Tinción de plata de ovillos neurofibrilares en secciones del cerebro de un modelo de ratón de la enfermedad de Alzheimer

Tomemos secciones cerebrales fijadas químicamente obtenidas de un modelo de ratón hembra de la enfermedad de Alzheimer.

Estas secciones contienen ovillos neurofibrilares, agregados anormales de la proteína tau que se encuentran dentro de las neuronas del hipocampo.

Lave las secciones con tampón, seguido de agua desionizada.

Tratar con ácido peryólido para oxidar los grupos glicosil asociados a los agregados, formando grupos aldehídos.

Lavar con agua desionizada y añadir una solución alcalina de yoduro de plata. Los iones de plata forman complejos con los aldehídos, creando sitios de nucleación.

Lavar con un ácido débil diluido para eliminar la plata no unida y neutralizar el pH.

Enjuague con agua desionizada.

Agregue una solución reveladora enfriada que contenga un agente reductor para convertir los iones de plata en plata metálica, produciendo un color marrón pálido.

Enjuague con un ácido débil diluido para detener el desarrollo.

Monte las secciones, deshidrátelas utilizando concentraciones de alcohol crecientes y aplique un medio de montaje.

Selle las secciones con un cubreobjetos.

Con un microscopio óptico, visualice los ovillos neurofibrilares.