Monitorización de glutamato en tiempo real in vivo mediante una matriz de microelectrodos recubierta de enzimas
Enciclopedia de Experimentos de JoVE
Neurociencia
0 visualizaciones • 4:34 min. • July 8th, 2025
Comience con un ratón anestesiado asegurado en un marco estereotáxico, con el cráneo expuesto.
Identifique los puntos de referencia del cráneo y luego marque las coordenadas del objetivo.
Perfora alrededor de la marca, retira el colgajo óseo para exponer el tejido cerebral y limpia la superficie.
Conecte una matriz de electrodos múltiples o MEA recubierta con enzima glutamato oxidasa y una micropipeta al marco estereotáxico.
Coloque el electrodo de referencia lejos del MEA mientras mantiene el contacto líquido con el cerebro para completar el circuito.
Llene la micropipeta con una solución de glutamato.
Ahora, baje el MEA y la micropipeta en el tejido cerebral rico en neuronas y astrocitos. Registre la señal eléctrica de referencia del MEA.
Inyecte la solución de glutamato para aumentar rápidamente los niveles de glutamato en el espacio extracelular que contiene el MEA.
La glutamato oxidasa en el MEA oxida el glutamato, generando una señal eléctrica.
A medida que los astrocitos absorben glutamato, los niveles de glutamato extracelular disminuyen, lo que reduce la señal y permite el monitoreo del glutamato en tiempo real.
En este procedimiento, coloque al animal en el dispositivo es
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