Ensayo de invasión de células tumorales: un método 3D in vitro basado en matrices nativas para evaluar las interacciones entre las células epiteliales y mesenquimales

- Para comenzar el ensayo, primero, pipetee una suspensión de células de fibroblastos suplementada con ácido ascórbico en una placa de pocillos e incube. El ácido ascórbico aumenta la proliferación de fibroblastos. También estimula la secreción de componentes nativos de la MEC, incrustando así las células en proliferación en la gruesa matriz extracelular.

Suelte suavemente la matriz de la superficie de la placa y deje que flote en el medio. La matriz se contrae y se vuelve más gruesa con una mayor deposición y remodelación de la matriz, dando lugar a un tejido que se asemeja a la dermis nativa. Extienda la matriz sobre una malla porosa. A continuación, siembra las células epiteliales de cáncer sobre la matriz e incuba para que las células se asienten y se adhieran.

Transfiera el ensamblaje a una plataforma de malla preensamblada en un plato. Agregue medios para complementar solo la capa inferior de la matriz para generar una interfaz aire-líquido para las celdas de arriba. Durante el cultivo, la interfaz promueve la proliferación y diferenciación de las células tumorales. Las células también secretan proteasas que degradan la MEC, facilitando su migración e invasión a la matriz.

En