Enciclopedia de Experimentos de JoVE
Neurociencia
0 visualizaciones • 1:23 min. • March 4th, 2025
Tomemos un cerebro fijado químicamente de un ratón sometido a estrés crónico.
El estrés afecta la función de los oligodendrocitos, alterando la vaina de mielina rica en lípidos que rodea los axones neuronales en la corteza prefrontal medial, una región del cerebro que regula las emociones.
Vuelva a aplicar el fijador para preservar la arquitectura del tejido. Sumerja el tejido en un crioprotector para reemplazar el agua, evitando la formación de cristales de hielo durante la congelación.
Congela el cerebro y luego córtalo en rodajas coronales.
Monta las rodajas en portaobjetos, luego rehidrátalas en agua para mejorar la penetración de las manchas.
Calienta las rodajas en una solución que contenga iones de oro. Estos iones se unen selectivamente a los lípidos en la vaina de mielina y forman depósitos metálicos de oro, marcando las neuronas mielinizadas.
Calentar con un agente reductor para reducir el exceso de iones de oro, luego enjuagar para eliminarlos y deshidratar el tejido utilizando concentraciones crecientes de alcohol.
Utilice xileno para aumentar la transparencia del tejido y montar los portaobjetos.
Usando microscopía, visualice las neuronas mielinizadas teñidas de oro y evalúe los cambios inducidos por el estrés.