Ensayo de xenoinjerto de pez cebra: un método para evaluar la eficacia anticancerígena de las terapias sobre la tumorigénesis en el pez cebra in vivo

- Primero, coloque los huevos en una placa de Petri y agregue la solución de Danieau para mantener los huevos recién recolectados. Añadir feniltiourea para inhibir la pigmentación e incubar durante unos días. Después de la incubación, descoriona los embriones con pinzas afiladas y deja que crezcan más.

A continuación, siembre el número deseado de células cancerosas en un matraz de cultivo e incube durante la noche. Ahora agregue compuestos anticancerígenos y siga incubando. Después de la incubación, agregue un tinte rastreador de células fluorescente, que se unirá a la membrana celular y tiñirá las células.

A continuación, agregue tripsina para la disociación celular y diluya las células en la solución de PBS rojo de fenol antes del procedimiento para evaluar el pH. Monta embriones de pez cebra anestesiados en una placa de agar. Ahora cargue el microcapilar con una suspensión de células cancerosas e inyéctelo en el saco vitelino de los embriones.

Transfiera los embriones a placas de cultivo que contengan la solución de Danieau e incube más. A continuación, transfiera algunos embriones en un portaobjetos de vidrio y agregue metilcelulosa para inmovilizarlos. Coloque el portaobjetos