Enciclopedia de Experimentos de JoVE
Neurociencia
0 visualizaciones • 1:17 min. • March 4th, 2025
El heparán sulfato, un glicosaminoglicano, está presente en las placas amiloides asociadas con la enfermedad de Alzheimer.
Para visualizar el sulfato de hepán, comience con una sección de tejido del hipocampo humano enfermo que contenga placas amiloides.
Fije la sección de tejido con un fijador para preservar las estructuras celulares.
A continuación, trate el tejido con un agente bloqueante para evitar la unión de anticuerpos inespecíficos.
Añadir un detergente no iónico para permeabilizar las membranas celulares.
Incubar el tejido con anticuerpos primarios que se dirigen específicamente al heparán sulfato dentro de las placas amiloides.
Lavar los anticuerpos primarios no unidos.
A continuación, agregue anticuerpos secundarios conjugados con fluoróforos, que se unen a los anticuerpos primarios unidos al heparán sulfato.
Eliminar los anticuerpos no unidos.
Tiñe los núcleos con un tinte fluorescente.
Por último, utilice un microscopio de fluorescencia para visualizar el sulfato de heparán marcado con fluorescencia dentro de las placas de amiloide y los núcleos de color azul en la sección de tejido enfermo.