo tridimensional de células de carcinoma de pulmón: un método para estudiar las interacciones célula-matriz

- Primero, descongele los viales de la matriz de membrana basal a 4 grados centígrados durante la noche. La matriz de la membrana basal está formada por proteínas presentes en el microambiente tumoral que ayudan a mantener las características de las células cancerosas in vitro. Al día siguiente, coloque el vial de la matriz de la membrana basal en hielo para retener la matriz en estado líquido. Lleve las células de cáncer de pulmón a un tubo de centrífuga preenfriado y centrifugue a 4 grados centígrados. Aspire el sobrenadante y golpee suavemente para desalojar el pellet y colocarlo sobre hielo. A continuación, agregue un volumen apropiado de mezcla de membrana basal en este tubo y mezcle para hacer una suspensión celular uniforme. Realice todos los pasos a baja temperatura para evitar que la membrana basal se gelifique.

Transfiera un volumen apropiado de suspensión de matriz celular al centro de cada pocillo en una placa de pocillo preenfriada, cubriendo todo el pocillo. Incubar la placa del pocillo para que la matriz se solidifique. Examine bajo un microscopio para asegurar una distribución uniforme de las células dentro de la matriz. Agregue medio completo de cultivo 3D en cada