Ensayo de formación de colonias: evaluación de la eficacia de los agentes anticancerígenos en las células de cáncer de pulmón formadoras de colonias

- El ensayo de formación de colonias es un análisis in vitro de un fármaco contra el cáncer sobre el crecimiento de la célula cancerosa, que prolifera y se diferencia en colonias en medios semisólidos. Para empezar, siembre las células cancerosas en el medio RPMI con un suplemento de crecimiento: suero fetal bovino, o FBS, y antibiótico. Incubar las células durante el tiempo requerido.

A continuación, recoja la concentración deseada de células en un tubo de microfuga y una centrífuga. Vuelva a suspender el pellet en PBS. Prepare el medio a base de metilcelulosa y dispense a diferentes tubos con FBS para promover un crecimiento óptimo.

Agregue una cantidad apropiada de suspensión celular en tubos y vórtelos para mezclar las celdas con el medio. A continuación, agregue compuestos anticancerígenos en tubos y prepare un control agregando DMSO. Tubos de vórtice.

Agregue esta mezcla de células a la placa de cultivo e incube durante el tiempo deseado. Después de la incubación, agregue bromuro de metiltiazol difeniltetrazolio, o MTT, e incube durante algún tiempo. El MTT reduce la sal amarilla de tetrazolio en células viables a cristales de formazano púrpura. Las colonias viables se vuelve