En el útero de electroporación seguido por cultivos neuronales primarias para estudiar la función génica en el subconjunto de neuronas corticales

El objetivo general del siguiente experimento es examinar los efectos en el desarrollo de la knockdown o sobreexpresión de genes en subconjuntos específicos de células progenitoras neuronales en el neocórtex. Esto se logra mediante la electroporación in vivo de ADN en embriones de rata para transfectar células progenitoras neocorticales. Como segundo paso, la región electroporada se disecciona con el fin de enriquecerla para las células transfectadas.

A continuación, estas células se disocian y se colocan en portaobjetos de cámara. Con el fin de examinar los efectos tanto de la alteración genética intrínseca como de la aplicación de factores exógenos, se obtuvieron resultados que muestran efectos sobre el crecimiento y la ramificación de neuritas a partir de mediciones cuantitativas utilizando el software avision. La principal ventaja de esta técnica sobre otras, como la transfección basada en lípidos de cultivos neuronales primarios, es que podemos dirigirnos a subconjuntos específicos de células progenitoras neuronales.