Trasplante de progenitores neuronales derivados de células madre en cortes corticales humanos

Comience con un cultivo adherente de células progenitoras neuronales derivadas de células madre preparadas para la diferenciación en neuronas corticales.

Retire el medio, luego agregue una enzima para alterar la matriz extracelular y separar las células.

Use un inhibidor para neutralizar la enzima, luego agregue un medio nuevo.

Transfiera la suspensión a un tubo, centrifugue y deseche el sobrenadante para aislar las células.

Vuelva a suspender las células en una matriz de membrana basal para facilitar el trasplante en el tejido cerebral, luego cárguelas en un tubo capilar frío.

Tome un corte cortical humano en un conjunto de transpozo que contenga un medio.

Retire parte del medio y luego inyecte gotas de la suspensión celular en el tejido.

Incubar para permitir que la matriz se solidifique.

Agregue un medio para sumergir el tejido, luego incube para permitir que las células progenitoras se diferencien en neuronas, extiendan sus neuritas y formen sinapsis con las neuronas corticales del huésped.

El corte cortical ahora está listo para el análisis.

Retire el medio del matraz de cultivo celular. En el séptimo día de diferenciación, separe las células GFP-lt-NES cebadas corticalmente agregando 5