Establecimiento de un modelo experimental de metástasis en ratones: implantación de células organoides que expresan GFP en el modelo PDX para detectar micrometástasis

- Las micrometástasis son un pequeño grupo de células cancerosas que se desprenden de un tumor primario y se diseminan a diferentes partes del cuerpo a través de la sangre o los ganglios linfáticos. Para detectar micrometástasis, suspenda las células organoides del cáncer colorrectal en PBS para mantener el pH y cargue la suspensión celular en una jeringa. A continuación, coloque un ratón anestesiado en posición prona sobre una cama quirúrgica. Haz una pequeña incisión con unas tijeras en la parte inferior del flanco izquierdo y expone el bazo. Tire suavemente del bazo hacia afuera con pinzas e inyecte lentamente la suspensión celular en el bazo. Cierre la incisión con suturas y devuelva al animal a su jaula. Vigílalo hasta que se recupere.

Después del período deseado de inyección, sacrifique el ratón para diseccionar los tumores primarios y los diferentes tejidos. Observe los tejidos disecados bajo un microscopio de fluorescencia. Las células cancerosas que expresan GFP desarrollan un tumor primario en el sitio de la inyección en el bazo. Algunas células cancerosas del tumor primario se trasladan a un órgano diferente, generalmente el hígado, para formar colonias micrometastásicas