Modelos de ratón con metástasis espontánea: una plataforma para estudiar el potencial metastásico de las células de cáncer colorrectal inyectadas ortotópicamente

- Comience con un cultivo de proteína verde fluorescente, o GFP, que expresa organoides de cáncer colorrectal. Cosecha los organoides. Tratar con una solución de enzima de desprendimiento celular para disociar los organoides en una suspensión unicelular. Centrífuga para separar el sobrenadante que contiene enzimas. Retire el sobrenadante. Resuspender las células de cáncer colorrectal que expresan GFP utilizando un medio artificial que contenga matriz extracelular. Cargue la suspensión de la celda en una jeringa y manténgala en hielo para evitar la solidificación de la matriz a temperatura ambiente.

A continuación, prepare un ratón anestesiado en posición supina. Extraiga suavemente la capa mucosa del recto a través de la abertura anal. Ahora, inyecte la suspensión de células cancerosas que expresa GFP preparada en la capa submucosa rectal que contiene la red de vasos sanguíneos. Permita que el mouse se recupere.

A los pocos días, se desarrolla un tumor primario que expresa GFP en el lugar de la inyección. Con la metástasis espontánea, estas células tumorales se desprenden y entran en la circulación. Con el tiempo, las células se extravasan a órganos distantes y proliferan para form