Microscopía electrónica de transmisión de gránulos de lipofuscina en neuronas

Comience con el tejido cortical prefijado, donde las neuronas contienen gránulos de lipofuscina. Estos gránulos ricos en lípidos se acumulan con el envejecimiento y se asocian con afecciones neuropatológicas.

Tratar el tejido con tetróxido de osmio para estabilizar las estructuras celulares, incluida la lipofuscina.

Tratar el tejido con concentraciones crecientes de etanol para deshidratarlo. Luego, incrusta en resina y corta secciones ultrafinas para revelar las estructuras neuronales.

Monte la sección en una rejilla de cobre sin recubrimiento.

Tiñe la sección con acetato de uranilo, una mancha de metal pesado.

Los iones de uranilo interactúan con las biomoléculas celulares, incluidos los lípidos, las proteínas y el ADN.

A continuación, tiñe el tejido con citrato de plomo, que interactúa débilmente con los iones de uranilo preunidos, mejorando el contraste con el fondo.

Coloque el corte teñido bajo un microscopio electrónico de transmisión para exponerlo a un haz de electrones enfocado.

Las biomoléculas teñidas enriquecidas con tinciones de metales pesados, dispersan electrones fuertemente en comparación con el fondo.

Los gránulos de lipofuscina aparecen como grupos irregulares y