JoVE Encyclopedia of Experiments
Neurociencia
0 vistas • 1:18 min • March 4th, 2025
Las Chlamydia pneumoniae son bacterias patógenas que pueden infectar el cerebro humano.
Para detectar estas bacterias, tome una sección de cerebro humano desparafinado, rehidratado e infectado con bacterias infectadas con antígenos proteicos expuestos y fosfatasa endógena inactivada.
Agregue una solución de bloqueo para evitar la unión de anticuerpos inespecíficos.
Incubar con anticuerpos primarios que se unen con el antígeno bacteriano objetivo.
Lavar con un tampón para eliminar los anticuerpos no unidos.
Agregue la solución de bloqueo para aumentar la especificidad del anticuerpo secundario.
Incubar con anticuerpos secundarios conjugados con fosfatasa alcalina, que se unen a los anticuerpos primarios.
Enjuague con agua para eliminar el exceso de anticuerpos.
Añade un sustrato cromogénico que reacciona con la fosfatasa alcalina, formando un precipitado coloreado.
Enjuague con agua para eliminar el exceso de precipitado.
Añade un tinte para teñir los núcleos.
Agregue medios de montaje para montar la sección.
Bajo un microscopio óptico, visualice las bacterias teñidas en el tejido cerebral.