Aislamiento de ADN microbiano en heces: estudio del efecto del enriquecimiento ambiental en la diversidad del microbioma en un modelo de tumor murino

- El enriquecimiento ambiental, o EE, se refiere a las modificaciones en los parámetros de la vivienda para obtener efectos beneficiosos sobre diversas enfermedades como el cáncer. En un ratón portador de tumores, la EE activa el sistema inmunitario y reduce la inflamación, lo que en última instancia mejora la microbiota intestinal y la tasa de supervivencia. Para estudiar los cambios en la microbiota intestinal, añada la cantidad deseada de tampón de lisis de heces en un tubo que contenga las heces de ratón.

Centrifugar la muestra y transferir el sobrenadante a un tubo de microcentrífuga nuevo. Agregue tampón de lisis de cloruro de guanidinio que desnaturaliza la DNasa y la RNasa. A continuación, agregue etanol y transfiera la muestra a una columna de centrifugación de sílice.

El etanol ayuda a que el ADN se una a la sílice. Centrifugar la muestra. Ahora, transfiera la columna a un tubo de microcentrífuga nuevo y agregue un tampón de elución a la columna para eluir el ADN.

Centrifugar la muestra y desechar la columna. Transfiera la muestra a un tubo de PCR y realice una PCR para amplificar el ADN. Cargue el ADN en gel de agarosa y realice una electroforesis para cuantificar el tam