Visualización del flujo sanguíneo cerebral durante la isquemia en un ratón mediante un trazador fluorescente

Asegure un ratón anestesiado en posición supina.

Haga una incisión en el cuello para exponer y ligar sin apretar las arterias carótidas comunes bilaterales.

Cierre la incisión sin apretar y coloque el ratón en posición prona.

Afeitar el cuero cabelludo, desinfectar y hacer una incisión para exponer el cráneo.

Retira el tejido blando y pega un marco de metal al cráneo sobre la región de interés.

Asegure el mouse en una placa de acero.

Taladre para adelgazar el cráneo hasta que los vasos sanguíneos cerebrales superficiales se vuelvan visibles.

Inyecte dextrano marcado con fluoróforos en la vena de la cola.

El dextrano circula a través del torrente sanguíneo y llega al cerebro, marcando los vasos sanguíneos cerebrales.

Usando un microscopio de fluorescencia, visualice el flujo sanguíneo cerebral a través del cráneo adelgazado.

Coloque el ratón en decúbito supino y apriete las suturas de la carótida para restringir el flujo sanguíneo cerebral, simulando isquemia.

Vuelva a visualizar microscópicamente a través del cráneo adelgazado para identificar áreas isquémicas con flujo sanguíneo reducido y detectar fugas de plasma.