Enciclopedia de Experimentos de JoVE
Neurociencia
0 visualizaciones • 1:21 min. • March 4th, 2025
Tome una sección de tejido cerebral de un ratón sometido a hipoperfusión cerebral crónica leve, o MCCH, e inyectado con péptidos de beta amiloide.
La MCCH se caracteriza por una reducción del flujo sanguíneo al cerebro. Esto limita el suministro de oxígeno y nutrientes a la capa de células endoteliales de los vasos sanguíneos cerebrales, dañando las células.
El daño aumenta la permeabilidad de la pared vascular, lo que permite que los péptidos beta amiloide inyectados se acumulen en la pared y formen placas.
Lave la sección con un tampón para eliminar los productos químicos residuales.
Incubar con tioflavina S, un tinte fluorescente que se une a las placas amiloides.
Lave la sección manchada con concentraciones decrecientes de alcohol para eliminar cualquier tinte suelto y rehidratar el tejido.
Coloque la sección en el tampón para mantener la hidratación.
Monte la sección utilizando un medio de montaje que conserve la intensidad de fluorescencia del tinte.
Bajo un microscopio de fluorescencia, examine la presencia de depósitos de amiloide marcados con fluorescencia para confirmar la agregación de beta-amiloide inducida por MCCH.