Multiespectrales en tiempo real imágenes de fluorescencia para la detección intraoperatoria del ganglio centinela en Oncología Ginecológica

El objetivo general del siguiente experimento es la detección intraoperatoria del ganglio linfático centinela en el cáncer de cuello uterino o el cáncer de vulva. El ganglio linfático centinela es el primer ganglio linfático que drena de un tumor. En este procedimiento, se inyecta un agente fluorescente, inciy y verde o ICG junto con el tinte azul estándar alrededor del tumor primario.

La solución se impulsará al primer ganglio linfático de drenaje. Un sistema de cámara de fluorescencia multiespectral intraoperatoria hecho a medida que se instala en el quirófano antes de la cirugía registra en tiempo real los eventos in vivo de flujo linfático basados en la señal fluorescente, basada en in vivo, así como los resultados ex vivo que indican la fuerza de la señal fluorescente y el método clásico de detección de decoloración azul. El cirujano es guiado en la extirpación del ganglio linfático centinela.

La principal ventaja de esta técnica sobre los métodos existentes es que se trata de un procedimiento de un solo paso durante el cual se realiza la visualización y extirpación de los ganglios linfáticos durante la cirugía. Esta tecnología de plataforma puede mejorar los conceptos actuales en oncología quirúrgica, no solo al proporcionar al cirujano información anatómica, sino al mismo tiempo proporcionar un trazado dinámico de fluorescencia en tiempo real in vivo. Para llevar a cabo este protocolo, configure la cámara de fluorescencia multiespectral intraoperatoria, que suele ser personalizada.

El sistema que se muestra aquí fue desarrollado en el Instituto de Imágenes Biológicas y Médicas de Múnich. En estrecha colaboración con SEARCHs, se utiliza un láser para la excitación de la sonda fluorescente. Los filtros de la cámara se ajustan a la fluorescencia del infrarrojo cercano con una longitud de onda de excitación de 750 nanómetros y una longitud de onda de emisión de 800 más o menos 20 nanómetros cuando la luz de emisión pasa a través del sistema óptico donde se separará en luz visible, fluorescencia intrínseca y fluorescencia del infrarrojo cercano.

Las cámaras CCD están alineadas para detectar los haces de luz separados, de modo que las señales multiespectrales de todas las cámaras se procesan para producir una verdadera biodistribución cuantitativa de fluoro cuatro. La configuración también corrige los artefactos. Los monitores de computadora en el pupitre de control y dentro del quirófano pueden mostrar señales en color y fluorescentes como imágenes separadas, así como superpuestas en una sola imagen en condiciones estériles.

Prepare el agente de contraste fluorescente verde de indocianina a una concentración de 0,5 miligramos por mililitro en agua destilada estéril. No utilice solución salina, ya que esto precipita el reactivo, almacene inmediatamente la solución en un lugar oscuro y fresco para evitar el blanqueo y preservar la integridad del reactivo ICG para minimizar la interferencia con la posición estándar del procedimiento quirúrgico e inicie el sistema de cámaras en el quirófano antes de la cirugía y verifique las conexiones a las pantallas de alta definición para su uso durante la cirugía. Cubra la cámara con cortinas estériles estándar utilizando procedimientos y condiciones estériles como se muestra en el video.

Antes de inyectar el agente fluorescente. Coloque la cámara sobre el paciente y exponga el campo de interés. Ajuste el zoom para enfocar la cámara y apague las luces en el quirófano para una mejor detección de la señal fluorescente.

Jeringa de loto con un mililitro de 0,5 miligramos por mililitro, ICG e igual volumen de tinte azul estándar. Inyecte cuidadosamente el agente fluorescente en cuatro cuadrantes alrededor del tumor primario y trate de evitar el derrame en caso de derrame de ICG en guantes quirúrgicos. Simplemente cambie los guantes durante todo el procedimiento.

Maniobre la cámara para asegurar la grabación continua del área de interés. Adquiera imágenes fijas o videos en tiempo real del flujo linfático y la apariencia del ganglio linfático centinela fluorescente. Un tiempo de exposición de 180 a 200 milisegundos producirá buenos videos.

Guarde todos los datos en el ordenador para futuros análisis. La inspección visual de la decoloración azul causada por la inyección de azul patentado se realiza como parte estándar del procedimiento utilizando las imágenes de fluorescencia grabadas simultáneamente como guía. Se realiza la extirpación en tiempo real del ganglio linfático centinela.

Las imágenes en tiempo real ayudan a detectar ganglios fluorescentes en localizaciones inesperadas, adquirir imágenes ex vivo de todos los ganglios linfáticos extirpados de forma secuencial para detectar la presencia de fluorescencia. Se pueden utilizar tiempos de exposición más largos al capturar imágenes fijas. El ganglio linfático centinela se envía para un análisis histopatológico a fin de detectar la presencia o ausencia de células tumorales.

El poder de la detección intraoperatoria de un ganglio linfático centinela con este protocolo de imágenes de fluorescencia multiespectral se demuestra en este ejemplo de una imagen de fluorescencia multiespectral in vivo de un ganglio linfático en cáncer de vulva. El ganglio linfático fluorescente en la región inguinal antes de la escisión se visualiza claramente. En este cortometraje, mostramos la detección en tiempo real del ganglio linfático centinela basada en fluorescencia en una paciente con cáncer de cuello uterino.

Aquí representamos una imagen ex vivo de un ganglio linfático en el cáncer de cuello uterino. La imagen en color del ganglio linfático se superpuso con la imagen de fluorescencia del mismo ganglio linfático utilizando una pseudo escala de colores para producir una imagen clara con una alta relación señal/fondo. Esta técnica no solo allanó el camino para los investigadores en el campo de la oncología quirúrgica de la resección guiada por imágenes del ganglio linfático centinela, sino que también ofrece posibilidades para la obtención de imágenes específicas dirigidas al tumor para la evaluación de los márgenes tumorales y las intervenciones personalizadas para pacientes con tumores sólidos y posibles metástasis regionales locales.

Por lo tanto, después de ver este video, debería tener una buena impresión de las imágenes de fluorescencia intraoperatoria en tiempo real de los ganglios linfáticos centinela en el cáncer ginecológico.