Transgénesis basada en vectores miniCoopR: una técnica para detectar genes inductores de melanoma en un modelo de tumor de pez cebra

- En el pez cebra, el melanoma surge de la transformación maligna de los melanocitos, las células productoras de melanina. Para estudiar la aparición del melanoma, utilice un modelo de pez cebra transgénico propenso al melanoma y con deficiencia de melanocitos. Este modelo carece de melanocitos debido a una mutación de pérdida de función en su promotor mitfa específico de melanocitos.

Comience tomando un embrión unicelular de este modelo transgénico en una placa de agar. Coinyectar en el embrión una mezcla que contenga un vector miniCoopR basado en transposones y ARNm de la enzima transposasa. El vector contiene un casete de genes, que comprende un minigen mitfa portador de promotor acoplado a un gen candidato intercalado entre dos elementos de transposón.

Los ARNm coinyectados codifican proteínas transposasas. Estas proteínas actúan sobre los elementos del transposón y catalizan la escisión del casete del vector miniCoopR, seguida de su integración en el ADN genómico del embrión. Posteriormente, el promotor del casete impulsa la expresión tanto del gen mitfa como del gen candidato de interés.

El gen mitfa favorece el rescate y el desarrollo de los melanocitos, mientras que el gen