Imágenes de la dinámica del calcio en las células pancreáticas: una técnica para estudiar los cambios en tiempo real en la concentración de calcio citosólico en los islotes pancreáticos

- Los islotes pancreáticos son un grupo de células pancreáticas productoras de hormonas que desempeñan un papel crucial en el mantenimiento de la homeostasis de la glucosa. La concentración elevada de glucosa desencadena el cierre de los canales de iones de potasio, evitando el flujo de iones de potasio, lo que conduce a la despolarización de la membrana. En consecuencia, los canales de iones de calcio dependientes del voltaje se abren, permitiendo la entrada de iones de calcio. Este aumento de la concentración de calcio citosólico estimula la liberación de hormonas como la insulina. En tiempo real, para obtener imágenes de la dinámica citosólica del calcio, transfiera algunos islotes cargados con un tinte indicador de calcio adecuado entre las paredes espaciadoras de una malla fina preensamblada.

Coloque la malla boca abajo en un cubreobjetos colocado dentro de la cámara de imágenes de un microscopio invertido. Coloque una malla gruesa y un peso para inmovilizar las células. Agregue solución de imagen en la cámara. A continuación, configure un sistema de perfusión para introducir glucosa o una hormona de prueba de interés. Dentro de las células, los indicadores de calcio fluoresce