Microarray de anticuerpos: una técnica para estudiar la expresión proteica de células de cáncer de pulmón tratadas con miRNA

- Comience agregando una solución de biotina y un tampón de etiquetado a la muestra de proteína. Incubar para facilitar la unión de la biotina a las proteínas. Agregue un reactivo de parada y un vórtice. A continuación, coloque un portaobjetos de microarrays de anticuerpos en una placa que contenga un reactivo de bloqueo para evitar la unión inespecífica de anticuerpos. Lave el portaobjetos con agua destilada doble para eliminar la solución de bloqueo. Coloque el portaobjetos de microarray en una cámara. Mezclar la muestra de proteína biotinilada con una solución de acoplamiento y añadirla al portaobjetos para facilitar la unión de las proteínas diana a sus anticuerpos correspondientes. Transfiera el portaobjetos a un plato que contenga un tampón de lavado y reemplace el tampón con agua destilada doble. A continuación, coloque el portaobjetos en un tampón de detección que contenga estreptavidina marcada con fluorescencia para promover su unión a las proteínas biotiniladas.

Incuba la placa en la oscuridad para mantener la intensidad de la fluorescencia. Retire el portaobjetos y colóquelo en un escáner de microarrays. El escáner busca señales fluorescentes de la estreptavidina unida