Ensayo de flujo extracelular en esferoides 3D: un método para medir la actividad metabólica de los esferoides de tumores pancreáticos
Enciclopedia de Experimentos de JoVE
Investigación sobre el cáncer
0 visualizaciones • 5:39 min. • April 30th, 2023
- Las células de cáncer de páncreas interactúan con los fibroblastos asociados al cáncer en el microambiente tumoral o TME. Estas interacciones modulan la actividad metabólica de las células cancerosas y afectan la progresión del cáncer.
Los esferoides son los agregados celulares que recapitulan el TME in vitro. Por lo tanto, podemos usar estos esferoides para probar los cambios en las funciones metabólicas del tumor mediante un ensayo de flujo extracelular. Este ensayo mide la concentración extracelular de oxígeno y protones para determinar el metabolismo aeróbico y glucolítico, respectivamente.
Comience por tomar esferoides 3D del tamaño adecuado fabricados mediante el cultivo conjunto de células de cáncer de páncreas con fibroblastos pancreáticos. Ahora, transfiera los esferoides a una placa de análisis de flujo y cúbrala con un cartucho sensor que contenga medicamentos de prueba. Ejecute el ensayo en un analizador de flujo extracelular.
El analizador de flujo inyecta neumáticamente los fármacos de prueba desde el cartucho del sensor a la placa de análisis en puntos de tiempo específicos. En respuesta a los fármacos de prueba, las células liberan protones y oxígeno en la microcá
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