Ensayo de inmunofluorescencia: un método para identificar células tumorales capturadas en un cable médico

- Tome un alambre funcionalizado que tenga una pequeña porción de oro recubierta con un hidrogel junto con anticuerpos de interés. Sumerge la parte dorada del alambre en un frasco que contenga células tumorales. Ciérrelo con un tapón de alambre e incubelo en un rotador de tubos. Las células tumorales circulantes o CTC que muestran antígenos de superficie se unen a los anticuerpos en el alambre. Enjuague el alambre sumergiéndolo en viales que contengan solución salina tamponada con fosfato o PBS y séquelo al aire. Ahora sumerge el alambre en una solución de acetona para fijar las células deshidratándolas.

A continuación, inserte suavemente el cable a través de una punta P200 con la parte funcionalizada en su interior. Llene la cinta con un anticuerpo conjugado con un fluorocromo para sumergir el alambre. Estos anticuerpos marcados se unirán a sus respectivos antígenos presentes en las células. Selle la abertura con una película de laboratorio e incube durante la noche en la oscuridad a 4 grados centígrados. A continuación, lave el alambre con PBS para eliminar los anticuerpos no unidos. Coloque el cable en un soporte de cable y obsérvelo bajo un microscopio fluorescente. Las CTC uni