Entrega viral dirigida a neuronas corticoespinales en una rata neonatal para estudiar la lesión de la médula espinal
Enciclopedia de Experimentos de JoVE
Neurociencia
0 visualizaciones • 2:32 min. • August 29th, 2025
Comience con una rata neonatal anestesiada con una médula espinal cervical expuesta quirúrgicamente.
A esta rata se le ha inyectado un virus anterógrado que codifica un receptor de diseño y una proteína fluorescente: el virus se dirige a las neuronas del tracto corticoespinal (CST) en la corteza somatomotora del cerebro.
Identificar la línea media de la médula espinal usando la arteria espinal.
Coloque una aguja de vidrio que contenga un virus retrógrado, que codifica una enzima recombinasa, detrás de la lámina espinal objetivo donde residen las terminales del axón CST.
Baje la aguja en la médula espinal e inyecte el virus.
Deje que el virus se difunda, luego retire lentamente la aguja y suture la incisión.
El virus ingresa a la terminal del axón CST y viaja retrógradamente al cuerpo celular, donde expresa la enzima recombinasa.
Esta enzima activa el transgén entregado por el virus anterógrado, permitiendo la expresión del receptor de diseño y la proteína fluorescente solo en neuronas doblemente infectadas. Este método permite el análisis dirigido de las neuronas CST en la lesión de la médula espinal.
Para inyecciones directas en la médula espinal, use la punta de la aguja de inyección de
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