Name: Contraste de imagen mejorada del buque utilizando MicroCT (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2011-01-27T17:30:00.000+00:00
Duration: 5 min 50 s
Description: Aprende a realizar imagenología vascular con contraste usando microCT en ratones vivos. Este método permite analizar redes vasculares y evaluar respuestas tumorales en estudios preclínicos de oncología.

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Este trabajo fue apoyado en parte por el premio 5R01CA133229 NCI-03.

1. Las inyecciones de animales Antes de la inyección intravenosa de vena de la cola, la piel de la cola se debe limpiar con alcohol isopropílico matorrales para fines de esterilización. Los ratones se debe inyectar con 0,2 ml/20 g de un joven de 20 mg de yodo / mL del agente de contraste yodados bloodpool (Exia 160XL; Binito Biomedical, Inc. Ottawa, ON, Canadá) a través de la vena de la cola distal utilizando el espacio muerto de baja y media CC U -100 28G ½ Jeringas de Insulina (Producto # 329461, Becton Dickinson and Company, Nueva Jersey, EE.UU.). 2. Preparación de los animales Después de 10 minutos de la inyección, los animales deben estar preparados para microCT imágenes. En primer lugar, el animal debe ser anestesiado en una caja y un 2% de isoflurano en oxígeno al 100% a una tasa de 2,5 litros por minuto. Un ungüento lubricante ocular se deben aplicar para evitar la desecación de la córnea durante la anestesia. La temperatura del cuerpo debe mantenerse a 37 ° C por un almohadillas de calor. 3. MicroCT imágenes Los ratones se deben analizar en una unidad de microCT capaz de realizar análisis de animales vivos. Para minimizar artefactos de movimiento y la estabilidad, los ratones pueden ser colocados en un producto comercial multi-modalidad de la cámara (Numira Biosciences, Salt Lake City, UT), con suministro de aire y de escape. Para evitar un episodio de hipotermia en los animales durante las exploraciones microCT, almohadillas de gel (corsé caliente Crioterapia, CVS Pharmacy, Woonsocket, RI), Dedo Warmer (Fábrica de calor, Vista, CA) o almohadillas Thermipaq Clay (Thermionics, Springfield, IL) puede ser utilizados. Coloque estas almohadillas térmicas debajo de la cama de espuma para mantener el ratón a 37 ° C, evitando el contacto directo con el animal. Los signos vitales de los animales, tales como la temperatura corporal, la respiración y la frecuencia cardiaca debe ser monitoreada mediante el seguimiento de pequeños animales y sistemas de apertura de puerta, como instrumentos SA (Stony Brook, NY). El protocolo de imágenes siguientes se pueden utilizar como una guía para ayudar a determinar los parámetros de análisis apropiado para todas las unidades microCT. Los animales utilizados en este experimento fueron escaneadas a una resolución de 93 m en un matraz aforado de escáner CT GE eXplore Locus (GE Healthcare, Londres, Ontario). Este escáner volumétrico utiliza un 3500 x 1750 detector CCD para Feldkamp de haz cónico de reconstrucción. Los parámetros de plataforma independiente del tiempo de corriente, voltaje y la exposición se mantiene constante a 450 mA, kVp 80 y 100 ms, respectivamente. Los parámetros estándar del tiempo de exposición, cuadros por ver y el número de puntos de vista pueden ser variadas y puede ser de 100 ms, 5-8 y 360-720, respectivamente, con tiempo total de aproximadamente 20 minutos. Las imágenes fueron reconstruidas con el software del fabricante EVSBeam propietarios. 4. Imagen de la representación Los datos microCT reconstruida puede ser utilizado para avanzados isosuperficie, unidimensional o bidimensional de transferencia de imágenes de representación la función utilizando el software de procesamiento de imágenes Seg3D (Seg3D, <a href="http://www.sci.utah.edu/cibc/software">http://www.sci.utah.edu/cibc/software</a> ). 5. Resultados representante Por favor vea la figura adjunta de un ratón de tipo salvaje escaneados con eXIA160XL con los ajustes mencionados en el apartado de métodos. <img src="/files/ftp_upload/2377/2377fig1.jpg" alt="Figura 1" data-altupdatedat="1787634011000" data-alt="Figura 1"> Figura 1. Bidimensional función de transferencia (2DTF) la imagen de representación de un ratón de tipo salvaje creados con software de procesamiento de imágenes Seg3D (Seg3D, <a href="http://www.sci.utah.edu/cibc/software">http://www.sci.utah.edu/cibc/software</a> ). El animal fue inyectado con eXIA160XL y 10 minutos después microCT escaneadas a 93 micras de resolución isométrica con los ajustes mencionados en el apartado de métodos. Video 1. Bidimensional función de transferencia (2DTF) la representación basada en la rotación de 360 ° película de un ratón de tipo salvaje creados con software de procesamiento de imágenes Imagevis3D (Imagevis3D, http://www.sci.utah.edu/cibc/software). El animal fue inyectado con eXIA160XL y 10 minutos después microCT escaneadas a 93 micras de resolución isométrica con los ajustes mencionados en el apartado de métodos. <a href="/files/ftp_upload/2377/2377_Suresh_Prajapati_Representative_Results.mov">Haga clic aquí para ver el video</a>

<ol><li>Holdsworth, D. W., Thornton, M. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Micro-CT+in+small+animal+and+specimen+imaging%5BTitle%5D)+AND+%22Trends+in+Biotechnology%22%5BJournal%5D)">Micro-CT in small animal and specimen imaging.</a> Trends in Biotechnology. 20, 417-424 (2002).</li>
<li>Kindlmann, G. L., Weinstein, D. M., Jones, G. M., Johnson, C. R., Capecchi, M. R., Keller, C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Practical+Vessel+Imaging+by+Computed+Tomography+in+Live+Transgenic+Mouse+Models+for+Human+Tumors%5BTitle%5D)+AND+%22Molecular+Imaging%22%5BJournal%5D)">Practical Vessel Imaging by Computed Tomography in Live Transgenic Mouse Models for Human Tumors.</a> Molecular Imaging. 4, 417-424 (2005).</li>
</ol>

Todos los procedimientos con animales se realizaron de conformidad con las Directrices para el Cuidado y Uso de Animales de Laboratorio y fueron aprobados por el Comité Institucional y el empleo Comisión (IACUC) de la Universidad de Texas Health Science Center en San Antonio.

El objetivo principal de esta técnica de imagen con un contraste mejorado barco microCT es proporcionar un método óptimo para la generación de bases de datos de alta calidad para el análisis de las redes vasculares en ratones vivos. Para microCT imagen, mejor relación señal-ruido de los tejidos blandos se logra ya los tiempos de exploración con un mayor número de puntos de vista y el número de fotogramas por ver 2. Identificación del buque depende fundamentalmente de la identifica...

<table><tbody><tr><td>eXIA 160XL</td><td>Binito Biomedical, Inc.</td><td>eXIA160XL-01</td><td></td></tr></tbody></table>

contraste de imagen mejorada del buque utilizando microct

Contrast Enhanced Vessel Imaging using MicroCT

Microscópica tomografía computarizada (microCT) ofrece imágenes de alta resolución volumétrica de la anatomía de la vida de pequeños animales. Sin embargo, el contraste entre los diferentes tejidos y fluidos del cuerpo es de por sí pobres en micro-CT imágenes 1. Bajo estas circunstancias, la visualización de los vasos sanguíneos se convierte en una tarea casi imposible. Para superar esto y para mejorar la visualización de los vasos sanguíneos agentes exógenos contraste se puede utilizar. En este documento, se presenta una metodología para la visualización de la red vascular en un modelo de roedores. Mediante el uso de una acción prolongada coloidal acuosa polidispersos yodado sangre piscina de contraste, evaluación de impacto ampliada 160XL, hemos optimizado los parámetros de adquisición de imágenes y técnicas de representación de volumen para encontrar los vasos sanguíneos de los animales vivos. Nuestros hallazgos sugieren que, para lograr un contraste superior entre el hueso y los tejidos blandos de la embarcación, de varios marcos (por lo menos 5.8 / frames per view) y 360-720 puntos de vista (para un total de 360 ​​°) las adquisiciones eran obligatorias. También hemos demostrado el uso de una función de transferencia de dos dimensiones (donde el color y la opacidad voxel fue asignado en proporción al valor de la TC y la magnitud del gradiente), en la visualización de la anatomía y poner de relieve la estructura de interés, la red de vasos sanguíneos. Este prometedor trabajo sienta las bases para la evaluación cualitativa y cuantitativa de la anti-angiogénesis estudios preclínicos utilizando transgénicos o xenoinjerto ratones portadores de tumores.

Un mayor contraste de imagen pequeña embarcación animales microCT es una manera rápida, rentable y de alto rendimiento para la técnica serial<em&gt; In situ</em&gt; Examen para el desarrollo del tumor, para analizar la red de vasos sanguíneos que los alimentan, y después de la respuesta de los tumores a la intervención terapéutica preclínicos (s).

Contraste de imagen mejorada del buque utilizando MicroCT

La tomografía computarizada microscópica (microCT) ofrece imágenes volumétricas de alta resolución de la anatomía de animales pequeños vivos. Sin embargo, el contraste entre...

El objetivo de esta técnica de imagen de vasos con contraste mejorado mediante tomografía computarizada microscópica o micro TC es proporcionar un método óptimo para generar conjuntos de datos de alta calidad para el análisis de redes vasculares en ratones vivos. Esto se logra mediante la inyección intravenosa de un agente de contraste radiopaco in vivo. Luego, el animal se prepara para la imagen de micro TC induciendo anestesia y posicionando firmemente al animal en una cámara multimodal para reducir los artefactos de movimiento durante las exploraciones de micro TC.Tras las exploraciones, los datos de micro-TC se reconstruyen y cargan en el software de visualización. El paso final del procedimiento consiste en ajustar los parámetros de la función de transferencia bidimensional para mejorar la visibilidad de los vasos sanguíneos y asignar diferentes colores a los vasos sanguíneos, al hueso y al tejido blando con fines de diferenciación. Finalmente, se pueden obtener resultados que muestran la red vascular en animales vivos mediante imágenes mejoradas con contraste opaco a la TC y la representación mediante función de transferencia bidimensional.Hola, soy Sue Resh, PJA Patti del Nú

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Medicine

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La visualización de los vasos coronarios es fundamental para avanzar en nuestra comprensión de las enfermedades cardiovasculares. Aquí se describe un método para la perfusión vascular coronaria murino con una goma de silicona radiopaco (Microfil), en preparación para la micro-tomografía axial computerizada (μCT) de imágenes.

Perfusión retrógrada y llenado de la vasculatura coronaria del ratón, como preparación para la Micro tomografía computarizada

Fuente: Choi, J. P. et al. Imágenes de inducción y micro-TC de malformaciones cavernosas cerebrales en modelo de ratón. J. vis. exp. ( 2017)Este video demuestra el uso de imágenes de micro-CT para visualizar lesiones de malformación cavernosa cerebral (CCM) en el cerebro de un ratón. En él se detallan los pasos para la preparación de la muestra, la obtención de imágenes y la reconstrucción de imágenes en 3D para evaluar la densidad y la ubicación de las lesiones de la MCC en el tejido cerebral.

Imágenes de micro-TC con contraste de lesiones de malformaciones cavernosas cerebrales en el cerebro de un ratón

Este método describe el uso de la tomografía microcomputarizada cuántica (MicroCT) para evaluar la morfología cardíaca, la función, la perfusión, el metabolismo y la viabilidad con el agente de contraste yodado en ratones con isquemia miocárdica inducida experimentalmente. La técnica se puede aplicar para la obtención de imágenes longitudinales in vivo no destructivas de alto rendimiento de varios modelos animales de enfermedades cardíacas humanas.

En Vivo evaluación cuantitativa de la estructura miocárdica, la función, perfusión y viabilidad Usando computarizada micro-tomografía cardiaca

Este protocolo describe la aplicación de la tomografía combinado fluorescente en el infrarrojo cercano (NIRF) de formación de imágenes y micro-computarizada (microCT) para la visualización de tromboembolia cerebral. Esta técnica permite la cuantificación de la carga de trombo y la evolución. La técnica de imagen NIRF imagina y marcado con fluorescencia de trombos en el cerebro escindido, mientras que la técnica microCT visualiza trombo dentro de animales vivos utilizando nanopartículas de oro-.

Imagen Fluorescente combinado del infrarrojo cercano y la tomografía computarizada-Micro para visualizar de manera directa tromboembolia cerebral

Este artículo describe una metodología detallada del uso de un caucho de silicón radiopaco con base de plomo para inundar la vasculatura murina para la cuantificación del diámetro aórtico en un modelo murino de aneurisma aórtico y disección.

Análisis de Micro-CT cuantitativa de Aortopathy en un modelo murino de disección y aneurisma de la aorta inducida por β-oxidasa

El objetivo de esta técnica es la visualización ex vivo de redes arteriales pulmonares de ratones postnatales y adultos tempranos a través de la inflación pulmonar y la inyección de un compuesto radioopaco a base de polímeros a través de la arteria pulmonar. También se discuten las posibles aplicaciones para los tejidos fundidos.

Fundición vascular de pulmones de ratón postnatales tempranos y adultos para imágenes micro-CT

Aquí, presentamos un protocolo para obtener imágenes de micro tomografía computarizada de alta resolución de corazones enteros de mamíferos grandes sanos y patológicos con mejora de contraste selectivo de colágeno.

Técnicas de preparación de tejidos para imágenes de microtomografía computarizada mejoradas con contraste de modelos cardíacos de mamíferos grandes con enfermedades crónicas

La tomografía microcomputarizada de doble fundición de resina, o DUCT, permite la visualización, digitalización y segmentación de dos sistemas tubulares simultáneamente para facilitar el análisis 3D de la arquitectura de órganos. DUCT combina la inyección ex vivo de dos resinas radiopacas seguida de la tomografía microcomputarizada y la segmentación de los datos tomográficos.

DUCT: Fundición de doble resina seguida de tomografía microcomputarizada para análisis hepático 3D

Aquí, describimos un método de visualización y cuantificación para los vasos murinos de las extremidades posteriores utilizando tomografía computarizada de micro-rayos X.

Preparación de muestras para la visualización tridimensional basada en tomografía computarizada de vasos murinos de las extremidades posteriores

Utilizando un modelo de ratón de enfermedad del hígado graso no alcohólico (EHGNA) inducida por la dieta, describimos el uso de nuevas técnicas de imagen de microtomografía computarizada in vivo como método no invasivo para evaluar las etapas de progresión de la EHGNA, centrándonos predominantemente en la red vascular hepática debido a su participación significativa en la desregulación hepática relacionada con la EHGNA.

Nuevas técnicas de imagen de microtomografía computarizada in vivo para evaluar la progresión de la enfermedad del hígado graso no alcohólico

En este protocolo, discutimos la implementación de un modelo de trasplante hepático ortotópico (OLT) exitoso en ratones. Además, también se discuten los adyuvantes para analizar más a fondo la permeabilidad del aloinjerto después de una OLT exitosa en un ratón, específicamente utilizando exploraciones de microtomografía computarizada (microCT).

Trasplante hepático ortotópico exitoso en ratones mediante angiografía por microtomografía computarizada

Aprende a realizar imagenología vascular con contraste usando microCT en ratones vivos. Este método permite analizar redes vasculares y evaluar respuestas tumorales en estudios preclínicos de oncología.

Contraste de imagen mejorada del buque utilizando MicroCT

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