Tinción de anticuerpos de melanocitos de escamas: una técnica para detectar factores de transcripción expresados en melanocitos asociados a escamas dorsales de modelos de pez cebra

- Los factores de transcripción son proteínas que contienen dominios de unión al ADN. Se unen a secuencias específicas de ADN y ayudan a regular la expresión génica en las células. Para detectar la expresión del factor de transcripción en los melanocitos asociados a las escamas, primero se deben recolectar escamas dorsales pigmentadas oscuras de un pez cebra anestesiado. Fije las escamas y trátelas con una solución de permeabilización para que los melanocitos individuales sean permeables.

Tratar con una solución de lejía para eliminar los gránulos de pigmento de melanina oscura de las células. Este proceso de blanqueo elimina las posibilidades de que se produzcan señales de fondo asociadas al pigmento durante los siguientes pasos de tinción. Incubar con una solución de bloqueo que contenga proteínas para bloquear los sitios de unión a proteínas no específicos en la superficie celular.

Ahora, trate la muestra con los anticuerpos primarios deseados. Estos anticuerpos se unen a sus factores de transcripción diana dentro de las células. A continuación, etiquete la muestra con anticuerpos secundarios marcados con fluorescencia específicos para los anticuerpos primarios. Además, trate la