JoVE Encyclopedia of Experiments
Neurociencia
0 vistas • 1:25 min • March 4th, 2025
Tome secciones fijas del nervio óptico de una rata de control y de una rata con lesión del nervio óptico.
La sección de control exhibe axones con vainas de mielina muy compactas que contienen capas concéntricas de membrana plasmática. La sección lesionada exhibe mielina descompactada con grandes huecos.
Incuba con un complejo de osmio-ferrocianuro que se une a los lípidos y mejora el contraste de la vaina de mielina.
Tratar con tiocarbohidrazida para crear sitios de unión adicionales para el osmio.
Vuelva a aplicar osmio para mejorar aún más el contraste de lípidos.
Teñir con metales pesados, que se unen a las macromoléculas y mejoran el contraste estructural.
Deshidratar usando concentraciones crecientes de alcohol y enjuagar con acetona para incrustar la resina.
Incrusta el tejido en resina y recubre la resina con oro para mejorar la calidad de la imagen.
Utilice la microscopía electrónica de barrido de cara de bloque en serie para cortar y obtener imágenes simultáneamente. Enfoca el haz de electrones en la superficie y detecta los electrones retrodispersados para generar imágenes.
Las vainas de mielina parecen oscuras, mientras que los espacios dentro de las vainas dañadas parecen más claros, lo que permite diferenciar entre mielina normal y dañada.