Preservación de tejidos embebidos en parafina fijada en formol (FFPE): un método para estudiar la morfología de los tejidos

- Primero, coloque una rebanada de pañuelo sobre un papel de filtro empapado con PBS para evitar la contracción o hinchazón de las células equilibrando la osmolaridad. Transfiera el pañuelo a un casete de histo. Cierre y coloque el casete en una solución de formol neutro tamponado, NBF. El NBF contiene formaldehído que se une a los grupos de aminoácidos y evita la formación de ácido fórmico que pigmenta el tejido. Deje el casete toda la noche a baja temperatura, lo que evita la degradación del ácido nucleico y fija el tejido. Deshidrata el tejido con múltiples lavados con alcohol.

Colócalo en parafina líquida y presiónalo hasta el fondo del molde. Retire el peso y coloque la parte inferior del casete histo sobre el pañuelo. Vierta parafina líquida sobre el conjunto. Deje que la configuración se solidifique en una placa fría. La parafina es insoluble en agua y, después de entrar en el tejido deshidratado, se endurece y ayuda a seccionar. Transfiera el bloque de tejido en un micrótomo. Corta y recoge secciones delgadas del tejido en un portaobjetos. Si la sección es demasiado gruesa, el oxígeno y otros nutrientes no pueden difundirse a través de la rebanada, creando un falso gradient