El método de cultivo de embriones de roedores enteros utilizando el sistema de tipo de botella rotador Cultura

En Biología del desarrollo, hay varios animales que se utilizan para el experimento. La técnica de hor agricultura de embriones de pudrición se estableció en la década de 1950 y se desarrolló antes del establecimiento de la manipulación genética moderna en la agricultura hawaiana. El director debilitado se dirige directamente a las áreas de amor con la muerte o transfectación de genes, ya que los embriones pueden ser manipulados y como un microscopio, por lo tanto, todo el cultivo de embr es una herramienta muy útil.

Cuando queremos estudiar el proceso dinámico de desarrollo de los embriones maoríes después del desarrollo post implantación. El crecimiento de los embriones maoríes depende críticamente del presentador funcional, lo que limita el período de cultivo. En general, podemos cultivar embriones durante el período del día embrionario 8,5 a 14,5 en la rata, y E 6,5 y 12,5 en el ratón.

En el laboratorio, cultivamos embriones de rata y ratón utilizando un sistema de cultivo rotativo. Este sistema de cultivo es el más popular y adecuado para el cultivo de embriones de rata y ratón durante la gestación con plomo. Eso es después de E 11.5 y 9.5 en rojo y ratones.

En este vídeo, nos gustaría presentar nuestro protocolo estándar para el cultivo hambriento con embriones E 12.5 RU. En esta condición, el embrión se puede cultivar durante dos días, lo que es lo suficientemente bueno como para examinar las diversas manipulaciones efectivas en la agricultura hor. Hay dos pasos críticos para el éxito.

En primer lugar, el procedimiento de disección debe ser preciso para no dañar el embrión, especialmente los vasos de los bastones. En segundo lugar, el procedimiento debe ser lo más rápido posible. Esto es especialmente cierto para los embriones más viejos.

Por ejemplo, en el caso de los embriones de ratón E 10.5, es decir, deben transferirse en 30 minutos. Aplicamos la técnica de cultivo de embriones enteros para embriones mutantes correctos de seis paquetes. Por ejemplo, analizamos el patrón de migración de las células neurorrespiratorias en el mutante mediante el tratamiento de un pequeño número de células con colorante o mediante el trasplante de células de nivel en los embriones de tipo blanco y fondo apagado.

Además, hemos establecido un método de transferencia de genes a embriones de ratón y rojos cultivados mediante electrooperación que utiliza descargas eléctricas. Simplemente podemos introducir construcciones de genes exógenos, formas negativas dominantes y siRNAs en el área de los cerebros en desarrollo. Por lo tanto, podemos analizar fácilmente las funciones de los genes mediante experimentos de pérdida de función y ganancia de función.

También investigamos el comportamiento de las células niveladas con GFP o RFP utilizando el cultivo de órganos o el cultivo de cortes de seguimiento, o la agricultura. Por lo tanto, puede hacer una variedad de experimentos utilizando el cultivo Lio en combinación con otras técnicas.