Modelo experimental de ratón de melanoma metastásico: una plataforma para estudiar el potencial metastásico de las células de melanoma en los pulmones

- Los modelos experimentales de metástasis ayudan a evaluar el potencial de las células tumorales para extravasarse y proliferar en sitios particulares después de la inyección intravascular. Para comenzar, prepare una suspensión unicelular de células de melanoma en la concentración deseada utilizando un medio apropiado. Cargue la suspensión en una jeringa.

A continuación, sujete a un ratón en una cámara y asegúrelo de manera que su cola sea accesible. Gire el ratón 90 grados para visualizar su vena lateral. Use una lámpara de calor para aumentar la temperatura ambiente y dilatar la vena de la cola. Ahora, inserte la aguja hacia el extremo distal de la cola e inyecte la suspensión de células de melanoma preparada en la vena dilatada.

Las células tumorales metastásicas inyectadas migran a través del sistema circulatorio. Eventualmente, algunas de estas células se extravasan de la circulación a órganos distantes como los pulmones. Estas células tumorales se adaptan a su nuevo microambiente para proliferar y establecer focos metastásicos experimentales.

En el siguiente protocolo, demostraremos la inyección de células de melanoma B16-BL6 en la vena de la cola en un modelo de ratón para estudiar su potencial metastásico.

- Una vez que se hayan preparado todas las suspensiones de celdas B16-BL6, seleccione un mouse. Sosteniéndolo por la cola, guíe al animal, con la parte trasera primero, hacia un sujetador. Cuando el torso del ratón esté en la cámara principal y su cola fuera del aparato, proceda a tirar del animal hacia el extremo del restricción.

A continuación, inserte el émbolo de retención y continúe empujando el émbolo hasta que el mouse esté seguro. Una vez que el animal esté en su lugar, gire el ratón 90 grados de modo que una de las venas laterales de la cola quede hacia arriba. Luego, usa una almohadilla con alcohol para limpiar vigorosamente el lado de la cola del ratón donde la vena es más visible.

Para prepararse para la inyección, primero, recoja 300 microlitros de la suspensión de 0,5 millones de células por mililitro en una jeringa. Luego, expulse las burbujas de la jeringa invirtiéndola, moviendo su lado y empujando el émbolo. Una vez que se hayan eliminado las burbujas, expulse el cultivo celular para obtener un volumen final de 250 microlitros en la jeringa.

Proceda a extender la cola del ratón con la mano no dominante. Sujétalo de manera que el dedo índice eleve el extremo proximal de la cola y el pulgar presione la parte distal. Con la mano dominante, inserte la aguja en la vena hacia el extremo distal de la cola, en un ángulo diminuto hacia abajo. Luego, inserte la aguja más, ajustándola para que coincida con el ángulo de la vena de la cola.

Después de insertar la aguja, aproximadamente 1 centímetro en la vena de la cola, comience a empujar el émbolo mientras sostiene la jeringa firmemente. Detenga cualquier sangrado sosteniendo la gasa contra el sitio de entrada. Una vez que se haya expulsado la suspensión celular, retire la aguja de la vena y deséchela. A continuación, retire el émbolo del sujetador y coloque el ratón en una jaula receptora.

• Experimental metastasis models - Tools to evaluate tumor cells' propensity to extravasate and proliferate following intravascular injection.
• Melanoma - A potent type of skin cancer that can spread to other organs like the lungs.
• B16-BL6 melanoma cells - Specific melanoma cells used in research for their metastatic potential.
• Tail vein injection - Technique to introduce substances directly into the bloodstream for experimental purposes.
• Metastatic foci - The sites where cancer cells adapt, proliferate and establish after traveling from the original tumor site.

• Melanoma metastasis - This describes how melanoma cells spread from the primary site to other parts of the body (e.g., lungs).
• Basics of tail vein injection - This procedure is a method of administering substances directly into the bloodstream (e.g., B16-BL6 melanoma cells).
• Metastatic foci formation process - This describes how injected cancer cells adapt to new environments, leading to metastasis.
• Link to mouse model - B16-BL6 melanoma cells are injected into a mouse model to study their metastatic potential.

• What is melanoma and how does it metastasize to the lungs?
• What is the purpose of tail vein injection in the metastatic model?
• How do melanoma cells form metastatic foci in distant organs?

• Targeted cancer treatments - Understanding metastasis could guide development of targeted therapies (e.g., for melanoma).
• Cancer research - The B16 mouse model aids in understanding cancer spread (e.g., melanoma metastasis).
• Medical advancements - Learning about metastasis contributes to treating other metastatic cancers (e.g., lung metastasis).
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