Enciclopedia de Experimentos de JoVE
Neurociencia
0 visualizaciones • 2:37 min. • August 29th, 2025
Comience con un ratón modificado genéticamente cuyas neuronas del hipocampo expresan receptores de diseño activados exclusivamente por drogas de diseño o DREADD.
Estos receptores diseñados responden selectivamente a los fármacos de prueba sintéticos sin responder a las moléculas endógenas.
Desaliña el ratón con regularidad para minimizar el estrés y aclimatarlo al procedimiento.
A continuación, pese el ratón para calcular la dosis correcta del medicamento.
Durante el manejo del mouse, use una luz roja tenue para evitar la interrupción circadiana.
Escoger suavemente el ratón para inmovilizarlo.
Con una pipeta, tome la solución del fármaco de prueba y forme una gota en la punta. Ahora, acércate al ojo
y suelta la gota en su superficie.
Regrese el ratón a su jaula de origen. Repita la administración del medicamento varias veces.
El medicamento se absorbe a través del ojo y entra en el cerebro.
Luego cruza la barrera hematoencefálica y llega a la región del hipocampo. Más tarde, se une a los receptores DREADD y activa las neuronas, lo que permite una neuromodulación precisa y no invasiva.
Para la administración repetitiva de CNO, a partir de cuatro semanas después de la inyección, aclimate a los animales al manejo desaliñando cada ratón tres minutos al día durante tres o cuatro días antes de la administración de las gotas para los ojos. Cuando los ratones se hayan aclimatado al manejo, pese cada ratón para determinar la cantidad adecuada de CNO que se administrará para lograr un miligramo de CNO por kilogramo de concentración de peso corporal.
Dos horas antes de que se apaguen las luces durante la fase inactiva, cargue de uno a tres microlitros de la solución de CNO preparada en una micropipeta P10 e inmovilice al ratón mediante scruffing. Expulse lentamente la solución hasta que se forme una gota estable en la punta de la pipeta y acerque con cuidado la gota a la córnea hasta que la solución se administre sin tocar la punta de la pipeta con el ojo del ratón. Luego, regrese el ratón a su jaula de origen antes de aplicar las gotas para los ojos CNO en el ojo del siguiente animal.
En los casos en que sea necesario administrar CNO durante la fase activa del ratón, asegúrese de que haya una luz roja tenue para el manejo adecuado de los animales y la administración de CNO.